独活寄生汤调控对大鼠椎间盘软骨细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:从Wnt/β-catenin信号通路探讨独活寄生汤水提物对大鼠椎间盘退变软骨细胞功能的影响。方法:（1）用水提加热回流法制备独活寄生汤水提物成分;（2）选取4周龄健康雄性SD大鼠30只,采用机械-酶消化法分离大鼠椎间盘软骨组织,建立软骨细胞体外培养体系并进行鉴定;（3）RT-PCR、We stern blot法分别检测经DKK-1抑制剂干预及（或）经白细胞介素-1β诱导的椎间盘软骨细胞Wnt4、GSK-3β、β-catenin mRNA与蛋白含量的表达。结果:（1）椎间盘软骨细胞经Ⅱ型胶原法染色后,阳性对照组胞浆区域浸染为棕黄色;（2）RT-PCR、Western blot检测结果示,与正常组比较,模型组Wnt4、GSK-3β、β-catenin mRNA与蛋白含量表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,独活寄生汤水提物组(100,200,400μg·mL-1)的Wnt4、GSK-3β、β-catenin mRNA与蛋白含量表达显著降低（P<0.01或P<0.05）,其中以200μg·mL-1组的表达量最低（P<0.01）。结论:独活寄生汤水提物组可通过调控Wnt/β-catenin信号通路,下调大鼠椎间盘退变关节软骨中Wnt4、GSK-3β、β-catenin mRNA与蛋白含量表达,从而延缓椎间盘软骨细胞退变。福建省自然科学基金(2017J01224);;福建中医药大学校管课题(X2015034

抗人DR5单克隆抗体的制备、鉴定及活性分析

目的制备抗人DR5单克隆抗体(mAb),鉴定其特性,并进行生物学活性分析。方法以纯化的可溶性DR5(sDR5)免疫Balb/c小鼠,杂交瘤技术制备抗人DR5mAb;运用ELISA、SDS-PAGE电泳方法测定抗DR5mAb与sDR5结合的特性;Ig亚类ELISA试剂盒鉴定抗DR5mAb亚类;间接ELISA法检测腹水mAb效价;流式细胞仪检测肿瘤细胞表面DR5的表达水平;流式细胞仪检测抗DR5单克隆抗体(mAb)诱导肿瘤细胞凋亡的功能。结果获得1株可分泌抗DR5mAb的杂交瘤细胞系R150。SDS-PAGE电泳检测证实,获得的R150可特异性地识别DR5;R150的Ig亚类为IgGI(λ型);腹水效价为1×106;通过流式细胞仪可敏感地检测到肿瘤细胞表面DR5的表达水平及R150诱导肿瘤细胞凋亡情况。结论获得1株可分泌抗DR5mAb的细胞系R150,抗体具有效价高、特异性强等特点并能有效诱导肿瘤细胞凋亡,具有较好的应用价值

青藏高原与四川盆地夏季降水日变化的对比分析

采用2006-2008年自动气象站和2002-2008年TRMM(Tropical Rainfall Measurement Mis-sion)多卫星降水分析(Munti-satellite Precipitation Analysis,TMPA)的夏季(6～8月)逐时降水量资料,分析了青藏高原(下称高原)及周边地区夏季降水的日变化特征,以及高原中部与四川盆地两个特殊地形区降水日变化上的差异。结果表明,高原中部与其以东的四川盆地在降水日变化上有明显不同,即两者的降水日变化具有不同的峰值时间,表现出从高原中部向外传播的特征,最显著的信号出现在高原东缘。同时涡度和垂直速度等物理量也发生变化,因此降水量日变化是各种物理量共同作用的结果。高原地形对周边地区降水日变化有重要的影响,这种影响类似于热带地区海陆边界的影响,表现为高原中部的对流系统多在傍晚前后增强,随后向东传播,在后半夜到达高原以东的四川盆地,形成四川盆地显著的&quot;夜雨&quot;,并可能影响到四川盆地以东长江流域的降水活动,这种作用类似于热带地区海陆边界附近的对流传播过程。</p