荧光PCR和PFGE在副溶血弧菌食物中毒诊断中的应用研究

[目的]探讨荧光PCR和脉冲场电泳(PFGE)在副溶血弧菌食物中毒调查中的应用。[方法]对中毒样品进行荧光PCR检测,副溶血弧菌临床分离株基因组DNA经NotI酶切,通过PFGE获得电泳图谱,利用BioNumerics软件对图谱进行聚类分析。[结果]部分样品荧光PCR检测结果呈阳性,同起食物中毒菌株PFGE图谱一致。[结论]荧光PCR可以快速准确的鉴定病原体。PFGE具有很强的菌株同源性分析能力,适用于食物中毒病原菌学鉴定和传染源溯源。荧光PCR和PFGE在食物中毒的快速诊断中可发挥重要作用

实时荧光PCR同时检测金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7

目的建立改良分子信标-双重实时荧光PCR同时检测金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7,应用于细菌性食物中毒的快速诊断。方法根据GeneBank公布的金黄色葡萄球菌nuc基因序列和大肠杆菌O157:H7rfbE基因序列,设计引物和改良分子信标探针,建立改良分子信标-双重实时PCR检测体系。结果双重荧光PCR反应体系检测151株金黄色葡萄球菌和27株大肠杆菌O157:H7,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰。对8762份大便、食品等标本进行检测,315份标本金黄色葡萄球菌实时荧光PCR阳性,其中286份金黄色葡萄球菌培养阳性;31份标本大肠杆菌O157:H7实时荧光PCR阳性,其中26份大肠杆菌O157:H7培养阳性。从样品处理到检测结果仅需要时间2h~1d。结论改良分子信标-多重实时荧光PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7食物中毒的快速诊断和肠道传染病的初筛,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段

产单核李斯特菌的改良分子信标荧光PCR-磁捕获快速检测体系的建立

[目的]建立改良分子信标荧光PCR-磁捕获快速检测产单核李斯特菌(LMO)的体系,应用于食品中LMO的污染状况调查及食物中毒快速诊断。[方法]根据GenBank公布的LMOhlyA基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立改良分子信标荧光PCR检测体系。运用磁捕获材料对PCR检测阳性的增菌液进一步处理后划平皿做分离培养。[结果]改良分子信标-实时PCR反应体系DNA灵敏度为110fg,菌液灵敏度为99cfu/ml或4cfu/PCR反应体系,无交叉反应。以此反应体系检测28株LMO,均出现特异的荧光信号。对228份食品进行LMO检测,8份增菌液LMO实时荧光PCR阳性。用磁捕获材料处理此8份增菌液,全部细菌培养阳性,高于国标法的6份阳性。[结论]改良分子信标-实时PCR反应体系快速、灵敏度高,特异性强,运用磁捕获试剂能有效提高培养阳性率。应用该检测系统能提高LMO的检出率和准确性。该系统可应用于LMO食品污染状况调查及食物中毒的快速诊断

食品污染产单核李斯特菌不同检测方法学评估

目的评价以不同方法检测食品中污染产单核李斯特菌(LMO)效果,并对其检测方法进行优化。方法同时用国标法、改良国标法、改良分子信标-实时荧光PCR法、免疫磁性分离法对深圳市2004～2006年食品样品进行LMO分离鉴定并进行比较。结果228份样品中8份增菌液LMO实时荧光PCR阳性,其中6份LMO细菌培养阳性。国标法、改良国标法,改良分子信标-实时荧光PCR法、免疫磁性分离法都能检出LMO,检出率分别为2.63%、2.63%、3.50%、2.63%。深圳市食品中LMO的污染率为2.63%(国标法),速食类冻品污染率为12.8%(国标法)。结论荧光PCR法检出率最高,将检测时间由原来的至少4～5d缩短至1d,可用于食品污染LMO状况调查的初筛和食物中毒的快速诊断;国标法与改良国标法的检出率相等,而后者的操作更方便。免疫磁性分离法的检出率最低

改良分子信标-实时PCR快速检测产单核李斯特菌

目的:建立改良分子信标-实时PCR检测产单核李斯特菌(LMO)的快速方法,应用于食品中LMO的污染状况调查及食物中毒快速诊断。方法:根据GenBank公布的LMO hlyA基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立改良分子信标-实时PCR检测体系,应用于食品中LMO检测。结果:改良分子信标-实时PCR反应体系DNA灵敏度为110 fg,菌液灵敏度为99 cfu/m l或4 cfu/PCR反应体系,无交叉反应。以此反应体系检测28株LMO,均出现特异的荧光信号。上述方法可将检测时间由原来的至少4 d缩短至1 d。对228份食品进行LMO检测,8份增菌液LMO实时荧光PCR阳性,其中6份LMO细菌培养阳性。结论:改良分子信标-实时PCR反应体系快速、灵敏度高,特异性强,能提高LMO的检出率和准确性,可应用于LMO食品污染状况调查及食物中毒的快速诊断

改良分子信标-实时PCR快速检测志贺菌

目的:建立改良分子信标-实时PCR检测志贺菌的快速方法,应用于志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。方法:根据GenBank公布志贺菌ipaH基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立实时PCR-改良分子信标检测体系,应用于对志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。结果:改良分子信标-实时PCR反应体系DNA灵敏度为93 fgμ/l,菌液灵敏度为64 cfu/m l或2 cfu/PCR反应体系,无交叉反应。此反应体系检测67株志贺菌,均出现特异的荧光信号。对细菌性食物中毒样本等共657份样品进行志贺菌检测,42份志贺菌实时PCR阳性,其中41份志贺菌细菌培养阳性。从样品处理到检测结果仅需2 h~1 d时间。结论:改良分子信标-实时PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于志贺菌食物中毒的快速诊断,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段,对于提高肠道门诊的工作效率有重要意义

