灯盏花素保护Ⅱ型糖尿病大鼠睾丸损伤的机制研究

【目的】探究灯盏花素改善Ⅱ型糖尿病引起大鼠睾丸损伤的作用及其机制。【方法】24只成年雄性Wistar大鼠随机分成3组，对照组，糖尿病组及糖尿病+灯盏花素组，每组8只。糖尿病组及糖尿病+灯盏花素组的大鼠进行腹腔注射链脲霉素及给予高脂肪饮食，以建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型。经苏木精和伊红染色显示睾丸细胞形态；免疫组织化学染色法检测血管内皮生长因子（VEGF）表达水平；分光光度计及酶联免疫吸附实验（ELISA）检测睾丸及附睾的活性氧化物（DCF）和丙二醛水平（MDA）；小动物彩色多普勒超声测量大鼠睾丸及附睾血管的血流速度。【结果】高血糖诱导大鼠睾丸组织形态结构塌陷，DCF和MDA增多，睾丸血管血流减少，VEGF表达降低，灯盏花素的使用可以缓解以上损伤（DCF:12.93 vs.7.63mg/min；MDA：2.37 vs.1.48 mg/min；睾丸血管血流量：110.0 vs.210.2 mm/s；<0.05）。【结论】灯盏花素可通过改善高血糖引起的睾丸氧化应激和睾丸血管微循环障碍，从而改善II型糖尿病引起的睾丸损伤

STUDY ON THE CONSTRUCTION AND IMMUNOLOGY CHARACTERISITCS of SIX-VA-LENT FUSION TOXIN of FOOD POISONING-BORNE BACTERIA

[目的]构建4种食源性致病菌融合毒素基因及重组表达载体,制备六联融合毒素的血清抗体。[方法]采用柔性lInkEr序列(g-g-g-g-S)对目的基因进行串联(HblA-VT1b-SEA-VT2b-bOnTAHC-SEb),构建重组表达质粒PET-22b(+)-f6并在E.COlI bl21中进行表达,将表达蛋白纯化后免疫豚鼠制备血清抗体,利用ElISA和琼脂扩散试验验证抗体的特异性与敏感性。[结果]成功构建了重组表达质粒PET-22b(+)-f6并在E.COlI bl21中成功表达,37℃表达蛋白主要以包涵体形式存在(表达量10.2%),基因序列全长3384bP,编码1127个氨基酸,蛋白分子量为127205,测序结果与设计序列一致性为100%。ElISA和琼脂扩散试验表明,融合毒素f6与4种食源性致病菌有良好的反应原性,与多种非目标菌不反应。[结论]成功构建了多联融合毒素基因的表达质粒及制备了抗血清,为利用融合毒素的方法检测食源性致病菌,进而建立食源性致病菌广谱、快速的检测方法奠定基础。[Objective] To construct toxin including fusion toxin gene from food poisoning bacteria and its recombinant expression vector,and then prepare serum antibody of Six-valent fusion toxin.[Methods] Six gene(HblA—VT1B—SEA— VT2B—BoNTaHc—SEB)fragments were connected by SOE-PCR via linker sequence encoding five amino acids(G-G-G-G-S),the recombination expression plasmid pET-22b(+)-F6 was constructed and expressed in E.coli BL21.The expression proteinum was purified,and the blood serum was prepared by the immune cobaya,The specificity and sensitivity of antibody were verified by the ELISA and agar diffusion reaction.[Results] The fusion gene F6(HblA—VT1B—SEA—VT2B—BoNTaHc—SEB)and re-combinant plasmid pET-22b(+)-F6 was successfully constructed.The most of the 37℃ expression proteinum showed to be cyt-orrhyctes(expreesion amounted to 10.2%).The sequence encoding the mature fusion protein of the F6 toxin gene was 3384bp,encoding 1127 amino acids.The molecular weight of recombinant fusion toxin protein was 127.205 ku.The result of sequencing was consistent with predicted gene sequences.The results of ELISA and agar diffusion reaction demonstrated that fusion gene F6 and other four kinds of food poisoning-born bacteria had favorable reactionogenicity and did not response to many other non-tar-get bacteria.[Conclusion] The expression plasmid of multi-valent fusion toxin was successful constructed and antiserum was prepared,which laid the foundation for establishing broad spectrum and rapid detection method for food poisoning bacteria by utilization of fusion toxin detection methods.国家自然基金资助项目(30671762);厦门市科技计划项目(3502Z20055009

酪氨酸激酶抑制药GW2974诱导乳腺癌细胞BT474耐药的代谢机制研究

目的通过比较酪氨酸激酶抑制药GW2974给药后母本细胞株BT474与耐药株r BT474之间代谢相关因子mRNA表达的差异,探讨r BT474可能的耐药机制。方法收集对数生长期r BT474和BT474细胞,接种于96孔板,加入含有GW2974的培养基,分别于孵育0,12,24和48 h后,通过噻唑蓝法检测BT474与r BT474细胞的增殖情况。用逆转录实时定量-聚合酶链反应检测12种相关代谢因子葡萄糖转运体4(GLUT4)、2,6-二磷酸果糖激酶(PFK-2)、丙酮酸激酶2(PKM2)、乳酸脱氢酶(LDHA)、丙酮酸羧化酶(PC)、6-磷酸果糖激酶(G-6-PD)、脂肪酸合成酶(FASN)、脂酰肉碱转移酶1 (CPT1A)、葡萄糖调节蛋白75(GRP75)、电压依赖性阴离子通道蛋白1 (VDAC1)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和钙网蛋白(CALR)的mRNA在BT474细胞和r BT474细胞中给药前后的表达水平。结果给予GW2974后,母本细胞BT474中糖脂代谢相关因子GLUT4、PFK-2、PKM2、LDHA、PC、G-6-PD、FASN和CPT1A的mRNA表达水平均明显下调,线粒体应激因子GRP75、VDAC1与内质网应激因子CALR表达水平均明显下调,内质网应激因子GRP78表达明显上调。而在耐药株r BT474中给药后这12种代谢相关因子的mRNA表达水平均明显上调。结论耐药株r BT474可能通过调控糖脂代谢以及细胞应激等过程使细胞耐受性增强。福建省自然科学基金面上项目(2012J01417

