Fas胞外区基因的构建、表达、纯化及多克隆抗体的制备

目的构建Fas胞外区(eFas)基因的表达载体,表达纯化重组蛋白,进行多克隆抗体的制备,为进一步功能研究奠定基础。方法通过重叠PCR获得eFas基因的编码序列,构建pET-22b(+)/eFas表达载体,转化大肠杆菌Rosetta-gami,IPTG诱导表达,Ni-NTA柱亲和纯化,SDS-PAGE鉴定重组蛋白的纯度。将纯化的eFas融合蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,通过ELISA方法检测多克隆抗体的效价。结果获得了eFas的编码序列与表达载体,目的蛋白主要在包涵体中表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,纯化的重组蛋白纯度达95%以上。结论eFas融合蛋白基因的构建、表达、纯化以及多克隆抗体的制备,为进一步研究Fas提供了材料

柱前衍生化高效液相色谱法测定2-去氧葡萄糖的含量

目的建立柱前衍生化高效液相色谱法测定2-去氧葡萄糖(2-DG)含量的方法。方法采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)为柱前衍生化试剂,将2-DG在碱性条件下衍生化后直接进样测定。分离柱为HypersilODS2色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为100 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH 5.5)-乙腈(78∶22),流速1.0 mL·min-1,波长249 nm。结果 2-DG在19.68~393.6μg·mL-1浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=0.9997);其定量限(S/N=10)和最低检出限(S/N=3)分别为7.8和3.1 ng;平均回收率为101.21%,RSD 0.63%。结论该方法简便实用、检测灵敏度高、测定结果准确,适用于2-DG的质量控制

用于刚性机械手结构拓扑优化的叠加方法

针对考虑动态载荷条件的刚性机器手连杆的拓扑优化问题，提出了一种类似于等效静载荷技术的综合拓扑叠加方法。该方法是将对应于不同角度位置的单个最佳拓扑叠加，以便在所有角度位置都有较好的综合效果；然后，进行归一化和再惩罚，以获得所需的体积分数。此外，利用图像处理技术进行后处理，可以降低应力值和几何复杂度。通过理论仿真，对该方法所得综合拓扑的性能进行了评估，并以3自由度工业机械手刚性连杆为例进行了验证。结果表明，体积分数降低30%的情况下可将关节转矩降低24.9%，同时，具有更好的挠度和应力值。与任何一种单个优化拓扑相比，综合拓扑的挠度和应力值降低了10%~25%

西安蓝田S_4古土壤剖面中针铁矿富集层与土壤古水分研究

利用野外调查与观察、电镜观察和X-射线衍射法,对西安市蓝田县白鹿塬东端安村北约1km的第四纪黄土-古土壤剖面(34&deg;17&#39;N, 109&deg;32&#39;E)中第4层古土壤(S_4)的铁锰结核样品进行了实验分析。整个S_4古土壤风化剖面厚度为5.6m,粘化层的厚度为1.5m,在S_4古土壤层下部5.0?5.6m深度范围发现了具有指示当时土壤水分含量、地下水富集、水分循环等作用的针铁矿(a-FeO(OH))与铁锰结核富集层。针铁矿呈褐黄色薄膜分布于土体表面。含针铁矿的铁锰结核呈黑褐色球形,电镜下主要呈颗粒状、球形和呈菊花形等形态。针铁矿和铁锰结核呈层分布在同一层位,形成于当时的地下水位附近。在铁锰结核样品中,针铁矿含量为0.9%~3.3%,粘土矿物伊利石含量为6.0% ~ 15.5%,高岭石含量为2% -5%,石英含量为61.1%~66.6%, 斜长石含量10% ~ 16.4%, 钾长石含量3.8%-6.0%。针铁矿与铁锰结核的发育和迁移深度指示,在西安蓝田安村附近S_4古土壤发育时期,年降水量至少为900mm,且重力水分布深度达到了5.6m,5.6m深度范围内的含水量大于25%,在针铁矿和铁锰结核发育层位,含水量接近饱和。当时土壤水分含量很充足,土壤水分平衡为正,有较多水分补给地下水,适于茂盛森林植被发育。研究显示,组成铁锰结核的物质成分来自S_4古土壤粘化层中高价铁锰氧化物迁移,并随着地下水位的升降而发生还原和氧化聚集形成。</p

Selection the Calli Lines of High PAP Production from Phylacca america and Research in the Resistence of PAP to TMV

商陆抗病毒蛋白(PAP)是一种广谱的植物抗病毒蛋白.本试验以商陆叶片为外植体,在附加0.5 mg/L 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)和0.5 mg/L 6-BA(6-苄氨基嘌呤)的MS培养基上诱导愈伤组织,通过继代筛选培养获得3个稳定的愈伤组织株系:黄色系(Y-型)、粉色系(P-型)、红色系(R-型),不同株系具有不同的生长特性.Northern杂交结果证明不同株系中PAP基因转录水平有明显差异.离体烟草叶片摩擦接种实验表明,不同株系的蛋白提取液对TMV均具有显著抗性,其中黄色株系具有较明显的优势.商陆离体愈伤组织的研究为生产安全、高效的植物源抗病毒制剂提供了一定基础.PAP is a kind of broadspectrum antivirus protein.A callus induction system was developed for Phytolacca americana on MS medium supplement with 0.5 mg/L 2,4-D and 0.5 mg/L 6-BA.Three stable types specialized in morphology,color,and growth characteristics were obtained after 2-years subculture and selection: type Y was yellow-green and compact,and grew relatively slow.Type P was white pink and watery.Type R was dark red and crisp,and grew fastest.The results Northern blot also revealed the different transcription level of PAP gene in different lines.Disease challenge test of detached tobacco leaves with TMV showed that the resistance was dramatically enhanced when TMV treated by protein of different calli lines,especially type Y.The result implicated that callus culture of Phylacca america in vitro had a potential application in the production of the safe,efficiency plant viral inhibitor

Concealed emotion analysis and recognition method

隐藏情绪识别对公共安全防范与预警具有重要的意义。微表情是揭示隐藏情绪的一条重要通道。但目前隐藏情绪研究较少且微表情因其细微幅度与快速出现等特性难以识别,其研究尚未在实际中广泛应用。因为,隐藏情绪的认知与表达机理亟需系统的研究,采集实际场景中的微表情数据,并以脑电信号辅助微表情的精确标注是提高微表情标注效率的有效途径。深入研究微表情识别方法,并辅以人脸颜色、注视估计和非接触生理信号等多通道数据,以检测与识别隐藏情绪。社会公共安全是隐藏情绪分析和识别的典型场景。面向精神疾病患者两害行为(即危害自身或他人的危险行为)风险评估和服刑人员会见场景隐藏情绪检测,可以有效地对相应系统和方法进行验证和修正。</p