2种咖啡酸吗啉胺的合成及其对酪氨酸酶的激活和对黑色素合成的调控

合成了2种新型咖啡酸衍生物咖啡酸-2-氨乙基吗啉胺（C-1）和咖啡酸-N-氨丙基吗啉胺（C-2）,并通过质谱、核磁共振以及红外光谱技术鉴定其结构.2种化合物对蘑菇酪氨酸酶具有良好的激活效果,其对于酪氨酸酶活性的半激活质量浓度(EC50)分别为0.06和0.12 mmol/L,且2种化合物的激活类型均为混合型激活.通过紫外-可见光谱法验证了C-1和C-2对酪氨酸酶的激活作用.通过荧光猝灭和分子模拟进一步分析了2种化合物与酪氨酸酶之间的相互作用,结果表明两者对酪氨酸酶的影响可能是基于化合物的碳链长度.2种化合物对人体正常肝细胞LO2无毒性,并能够增强人体黑色素瘤细胞M14中的酪氨酸酶活力.进而对M14细胞中黑色素合成相关蛋白的研究发现,2种化合物对酪氨酸酶蛋白（TYR）、酪氨酸酶家族相关蛋白（TRP-1和TRP-2）以及α-促黑色素激素（α-MSH）的表达量均起上调作用.综上所述,该化合物有望提供一种有效治疗酪氨酸酶失调的新方法.国家自然科学基金(31571896

菜青虫不同虫态及虫龄的多酚氧化酶性质比较

初步比较了菜青虫Pierisrapae (L .)不同虫态及虫龄的多酚氧化酶 (polyphenoloxidase)的性质。结果表明 ,不同虫态及虫龄的多酚氧化酶活力有很大的不同 ,其中以 5龄幼虫酶活力最高 ,蛹酶活力最低。酶活力大小依次为 :5龄幼虫 >预蛹 >4龄幼虫 >3龄幼虫 >蛹。以邻苯二酚为底物 ,研究了pH对多酚氧化酶活力的影响 ,结果表明酶催化底物氧化均有一个最适pH区域 ,不同虫态及虫龄的多酚氧化酶最适pH基本相同 ,其值为 7 0± 0 2。不同虫态及虫龄的多酚氧化酶催化底物氧化的最适温度有很大的差异。 3龄、4龄、5龄幼虫、预蛹和蛹的多酚氧化酶活力的最适温度分别为 36 0± 0 5℃、38 5± 1 0℃、4 3 0± 1 0℃、4 5 5± 1 0℃和 5 0 0± 1 5℃ ,说明蛹期的多酚氧化酶活力的最适温度较高。进一步比较催化底物氧化反应的活化能 ,测得 3龄、4龄、5龄幼虫、预蛹和蛹的多酚氧化酶活化能分别为 :4 3 10± 0 2 8、36 5 0± 0 2 7、2 5 79± 0 32、30 10± 0 2 1和 5 8 88± 0 39kJ mol。通过测定不同虫态及虫龄的多酚氧化酶催化邻苯二酚和L_多巴氧化反应的动力学特征参数 ,比较了不同虫期的酶对底物的亲和力

苯甲酸及其衍生物对菜青虫多酚氧化酶抑制作用

以菜青虫五龄虫为材料,分离提取多酚氧化酶,研究苯甲酸及其衍生物:p 羟基苯甲酸、p 氰基苯甲酸、p 环已基苯甲酸等对该酶催化L 多巴(L DOPA)氧化活力的影响.测定抑制作用的IC50分别为14.2、11.3、16.1和2.1mmol/L.研究了抑制剂作用的动力学,结果表明:苯甲酸和p 环已基苯甲酸对酶的抑制作用表现为非竞争性类型,其抑制常数分别为14.25和2.21mmol/L;p 羟基苯甲酸对酶的作用表现为竞争型抑制,抑制常数KI为7.21mmol/L;p 氰基苯甲酸对酶的作用表现为混合型抑制,抑制常数KI和KIS分别为14.31和27.34mmol/L

生物化学实验课教学改革及本科生基本科研素质培养

生物化学实验课是生物学及相关专业的一门学科类通修课程,其教学目的是让学生学习和掌握生物化学实验基本操作技能的同时,注重学生基本科研素质培养。我们根据这个理念将生物化学实验课内容设计成三个模块:基本生物化学实验技术训练模块,综合实验训练模块,以及自主设计实验模块,并在课程开展中注重学生基本科研素质的培养,达到了实验教学培养学生科研实践能力和综合素质的目的

