Studies on inhibitory of effectors on N-Acetyl-β-D-glucosaminidase from scylla serrata

以青蟹内脏为材料，分离提纯N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase），获得比活力为7,990U/mg的PAGE和SDS-PAGE电泳单一纯的酶制剂。本文以此酶制剂为对象展开以下几方面的研究。 （1）金属离子对酶活力的影响：结果表明，一价金属离子中的Li+、Na+和K+对酶活力没有明显影响，而Ag+对该酶有较强的抑制作用（IC50为2.32mmol/L）。二价金属离子中Mg2+、Ca2+、Ba2+、Co2+和Mn2+对该酶都有激活作用，其中Mg2+、Ca2+和Ba2+的激活作用较强，其强度依次为Ca2+>Ba2+>Mg2+，而Mn2+对酶仅有轻微的激活作用，Co2+对酶的效应...N-Acetyl-β-D-glucosaminidase (NAGase, EC 3.2.1.52) was purified from viscera of green crab (Scylla serrata) and determined to be homogeneous by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) and SDS-PAGE with specific activity to be 7,990 U/mg. This purfied enzyme will be used in the following studies. (1) The effects of several metal ions on the enzyme activity had been studied. The results show tha...学位：理学硕士院系专业：生命科学学院生物化学与生物技术系_生物化学与分子生物学学号：X20032601

构建和谐社会与宗教的理论审视

今年以来,本刊就“构建社会主义和谐社会与宗教”这一课题,给予了持续的关注和讨论,宗教界和宗教工作者都围绕这一主题进行了专题讨论。本期,我们主要请有关学者就这一课题发表自己的研究与见解。从各位学者的发言中,我们深切感受到了当代宗教学者的理论热情与社会关切。正如学者们所提出的:在构建社会主义和谐社会的进程中,宗教工作者、宗教界人士和学者三方,应当明确各自的职责,各扬其长,相互合作,谐调互动。诚如是,则社会和谐可期,民族复兴可待

金属离子对锯缘青蟹NAGase活力的影响

本文研究了几种金属离子对锯缘青蟹(Scylla serrata)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响.其结果表明:Li+、Na+和K+对酶活力没有明显影响,Mg2+、Ca2+和Ba2+对该酶均有激活作用,激活程度依次为Ca2+>Ba2+>Mg2+.A l3+、Fe3+、Cd2+、Pb2+和Hg2+对该酶具有一定的抑制作用,2.0μmol/dm3的Hg2+可以使酶活力完全丧失.Co2+对酶的效应是先激活后抑制,Mn2+对酶仅有轻微的激活作用.Cd2+和Fe3+对锯缘青蟹NAGase的抑制作用都呈竞争性-反竞争性混合Ⅱ型效应,Cd2+的抑制常数KI和KIS分别为23.9、5.0 mmol/dm3,Fe3+的抑制常数KI和KIS分别为395.5、135.6μmol/dm3.KI>KIS,说明酶-底物络合物(ES)与抑制剂的亲和力比游离酶(E)与抑制剂的亲和力大

产物及其类似物对锯缘青蟹NAGase酶活力的影响

以产物N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖(NAG)及其类似物-葡萄糖(glu)、半乳糖(gal)、果糖(fru)和蔗糖(suc)为效应物,研究它们对锯缘青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响及抑制作用机理.结果表明,上述效应物对酶均表现为可逆的抑制作用.NAG有较强的抑制作用,其IC50为0.011 mol/dm3.但产物类似物对该酶的抑制作用均弱于NAG.NAG对该酶的抑制作用机理表现为反竞争性抑制,抑制常数KIS为4.37×10-3mol/dm3;glu、gal、suc则表现为非竞争性抑制,抑制常数KI分别为0.125、0.394、0.474 mol/dm3;而fru则表现为竞争性抑制,抑制常数KI为0.455mol/dm3

