放射诱导启动子的合成与鉴定及质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK 的构建

【目的】合成放射诱导启动子序列并构建其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1 (+)/ECDglyTK 。【方法】利用人工寡核苷酸片段合成放射诱导启动子, 以绿色荧光蛋白(GFP) 作为报告基因转染 Tca8113 细胞, 经流式细胞仪鉴定其辐射诱导特性。将pCEA-CDglyTK 中双自杀基因CDglyTK 亚克隆到 pcDNA3.1(+), 然后把合成启动子插入到CDglyTK 上游构建质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK 并酶切鉴定, 阳离子 脂质体介导其转染舌鳞癌Tca8113 细胞, RT-PCR 观察CDglyTK 表达及诱导放疗的增效作用。【结果】合成启动 子序列分析与设计序列完全一致; 低剂量放射线照射可诱导这种人工启动子增强GFP 在Tca8113 细胞中的表 达; 重组质粒的酶切图谱与预期一致; 3 Gy 放疗显著增强CDglyTK 在Tca8113 细胞中的表达。【结论】成功合 成放射诱导启动子并构建由其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK, 为进一步研究肿瘤 放射- 基因治疗奠定了基础

Influence of Yiqi Huatan Decocotion and its Component on the Level of Plasm Copper,Zinc in Rat Depression Model

目的:探讨益气化痰方(人参、清半夏、陈皮、茯苓)及其拆方对慢性轻度不可预知应激(CuMS)模型大鼠血清锌、铜含量的影响。方法:健康雄性Sd大鼠60只,随机分为5组。采用kATz刺激方法制备CuMS抑郁模型。在应激的第2天开始,按前期工作中得出了相应的效应中药及其各拆方最佳药物配比熬制中药浓缩剂,调节锌、铜方(3.25 g.kg-1组)和益气化痰方(7.0 g.kg-1)组按提取液10 Ml.kg-1灌胃,阳性药物组按10 Mg.kg-1Ig马普替林混悬液给药,模型组和正常对照组按10 Ml.kg-1给予等量的生理盐水,持续给药至第23天。实验过程中,定期测定水平得分、竖直得分、修饰次数、大便颗粒数及糖水消耗量。于第23天处死大鼠,采集血样。采用原子吸收法测定各组大鼠血清锌、铜水平的含量。结果:采用孤养和CuMS刺激方法成功制备动物抑郁模型。模型组血清铜含量较正常组明显升高、血清锌含量较正常组明显降低;而益气化痰方组与模型组比较均能够逆转上述改变;其中调节锌铜方组可以显著提高血清锌的水平及降低血清铜水平。结论:益气化痰方具有良好的抗抑郁作用,同时能逆转大鼠行为学、体内微量元素锌和铜的改变;其中起主要作用的可能为调节锌铜方药。Objective: To explore the effects of Yiqi Huatan Fang(YQHTF) and its component on the serum copper,zinc in chronic unpredictable mild stress(CUMS) model in rats.Method: Sixty male rats were divided into five groups randomly.The depression model was established by chronic unpredictable mild stress(CUMS) and living individually.On the second day,the adjusting zinc and copper group(3.25 g.kg-1) and the YQHTF group 7.0 g.kg-1 were administrated the diluent by intragastric injection with 10 mL.kg-1.The positive drug group was administrated the maprotiline by intragastric injection with 10 mg.kg-1.The model group and the control group were administrated the saline by intragastric injection with 10 mL.kg-1.During the experiment,the data of open-field test and the percentage of sucrose preference were detected.On day 23,all the rats were decapitated after the last treatment,then blood was immediately isolated for detecting the concentration of the level of serum copper and zinc by atomic absorption method.Result: The depression model was successfully established.Compared with control group,the serum copper level in the model rats was increased significantly and the serum zinc level was decreased significantly.YQHTF could reverse all these changes.The adjusting zinc and copper group could significantly increase the level of serum zinc and decrease the level of serum copper.Conclusion: YQHTF and its component have a good effect of anti-depression.It can improve the behavior of the depressed rats,increase serum copper level and decrease serum zinc level significantly in depressed rats.The adjusting zinc and copper group is likely the major components of YQHTF.福建省自然科学基金(2009J05089