有机溶剂对菜青虫多酚氧化酶活力的影响

以菜青虫五龄虫为材料,分离提取多酚氧化酶,研究有机溶剂乙醇、正丙醇、乙二醇、丙二醇、丙三醇等对该酶催化L 多巴(L DOPA)氧化活力的影响.测定抑制作用的IC50分别为12.4、6.4、24.2、15.5和17.0%.抑制剂作用的动力学研究结果表明:乙醇、乙二醇和丙三醇对酶的抑制作用表现为非竞争性类型,其抑制常数KI分别为12.05、23.50和17.53mmol/L;正丙醇和丙二醇对酶的作用表现为混合型抑制,抑制常数KI分别为4.18和12.79mmol/L,KIS分别为19.45和22.41mmol/L

铜铁试剂对菜青虫多酚氧化酶的抑制作用

以菜青虫 Pieris rapae (L.) 为试材, 冰浴匀浆, 4℃下 6 403 ×g 离心, 取上清液, 经 35%饱和度 (NH4)2SO4 沉淀,Sephadex G-100凝胶过滤柱层析等分离步骤, 获得部分纯化的菜青虫多酚氧化酶制剂。研究不同浓度铜离子及铜铁试剂对该酶的影响, 结果表明: Cu2+在0~0.100 mmol/L范围内对酶活力表现激活作用; 浓度大于0.125 mmol/L时表现抑制作用, 其IC50为0.651±0.022 mmol/L; 铜铁试剂对该酶抑制作用的IC50为0.100±0.012 mmol/L。抑制动力学研究结果表明: 铜铁试剂对该酶表现为可逆抑制效应, 为竞争性抑制类型, 其抑制常数Ki 为0.076±0.013 mmol/L

金属离子对菜青虫酚氧化酶活力的影响

以菜青虫五龄幼虫为材料,冰浴匀浆,在4℃下8000r/min离心,取上清液,经35%饱和(NH4)2SO4沉淀,经SephadexG100凝胶柱层析等步骤分离,获得部分纯化的菜青虫酚氧化酶制剂.研究多种金属离子对该酶活性的影响,结果表明:碱金属离子K+、Li+和Na+对酶活力没有影响.碱土金属离子Mg2+、Ba2+和Ca2+对酶有激活作用,激活作用的大小顺序为Mg2+>Ca2+>Ba2+.过渡金属离子Mn2+、Co2+、Cu2+和Zn2+对酶活力的影响呈现不同的效应,Mn2+、Co2+和Zn2+对该酶活性有不同程度的激活作用,Cu2+浓度在0.10mmol/L内对该酶有一定的激活作用,浓度大于0.13mmol/L为抑制作用,其IC50为0.65mmol/L.重金属离子Hg2+、Cd2+和Pb2+对酶活力有不同程度的激活作用,以Hg2+的激活作用最为显著

鲨鱼皮胶原蛋白肽的成分分析及对血管紧张素转化酶活力的影响

以鲨鱼皮为原料,采用现代生物化学技术制备胶原蛋白肽水解液,经过喷雾干燥,获得鲨鱼皮胶原蛋白肽干粉.对获得的胶原蛋白肽样品进行成分分析,测定了粗蛋白、粗脂肪、水分、灰分以及K、Na、Ca、Fe、Cu、Zn、Pb等金属元素的含量,应用氨基酸自动分析仪测定样品的氨基酸组成,并用化学分析法测定羟脯氨酸含量为7.08%,应用MALDI-TOF分析胶原蛋白肽分子量的分布,表明我们得到的鲨鱼皮胶原蛋白的水解产物——胶原蛋白肽的分子量主要分布在2～3ku,为水溶性多肽混合物.研究鲨鱼皮胶原蛋白肽对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制效应,表明该样品对ACE有较强的抑制作用,其IC50为4.8 mg/mL.本文还探讨了鲨鱼皮胶原蛋白的吸湿性和保湿性

几种苯甲酸族化合物对菜青虫多酚氧化酶的抑制作用

以菜青虫五龄幼虫为材料,分离提取多酚氧化酶,研究对醛基苯甲酸(a)、对甲氧基苯甲酸(b)、对异丙基苯甲酸(c)、对环已基苯甲酸(d)、对氟苯甲酸(e)、对氯苯甲酸(f)和对溴苯甲酸(g)等苯甲酸族化合物,对该酶催化L-多巴(L-DOPA)氧化活力的影响.测定(a),(b),(c),(d)和(f)抑制作用的IC50分别为10.63、12.22、1.75、2.10和6.64 mmol/L,而(e)和(g)则没有明显的抑制效果.研究上述效应物的抑制作用动力学,结果表明:(a)、(c)和(f)对酶的作用表现为竞争性抑制,其抑制常数分别为6.74、1.08和3.94 mmol/L;(b)和(d)对酶的抑制作用表现为非竞争性类型,其抑制常数分别为13.11和2.21 mmol/L