国内首例宫颈癌自体卵巢组织冻存移植成功妊娠

目的探讨卵巢组织冻存及自体移植手术保护子宫颈癌患者生育力与卵巢内分泌功能的疗效。方法对1例26岁子宫颈癌ⅡA1期患者在癌症手术过程中进行卵巢组织取材、冻存，待其癌症完全缓解后进行冻存卵巢组织自体移植手术，随访监测患者的绝经相关症状、激素水平及卵泡发育情况。结果卵巢组织移植第6个月卵泡刺激素降低至6.60 U/L，雌二醇由＜10.00 ng/L升高至89.00 ng/L。移植第10个月，B超监测到移植卵巢组织有卵泡发育且能完成生理排卵功能。移植第15个月，卵泡刺激素维持在7.24 U/L，雌二醇水平升至368.00 ng/L。移植2年余，患者通过辅助生殖技术成功诞下了一名健康的婴儿。结论冻存卵巢组织移植后卵巢恢复内分泌功能及排卵功能，并成功妊娠，证明卵巢组织在临床上移植成功

毕赤酵母分泌表达嵌合HEV表位的HBcAg颗粒

在毕赤酵母分泌表达嵌合有HEV受体相关表位12A10的HBcAg蛋白,经甲醇诱导后的培养液上清通过切向流浓缩、更换缓冲液后,进行疏水层析纯化.CsCl等密度梯度离心测得分泌的重组颗粒的密度为1.32 g/mL.透射电镜观察显示,纯化的重组颗粒为均一的直径30 nm左右的空心颗粒.小鼠免疫实验表明,纯化颗粒免疫8周后鼠血清中的特异性12A10抗体滴度可达到1.6×105,并且重组颗粒较好地呈递了HEV受体相关的非免疫优势表位.本文的结果为毕赤酵母胞外分泌表达其它大尺度的重组蛋白颗粒提供了参考,为研究携带表位多肽的疫苗载体提供了范例

电力工程技术在智能电网建设中的有效运用

当前随着我国智能电网建设发展脚步的不断加快,对电力工程技术的优化引起了相关部门的高度重视。运用电力工程技术,不仅能够提高电网运行效率,还能节省资源,确保电力安全运输。本文就将围绕电力工程技术在智能电网建设中的运用展开探讨。</jats:p

基于SDT圆度误差模型下滑动轴承油膜特性的研究

建立了轴颈存在圆度误差的滑动轴承转子系统动力学模型，基于小位移旋量（Small displacement theory，SDT）理论导出了新的广义圆度误差方程，并在Swift-Stieber边界条件下对雷诺方程进行数值求解，着重分析了基于SDT表征的圆度误差旋量参数dx对滑动轴承油膜压力、承载能力、临界转速以及稳定性的影响。研究结果表明，圆度误差旋量参数会改变最大油膜压力，而且油膜压力会随着旋量参数的增大而增大；此外，轴颈圆度误差的存在会在一定程度上有利于滑动轴承转子系统的承载能力及稳定性，且随着圆度误差旋量参数的增大，其促进作用更加明显；其中，当偏心率ε&lt;0.8时，轴颈圆度误差对系统承载能力的影响更加明显，当Sommerfeld数S&gt;0.6时，轴颈圆度误差对稳定性的影响较小；同时，系统的临界转速也会随着旋量参数的增大而增大，特别是在偏心率ε&gt;0.6时，增大现象更加明显

全海深自容式小型便拆卸水面示位器装置

本发明涉及海洋工程和水下科考装备领域，具体地说是一种全海深自容式小型便拆卸水面示位器装置，包括设备舱和电池舱，在设备舱内设有控制电路板，在电池舱内设有电池组，电池舱上端设有带正极螺钉的正极隔离板，电池舱的壳体上端设有负极螺钉，且正极螺钉和负极螺钉与设备舱内的控制电路板相连，电池组正极与正极螺钉接触，电池舱下端设有压力开关转接座、压力开关、负极弹簧和负极隔离板，其中压力开关转接座和电池舱壳体连接，电池组负极与负极弹簧接触，负极弹簧与压力开关的一个引脚连接，压力开关上的另一个引脚通过导线与压力开关转接座相连。本发明自身携带电池组，且下潜时自动断电进入休眠状态，上浮时自动通电

一种全海深自容式小型便拆卸水面示位器装置

本实用新型涉及海洋工程和水下科考装备领域，具体地说是一种全海深自容式小型便拆卸水面示位器装置，包括设备舱和电池舱，在设备舱内设有控制电路板，在电池舱内设有电池组，电池舱上端设有带正极螺钉的正极隔离板，电池舱的壳体上端设有负极螺钉，且正极螺钉和负极螺钉与设备舱内的控制电路板相连，电池组正极与正极螺钉接触，电池舱下端设有压力开关转接座、压力开关、负极弹簧和负极隔离板，其中压力开关转接座和电池舱壳体连接，电池组负极与负极弹簧接触，负极弹簧与压力开关的一个引脚连接，压力开关上的另一个引脚通过导线与压力开关转接座相连。本实用新型自身携带电池组，且下潜时自动断电进入休眠状态，上浮时自动通电