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传染性非典型肺炎病毒核蛋白的表达与活性检测
用PCR方法,人工合成传染性非典型肺炎病毒(SARS-CoV)核蛋白(N)全编码基因,并构建原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达。结果重组N蛋白表达产量占菌体总蛋白的40%以上,主要以可溶形式存在。用SARS患者急性期血清进行蛋白印迹检测,表明可溶形式和包含体形式均有明显活性。包含体形式的重组蛋白经纯化后纯度可达90%以上,活性与纯化前相当,可作为SARS抗体诊断试剂盒的抗原原料
Virus-Free and Live-Cell Visualizing SARS-CoV-2 Cell Entry for Studies of Neutralizing Antibodies and Compound Inhibitors
新型冠状病毒SARS-CoV-2在全球蔓延,给全球公共卫生带来严重威胁。快速研制疫苗、抗体和治疗药物成为科学界面临的重大挑战。由于SARS-CoV-2的高度传染性,采用病毒感染模型进行中和抗体及小分子抑制剂的药效评估需要在高等级生物安全实验室中进行,且常需要数天时间才能完成检测,限制了抗体和药物筛选的效率。发展快速、可视、不依赖于活病毒的新冠病毒入胞检测探针和细胞模型,对于加速新冠病毒抗体和药物的研究有重要意义。夏宁邵教授团队通过CHO真核表达系统高效表达制备出C端融合抗酸荧光蛋白Gamillus的重组新冠病毒spike蛋白STG。STG经SEC分子筛和冷冻电镜确认呈现与天然病毒刺突高度相似的三聚体结构,且与ACE2有很高的亲和力(18.2nM)。STG具备良好的细胞相容性和荧光性质,研究者进一步开发了可定量测定感染恢复期血清、疫苗免疫血清中和抗体(入胞阻断抗体)水平的CSBT检测方法。除了抗体检测评估方面的应用外,该研究发展的探针和模型还可用于筛选分析抑制新冠病毒入胞及胞内转运的小分子化合物。
我校博士后张雅丽,博士生王邵娟、巫洋涛,博士后侯汪衡、袁伦志和深圳市第三人民医院沈晨光博士为共同第一作者。厦门大学夏宁邵教授、袁权教授、程通教授为该论文共同通讯作者。The ongoing corona virus disease 2019 (COVID-19) pandemic, caused by SARS-CoV-2 infection, has resulted in hundreds of thousands of deaths. Cellular entry of SARS-CoV-2, which is mediated by the viral spike protein and
ACE2 receptor, is an essential target for the development of vaccines, therapeutic antibodies, and drugs. Using a mammalian cell expression system,a genetically engineered sensor of fluorescent protein (Gamillus)-fused
SARS-CoV-2 spike trimer (STG) to probe the viral entry process is developed.In ACE2-expressing cells, it is found that the STG probe has excellent performance in the live-cell visualization of receptor binding, cellular uptake, and intracellular trafficking of SARS-CoV-2 under virus-free conditions. The new system allows quantitative analyses of the inhibition potentials and detailed influence of COVID-19-convalescent human plasmas, neutralizing antibodies and compounds, providing a versatile tool for high-throughput screening and phenotypic characterization of SARS-CoV-2 entry inhibitors. This approach may also be adapted to develop a viral entry visualization system for other viruses.This study was supported by National Natural Science Foundation of China (81993149041 for N.X.; 81902057 for Y.Z.; 81871316 and U1905205 for Q.Y.), the National Science and Technology Major Project of Infectious Diseases (No. 2017ZX10304402‐002‐003 for T.C. and No. 2017ZX10202203‐009 for Q.Y.), the National Science and Technology Major Projects for Major New Drugs Innovation and Development (No. 2018ZX09711003‐005‐003 for T.C.), the Science and Technology Major Project of Fujian (2020YZ014001), the Science and Technology Major Project of Xiamen (3502Z2020YJ01), and the Guangdong Basic and Applied Basic Research Foundation (2020A1515010368 for C.S.).