Monthly changes in the caloric values of the leaves of four shrubby and four tree-dwelling palmae species

对 4种灌木状棕榈植物 (香棕、袖珍椰子、棕竹、江边刺葵 )与 4种乔木状棕榈植物 (假槟榔、董棕、国王椰子、大王椰子 )叶的热值和灰分含量的月变化进行了研究。结果表明 :( 1 ) 8种植物叶的灰分含量存在差异且具有不同的月变化 ;从灰分含量的比较看 ,乔木类的 4种植物叶平均灰分含量分别为 :假槟榔 1 3.64%± 2 .94%、董棕 9.74%± 1 .90 %、国王椰子 9.1 2 %± 1 .1 8%、大王椰子 8.69%± 3.5 5 % ;灌木类的 4种植物叶平均灰分含量分别为 :棕竹 8.73%± 2 .5 2 %、袖珍椰子 8.67%± 1 .1 9%、香棕 8.63%± 1 .2 0 %、江边刺葵 7.60 %± 0 .98% ,乔木类植物 (除大王椰子外 )叶平均灰分含量高于灌木类的植物 ;( 2 )从干重热值的月变化来看 ,分 3种类型 :江边刺葵与棕竹有相反的变化趋势 ;假槟榔、董棕、袖珍椰子的月变化趋势相同 ;国王椰子、香棕、大王椰子具有各自的变化趋势 ;在 8种棕榈植物中 ,除香棕外 ,灌木类的植物平均干重热值大于乔木类 ;灌木类中 ,茎单生的江边刺葵干重热值高于茎丛生的棕竹、香棕和袖珍椰子 ;( 3)假槟榔、袖珍椰子、大王椰子的干重热值与灰分含量具有极显著的线性相关 ( P<0 .0 1 ) ,棕竹的干重热值与灰分含量有显著的线性相关 ( P<0 .0 5 ) ;而香棕、董棕、江边刺葵、国王椰Monthly changes in the ash contents and caloric values of the leaves of 8 Palmae species(four shrubby species: Arenga engleri, Chamaedorea elegans, Rhapis excelsa and Phoenix roebelenii; four tree dwelling species: Archontophoenix alexandrae, Caryota urens, Ravenea rivularis and Roystonea regia) were discussed in this paper, and the results showed as follows: (1) The ash contents of the 8 Palmae species were different and varied with season; the annual average ash contents of the four tree dwelling species were 13 64%±2 94% for Archontophoenix alexandrae, 9 74%±1 90% for Caryota urens, 9 12%±1 18% for Ravenea rivularis, and 8 69%±3 55% for Roystonea regia; those of the four shrubby species were 8 73%±2 52% for Rhapis excelsa, 8 67%±1 19% for Chamaedorea elegans, 8 63%±1 20% for Arenga engleri, and 7 60%±0 98% for Phoenix roebelenii, respectively; the average ash contents of the four tree dwelling species (except for Roystonea regia ) were higher than those of the four shrubby species; (2) The 8 species had three types of monthly gross caloric value change trends: Archontophoenix alexandrae, Caryota urens and Chamaedorea elegans had similar monthly change trend, while Phoenix roebelenii and Rhapis excelsa had the opposite trends of monthly changes; the other three species ( Ravenea rivularis, Arenga engleri and Roystonea regia ) each had its own changing trend. The shrubby species had higher gross caloric value than the tree dwelling species except for Arenga engleri, of the shrubby species, Phoenix roebelenii (monaxial stem) had the highest gross caloric value (than Arenga engleri, Chamaedorea elegans and Rhapis excelsa (clumpy stem)); Seasonal changes in gross caloric values varied with various species; (3) Gross caloric values were correlated remarkably with ash contents for Archontophoenix alexandrae, Chamaedorea elegans and Roystonea regia (P <0 01), they were correlated for Rhapis excelsa (P <0 05), too, whereas there was no significant correlation between gross caloric values and ash contents for other species; (4) the average ash free caloric values of the shrubby species were 22 65±0 59 kJ/g for Phoenix roebelenii, 22 19±0 48 kJ/g for Chamaedorea elegans, 21 94±0 76 kJ/g for Rhapis excelsa and 21 35±0 75kJ/g for Arenga engleri, respectively; those of the tree dwelling species were 21 76±0 55kJ/g for Ravenea rivularis, 21 20±0 72kJ/g for Caryota urens, 21 12±0 52kJ/g for Archontophoenix alexandrae and 20 98±0 55 kJ/g for Roystonea regia respectively; the shrubby species had higher ash free caloric value than the tree dwelling species except for Arenga engleri. The seasonal changes in ash free caloric values were different from those in gross caloric values due to various ash contents in the leaves of the 8 Palmae species.国家建设部资助项目;; 厦门市园林局资助项目~