中年女性の太極拳におけるトレーニング効果

中年女性10名を対象に24式太極拳教室を週2回6ヶ月間実施した際の運動強度および心拍数,酸素摂取量,血圧,運動能力などの変化について検討した。その結果1平均体重は55.6kgから53.9kgと5%水準で有意に低下した。2運動能力は運動開始前後で握力,全身反応時間,立位体前屈,上体おこしにおいて1～5%水準で有意に向上した。3運動中の運動強度は50～60%VO〓maxの範囲で平均53.2%VO〓maxを示した。4血圧はトレーニング開始前後において5%水準で有意に低下した。以上のことから太極拳は中等度の運動強度の運動であり,中年女性にとって,健康づくりに用いることのできる安全で効果のある運動であることが示唆された。This study was to examine the effects of 24 sets Taichi training for 60 min/day, 2days/wt of middle age women for six months. The results were follows, 1. Intensity of exercise was 50-60% VO2max. 2. Body weight decreased significantly from 55.6 ±10.5kg to 53.9±28.9kg. 3. Systolic and diatonic blood pressure decreased significantly from 122.7±18.9mmHg to 11.6±17.3mmHg and from 84.7±14.7mmHg to 77.6±11.0mmHg each. 4. Significant improvements grip strength, whole reaction time, standing trunk flexion, sit ups, VO2max were observed. These findings suggested that 24 sets Taichi training was the fit exercise for physical fitness of middle age women, decrease in the blood pressure and in the body weight and was improved in muscular endurance, agility, flexibility and aerobic fitness

A Revised and Annotated Checklist of Insects and Mites of Mangos from Taiwan

根據往昔文獻與過去4 年野外調查，建立最新的台灣產檬果害蟲 (蟎) 名錄，內 容包括80 種昆蟲與6 種蟎類的同物異名、生態與經濟重要性之簡要資料，其中二點 小綠葉蟬 (Amrasca biguttula (Ishida))、內點刺蛾 (Thosea sinensis (Walker)) 與 小造橋夜蛾 (Anomis flava (Fabricius)) 為新興害蟲； 檬果壯鋏普癭蚋 (Procontarinia robusta Li, Bu & Zhang) 則為台灣首次發生，本文亦將其與檬果癭 蚋 (Procontarinia mangicola (Shi)) 之形態、生物與生態進行詳細比較。除此，本 名錄經過資料考證或試驗，排除11 種曾被記錄為台灣檬果害蟲的昆蟲，包括窗冠耳 葉蟬 (Ledra auditura Walker)、褐翅葉蟬 (Tartessus ferrugineus Walker)、青翅 軍配飛蝨 (Tambinia debilis Stål)、穀粒長介殼蟲 (Duplachionaspis graminis (Green))、黑長蠣盾介殼蟲 (Ischnaspis longirostris (Signoret))、中華褐金龜 (Adoretus sinicus Burmeister)、小青銅金龜 (Anomala albopilosa trachypyga (Bates))、長金龜 (Anomala anthusa Ohaus)、綠豔條金龜 (Anomala cypriogastra Ohaus)、櫻花豔條金龜 (Anomala siniopyga Ohaus) 與粉吹金龜 (Dasylepida nana (Sharp))。 An up-to-date annotated checklist of mango pests of Taiwan has been established based on historical literatures and field surveys in the past four years. The checklist of all 80 insects and six mites provided for each species a selective synonymy and a summary of some basic ecological details and economic importance. Among them, three species were recorded as emerging pests, namely Amrasca biguttula (Ishida), Thosea sinensis (Walker), and Anomis flava (Fabricius) whereas mango gall midge, Procontarinia robusta Li, Bu & Zhang, occurred in Taiwan for the first time. The comparisons on morphology, biology, and ecology between Procontarinia mangicola (Shi) and P. robusta Li, Bu & Zhang were briefly discussed. Furthermore, the following eleven species previous listed in historical literatures were excluded as dubious species: Ledra auditura Walker, Tartessus ferrugineus Walker, Tambinia debilis Stål, Duplachionaspis graminis (Green), Ischnaspis longirostris (Signoret), Adoretus sinicus Burmeister, Anomala albopilosa trachypyga (Bates), Anomala anthusa Ohaus, Anomala cypriogastra Ohaus, Anomala siniopyga Ohaus, and Dasylepida nana (Sharp)

多重实时PCR快速同时检测沙门菌和志贺菌

目的建立改良分子信标-多重实时PCR同时检测沙门菌和志贺菌的快速方法,应用于食源性致病菌的快速诊断。方法根据GenBank公布的沙门菌侵袭性基因invA和ssaR基因,分别设计一对引物和改良分子信标探针,用同色荧光标记,用于同体系检测沙门菌。志贺菌根据ipaH基因的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,加入沙门菌检测体系中,建立三重实时PCR-改良分子信标检测体系,应用于同时对沙门菌、志贺菌食物中毒的快速诊断和门诊肠道致病菌的检测。结果改良分子信标-多重实时PCR反应体系DNA灵敏度为69-93 fg／μl,菌液灵敏度为32-64 CFU／ml或1-2 CFU／PCR反应体系,无交叉反应。该反应体系同时检测134株沙门菌和67株志贺菌,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰。对细菌性食物中毒样本等共1100份同时进行沙门菌和志贺菌检测,569份沙门菌实时PCR阳性,其中551份沙门菌培养阳性;42份志贺菌实时PCR阳性,其中41份志贺菌培养阳性。从样品处理到检测结果仅需时间2 h至1 d。结论改良分子信标-多重实时PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于沙门菌和志贺菌食物中毒的快速诊断,伤寒、痢疾等肠道传染病的初筛及预防医学门诊的健康人群体检,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段