该研究得到了国家自然科学基金、传染病防治国家科技重大专项、福建省应急科技攻关项目和厦门应急科技攻关项目的支持
假单胞菌P_(12)对菲的降解
从武汉石油化工厂的活性污泥中,分离到一株可以以菲为唯一碳源和能源的假单胞菌P_(12)该菌经靛蓝产生法测定有双加氧酶,在菲无机盐培养基中生长时,有3-菲酚物质积累,经检测有一条质粒带。用丝裂霉素C消除质粒后的菌落,失去了降解菲的能力,说明P_(12)对菲的降解功能是由质粒控制的
建筑钢结构智能制造研究及进展
加快钢结构制造智能化升级,发展新型建造方式,不仅是推动建筑业高质量发展的重点任务,也是我国向制造强国目标迈进的主攻方向。建筑钢结构制造属于典型的离散制造生产方式,具有标准化程度低、生产批量小和种类多样的特点,目前多采用人工辅助的机械化生产,制造生产方式仍然比较落后,因此解决建筑钢结构制造的关键技术问题对实现建筑工业化和智能化具有重要意义。针对建筑钢结构智能制造存在的装备智能化程度低、制造工艺较传统及生产管控数字化不足等问题,研究了建筑钢结构智能制造生产线规划设计、智能装备和先进制造工艺技术以及生产过程数字化管控等诸多内容,并通过数字孪生模型和微型生产线联调联动测试实验对智能生产线的可行性进行了技术验证,为钢结构智能生产线设计和既有生产线升级改造提供了很好的应用示例
建筑钢结构智能制造研究及进展
加快钢结构制造智能化升级,发展新型建造方式,是推动建筑业高质量发展的重点任务,也是向制造强国迈进的主攻方向。建筑钢结构制造属于典型的离散制造生产方式,具有标准化程度低、小批量和多样性的特点,目前多采用人工辅助的机械化生产,制造生产方式仍然比较粗放,解决建筑钢结构制造的关键技术问题对实现建筑工业化和智能化具有重要意义。针对钢结构智能制造存在的装备智能化程度低、制造工艺传统、生产管控数字化不足等三个问题,研究了建筑钢结构智能制造生产线规划设计、智能装备和先进制造工艺技术、以及生产过程数字化管控等诸多内容,并通过数字孪生模型和微型生产线联调联动测试实验对智能生产线可行性进行了技术验证。对钢结构智能生产线设计和既有生产线升级改造起到了很好的应用示范作用
格子Boltzmann方法模拟多孔介质惯性流的边界条件改进
格子Boltzmann方法可以有效地模拟水动力学问题,边界处理方法的选择对于可靠的模拟计算至关重要.本文基于多松弛时间格子Boltzmann模型开展了不同边界条件下,周期对称性结构和不规则结构中流体流动模拟,阐述了不同边界条件的精度和适用范围.此外,引入一种混合式边界处理方法来模拟多孔介质惯性流,结果表明:对于周期性对称结构流动模拟,体力格式边界条件和压力边界处理方法是等效的,两者都能精确地捕捉流体流动特点;而对于非周期性不规则结构,两种边界处理方法并不等价,体力格式边界条件只适用于周期性结构;由于广义化周期性边界条件忽略了垂直主流方向上流体与固体格点的碰撞作用,同样不适合处理不规则模型;体力–压力混合式边界格式能够用来模拟周期性或非周期性结构流体流动,在模拟多孔介质流体惯性流时,比压力边界条件有更大的应用优势,可以获得更大的雷诺数且能保证计算的准确性
溴氰菊酯低温热容的测定及热化学性质
采用精密自动绝热量热计测量了溴氰菊酯在80-400K温区的热容,试样纯度为0.9926(摩尔分数).在此温区内出现一个固-液熔化相变,其熔化温度Tm、摩尔熔化焓△fusHm、摩尔熔化熵△fusSm分别为(372.15±0.02)K,(26.73±0.02)kJ·mol^-1,(71.81±0.06)J·K^-1·mol^-1.报道了该物质在298.15~400K温区内每隔5K的热力学函数H(T)-H<298.15),S(T)-S(298.15),G(T)-G<298.15)值.采用DSC法对试样进行了测定,并与绝热量热法进行了比较.用热重法研究了该化合物的热分解行为,得到分解反应动力学参数反应级数n、频率因子A及活化能E分别为1.78,1.15×10^9min^-1,603.8kJ·mol^-1
