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关于我国风险投资主体多元化的探讨
自20世纪80年代中期风险投资在我国萌芽开始,其资金的来源就以国有资本和国家投资为主。风险投资主体的单一性成为制约我国高新技术产业发展的瓶颈。该文将着重从政府如何有效转变其职能以及如何运用有效的手段引导民间资本进入高新技术领域,使风险投资主体朝着多元化的方向发展
PET和fMRI对肝性脑病的研究进展
肝性脑病是各种严重肝脏疾病所致的中枢神经系统功能失调综合征。目前运用脑功能成像技术尤其是PET、fMRI来研究肝性脑病脑功能代谢及认知功能的改变已经成为一大热点。本文就PET和fMRI在肝性脑病中的研究做一综述
Establishment of MDCK cell lines which stably express visualable human neonatal Fc receptor
[目的]建立稳定表达融合EGFP的人新生儿Fc受体(h FcRn)的MDCK细胞株。[方法]构建重组慢病毒质粒p EGFP-h FcRn,采用四质粒包装系统共转染HEK 293T细胞生产重组慢病毒,感染MDCK细胞后对EGFP阳性细胞进行流式单细胞分选;通过Western Blot及EGFP-β2m荧光共定位验证h FcRn的完整性,并用流式细胞仪检测h FcRn与人Ig G的结合活性。[结果]测序结果表明成功构建p EGFP-FcRn慢病毒表达载体;感染后EGFP阳性MDCK细胞比例约为26.5%,流式单细胞分选后得到纯阳性细胞;荧光共定位及Western Blot均检测到h FcRn的完整表达;流式分析表明细胞株上的h FcRn与Ig G存在p H依赖性结合。[结论]成功获得稳定表达具有生物活性的可视化h FcRn的MDCK细胞株。[ Objective] To establish MDCK cell line stably expressing EGFP- human neonatal Fc receptor(hFcRn) fusion protein. [ Methods ] The lentiviral expression vector for EGFP - hFcRn fusion protein was constructed. Generating by co - transfection of four -plasmids into HEK 293T cells ,the lentivirus particles were used to infect MDCK cell line. EGFP positive single cell was obtained by FACS, and then FcRn expression was identified by fluorescence co -location with EGFP - β2m and confirmed by Western Blot. Flow cytometry was used to detect binding activity of hFcRn and human IgG. [ Results ] DNA se- quencing demonstrated that the lentivirus vector pEGFP - FcRn was constructed successfully. The percentage of EGFP - posi- tive ceils was about 26.5% after infection. Expression of the complete protein was detected through fluorescence co - location and Western Blot, respectively. Flow cytometry analysis showed that the cell lines could pH - dependently capture human IgG. [ Conclusion] MDCK cell line stably expressing functional visualable hFcRn was established.基金项目:国家自然科学基金项目(“结构生物学指导的HBV治疗性抗体人源化及其关键技术研究”,No.31600748;“抗呼吸道合胞病毒高中和活性抗体的保护机制研究”,No.81401668;“基于广谱中和单抗的通用型流感疫苗设计及其结构基础研究”,No.31670934
一种新型H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂的建立
利用5株广谱特异性抗H5亚型血凝素单克隆抗体和酶联免疫渗滤技术成功地建立了一种适于现场检测H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白的抗原快速检测试剂H5-HA(Ag)Dot-ELISA。该试剂对41株代表当前亚洲地区流行的各种遗传变异亚系H5N1禽流感病毒检测均为阳性,对多数毒株的分析灵敏度优于0.1个血凝滴度(HA titer),其中部分优于0.01个血凝滴度;比较该试剂与早期开发的同类ELISA试剂,发现前者对后者未能检出的H5N1新变异株检测均为阳性;利用该试剂和商品化Directigen Flu A(BD)试剂检测两株H5N1病毒株,提示前者灵敏度高于后者;该试剂对一株H5N1病毒的检测灵敏度与标准RT-PCR相当;该试剂对24株非H5亚型病毒检测均为阴性,显示出良好特异性。以上结果提示,此研究建立的H5N1病毒抗原快速检测试剂在H5禽流感现场检测上具有较好的应用前景
H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂对不同现场标本的检测比较
利用H5亚型禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂“H5-HA(Ag)Dot-ELISA(H5-Dot)”对来自陆禽、水禽的484份气管拭子、泄殖腔拭子和粪便拭子标本进行检测,结果:①不同采集方式的H5N1阳性标本的检出率高低有别,气管拭子的检出率最高,泄殖腔拭子次之,粪便拭子最低(P<0·05),因此建议现场采样时应尽可能采集气管拭子标本;②陆禽标本检出率显著高于水禽标本(P<0·05),对病毒培养阳性的陆禽气管拭子检出率达80%(95%CI:70·6%~87·8%),对水禽气管拭子标本的检出率为38%(95%CI:26·9%~49·4%),可能与标本中病毒滴度高低有关;③有症状与无症状陆禽标本的检出率无显著差异。另外,H5-Dot试剂对333份非H5病毒气管拭子标本的特异性为99·4%(95%CI:97·9%~99·9%)。这些结果表明,H5-Dot是一种较为可靠的H5亚型禽流感病毒早期快速检测方法,在缺乏仪器设施和高素质专业技术人员的H5N1禽流感病毒防控第一线具有重要推广价值
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