丙酮对锯缘青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力与构象的影响

以丙酮为效应物,研究其对锯缘青蟹(Scylla serrata)N-乙酰--βD-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响,结果表明:该酶的剩余活力随着丙酮浓度增大而呈指数下降,当丙酮浓度达25%,酶的剩余活力仅为20%,说明丙酮对青蟹NA-Gase有明显的失活作用.导致酶活力丧失50%的丙酮浓度为7.5%.在较低丙酮浓度(<10%)的失活是可逆的反应过程.动力学研究表明,该酶的失活过程属于混合型,并进一步测定游离酶(E)和酶底物络合物(ES)与丙酮的结合常数(KI和KIS),分别为4.06%和10.49%,KI<KIS,说明底物存在对酶被丙酮的失活作用有一定的保护作用.应用荧光发射光谱研究青蟹NAGase经丙酮微扰后的分子构象变化情况,结果表明:丙酮对酶分子构象有显著的影响,酶的内源荧光强度随丙酮浓度增大而降低,说明酶分子中的生色基团Trp和Tyr残基的微环境发生了变化

锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶在甲醛溶液中的失活动力学研究

研究甲醛对锯缘青蟹N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAGase EC 3.2.1.52)活力的影响,结果表明:随着甲醛浓度的增大,酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的甲醛浓度(失活半衰期,IC50)为0.60 mol/L.酶在低浓度甲醛溶液中的失活过程显示为可逆失活.用底物反应动力学方法考察酶在甲醛溶液中的失活动力学,测定游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)在甲醛溶液中失活的微观速度常数,并比较游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)的正向反应的微观失活速度常数k+0>k′+0,表明底物对酶被甲醛的失活作用有一定的保护作用.正向的失活速度常数k+0和k′+0随着甲醛浓度的增大而增大,而逆向的速度常数k-0随着甲醛浓度的增大而减小,表明随着甲醛浓度的增大,酶变性越来越快,而活力恢复越来越难

Preparation of self-assembled cholesterol modified pullulan nanopaticles

的:经琥珀酸间隔臂将胆甾醇连接到普鲁兰分子链上,对普鲁兰多糖进行疏水改性,获得不同取代度的胆甾醇基-普鲁兰(cholesterol-modified pullulan,CHSP)改性材料,并研究CHSP材料在水中的自组装性质。方法:利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC)和4-二甲氨基吡啶(DMAP)催化琥珀酰胆甾醇(cholesterol succinate,CHS)与普鲁兰多糖反应,将琥珀酰胆甾醇接枝在普鲁兰分子链的羟基上,得到疏水改性的普鲁兰多糖衍生物。应用傅立叶红外光谱仪(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR),核磁共振仪(proton nuclear magnetic resonance,1H-NMR)对产物进行表征。利用透析法制备自组装纳米球。通过透射电镜(transmission electron microscopy,TEM),动态激光粒度分析仪(dynamic laser lightscattering,DLS)表征了纳米粒的形态和粒径。以芘为荧光探针,通过荧光检测分析,测定CHSP的临界胶束浓度(critical... 【英文摘要】 Objective:To synthesize cholesterol-modified pullulan(CHSP) conjugates and to preparate self-assembled nanoparticles.Methods:The cholesterol-modified pullulan(CHSP) was prepared by the reaction of pullulan and cholesterol succinate(CHS) in DMSO,using EDC and DMAP as catalysts.The polymer structure was confirmed by the Fourier transform infrared spectroscopy(FT-IR) and proton nuclear magnetic resonance(1H-NMR).The self-assembled nanoparticles were analyzed by transmission electron microscopy(TEM),dynamic las...国家重大科学研究计划项目(2006CB933300);; 博士点基金(20060023050

选择性胆甾化壳聚糖两亲材料的合成及其自聚集现象

以邻苯二甲酰化壳聚糖(PHCS)为中间体,将胆甾醇琥珀酸酯(CHS)选择性接枝到壳聚糖的6-OH上,再经水合肼脱去N-邻苯二甲酰亚胺基,游离出氨基,获得疏水改性的O-胆甾醇基壳聚糖(O-CHCS)。采用傅立叶红外光谱仪(FT-IR)和核磁共振仪(1HNMR)对产物进行结构表征;通过透析法制备O-CHCS自聚集纳米粒,用透射电镜(TEM)和动态激光粒度分析仪(DLLS)表征了纳米粒的形态、粒径、粒径分布及表面电位;以芘为荧光探针测定O-CHCS的临界胶束浓度(CMC)。结果表明,合成的O-CHCS是一种两亲性化合物,能在水中自聚集形成粒径约337nm,ζ电位为+25.6mV的球形纳米粒,获得的纳米粒具有明显的核壳结构和较低的临界胶束浓度,有望成为疏水性药物或DNA的载体