柴郁温胆汤及其拆方对抑郁大鼠血清ACTH、COR及海马cAMP的影响

[目的]探讨柴郁温胆汤及其拆方对抑郁大鼠血清ACTH、COR和海马cAMP的影响。[方法]健康雄性SD大鼠84只,随机分为正常组、模型组、柴郁温胆汤组、化痰组、调气血组、养心脾组、马普替林组。参照Katz刺激方法制备慢性轻度不可预见性应激(CUMS)抑郁模型。采用放射免疫法测血清ACTH、COR和大鼠海马cAMP含量。[结果]与正常组相比,模型组大鼠血清ACTH和COR水平明显升高、海马cAMP含量明显降低。同模型组相比,柴郁温胆汤组及调气血组能明显降低ACTH浓度(P<0.05);柴郁温胆汤组、化痰组和调气血组均能显著降低COR浓度(P<0.01);柴郁温胆汤组、化痰组和马普替林组均能够显著提升大鼠海马cAMP的含量(P<0.01)。[结论]慢性轻度不可预见性应激可以导致大鼠血清ACTH和COR水平升高;海马cAMP含量下降,柴郁温胆汤可以逆转这种改变,其中以调气血和化痰药作用为主,其机制可能与其参与调节HPA轴功能和细胞内信号传导有关

E-选择素介导的大鼠脑缺血再灌注后继发炎症损伤的实验干预

【目的】通过在大鼠脑缺血后再灌注期间使用左旋精氨酸干预黏附分子E-选择素的表达从而减轻炎症损伤。【方法】先后复制易卒中型肾血管性高血压大鼠(RHRSP)模型和右侧大脑中动脉缺血2h再灌注(MCAO/R)线栓模型(n=192),并设立MCAO假手术组(n=48)。入选MCAO大鼠随机分为3个组,分别于缺血早期给予左旋精氨酸(n=72)、右旋精氨酸(n=48)和等体积生理盐水(n=72)。测定缺血侧脑组织NO代谢物含量、MPO活性、间接免疫荧光染色和RT-PCR方法检测E-选择素表达。【结果】左旋精氨酸组缺血后至再灌注0、4和8h后NO代谢物含量(52±12、81±34、131±27)高于相应时间段的盐水组(43±14、40±17、105±39)和右旋精氨酸组(38±13、34±16、109±29)。左旋精氨酸组大鼠缺血及再灌注早期E-选择素表达及MPO活性低于右旋精氨酸组和盐水组。【结论】大鼠脑缺血早期使用左旋精氨酸可以增加缺血区域NO含量,减少缺血再灌注早期E-选择素的表达和中性粒细胞的浸润

复方柴郁温胆汤及其拆方对抑郁模型大鼠血清铜、锌含量的影响

目的:探讨复方柴郁温胆汤(柴胡、郁金、枳实、半夏、陈皮、竹茹、人参、茯苓、大枣、炙甘草)对抑郁模型大鼠血清铜、锌的影响。方法:健康雄性SD大鼠84只,随机分为7组。采用Katz刺激方法制备慢性轻度不可预见性应激(CUMS)抑郁模型。分别拆方为化痰组(半夏、陈皮、竹茹)、调气血组(柴胡、郁金、枳实)、养心脾组(人参、茯苓、大枣、炙甘草)。血清铜、锌采用原子吸收法检测。结果:采用孤养和CUMS刺激方法成功制备动物抑郁模型。模型组血清铜含量较正常组明显升高、血清锌含量较正常组明显降低;而柴郁温胆汤组较模型组比较均能够逆转上述改变;其中化痰组可以提高血清锌的水平、养心脾组可以降低血清铜的水平。结论:柴郁温胆汤具有良好的抗抑郁作用,同时能逆转大鼠行为学、体内微量元素锌和铜的改变;其中起主要作用的可能为化痰组和养心脾组药物

Determination of Trace PO_4--(-3) by Quenching Fluorescence with Flow Injection Analysis

研究了以铝- 桑色素为荧光试剂， 在酸性条件下利用荧光熄灭法， 并结合了流动注射分析测定了水中微量磷酸根离子的方法. 测定PO3 -4 的线性范围1 ~9 Mg/l， 检测限为0-002 Mg/l， 1H可以测定60 份样品， 相对标准偏差为1-09 % .A method is investigated to determinate trace PO 4 3- in acid solution based on oxygen quenching aluminium-morin fluorescence intensity combining with flow-injection analysis.The linearship is between 1～9mg/L with the limit of detection 0 002mg/L.60 samples per hour can determinated by this method with RDS 1 09%.国家863计划资助!（818－Q－09

柴郁温胆汤对大鼠抑郁模型行为学及脑内单胺类神经递质的影响

目的:探讨中药复方柴郁温胆汤抗抑郁作用的机制。方法:以孤养加慢性轻度不可预见性应激方法建立大鼠抑郁症模型,用旷场行为测定及糖水消耗试验进行行为学评分,并用高效液相-电化学方法检测其脑内单胺类神经递质的含量,观察模型大鼠给药前后的变化。结果:抑郁症模型大鼠体质量增长缓慢,水平和垂直活动及糖水消耗量均明显减少(P<0.05,P<0.01);杏仁核NE、DA、5-HT、HVA含量减少(P<0.05);纹状体NE、DA、5-HT含量减少(P<0.05)。柴郁温胆汤能改善模型大鼠行为学变化,升高杏仁核NE、5-HIAA、5-HT、HVA(P<0.05)及DA含量(P<0.01),升高纹状体DA和5-HT含量(P<0.05)。结论:柴郁温胆汤具有抗抑郁作用,对中枢单胺类神经递质的调节作用是其疗效机制之一

马普替林对CUMS抑郁模型大鼠血清铜锌钙镁含量的影响

目的探讨部分金属元素铜、锌、钙、镁与抑郁症之间的关系。方法健康雄性SD大鼠36只,随机分为3组。采用Katz刺激方法制备CUMS抑郁模型。结果采用孤养和CUMS刺激方法成功制备动物抑郁模型。模型组血清铜含量较正常组明显升高、模型组血清锌含量较正常组明显降低;而马普替林组较模型组比较均能够逆转上述改变;关于钙和镁未发现其差异性。结论微量元素锌和铜与抑郁症密切相关,其机制可能与突触可塑性、内分泌、神经递质等因素相关

益气化痰方对抑郁模型大鼠行为学的影响

目的:观察比较中药复方益气化痰方不同剂量配比对抑郁模型大鼠行为学的影响。方法:雄性大鼠随机分为正常组、模型组、益气化痰Ⅰ组、益气化痰Ⅱ组,以孤养加慢性轻度不可预见性应激方法建立大鼠抑郁症模型,采用Open-Field法、1%蔗糖水消耗实验及体重变化观察抑郁模型大鼠的行为学变化。结果:与正常组相比,模型组大鼠糖水消耗量明显减低,水平得分、垂直得分、修饰次数和大便颗粒数均明显下降,且体重增长缓慢,有显著性差异(P<0.05);与模型组相比,益气化痰Ⅰ组、益气化痰Ⅱ组均能够不同程度增加糖水消耗量、垂直得分、大便颗粒、修饰次数和体重,较模型组有显著性差异(P<0.05);且益气化痰Ⅰ组改善作用更明显。结论:益气化痰方能有效的改善抑郁模型大鼠的行为学变化;其中补气药作用明显优于化痰药

Phytoplankton biomarkers in surface seawater from the northern South China Sea in summer 2009 and their potential as indicators of biomass/community structure

生物标志物已被广泛应用于重建浮游植物生产力和群落结构变化。该方法假设之一是生标的含量可以反映表层海水的浮游植物生物量,但这个假设还缺乏现场观测的充分验证。对2009年冬季南海北部表层海水颗粒物中主要生标做了分析,利用其含量及比值研究浮游植物的生物量及群落结构的分布。生标含量表明硅藻、甲藻、颗石藻的高值区位于珠江口南部及广东沿岸,在陆坡区也有高值。生标比值显示硅藻在3个类群中的相对比例最高。其中,甲藻/硅藻比值高值区位于陆坡区,这与大洋水(黑潮)的入侵,带来大量暖水性甲藻有很大关系;颗石藻/硅藻比值总体趋势与生物量的分布相反,在近岸少数站位有高值,向外海逐渐增加,主要是因为颗石藻更适于寡营养盐的环境。生标结果所指示的生物量及群落结构的空间分布与前人的调查结果类似,为利用生标重建此区域的浮游植物生产力和群落结构变化提供了依据。Biomarkers have been widely used to reconstruct phytoplankton productivity based on the assumption that biomarker contents could reflect phytoplankton productivity in the surface seawater.However,this hypothesis has not been validated with modern survey.In this study,the contents and ratios of three phytoplankton biomarkers in the surface seawater of the northern South China Sea in winter 2009 were analyzed,to indicate spatial distributions of phytoplankton biomass and community structure.The results show high values for diatoms,dinoflagellates and coccolithophorids near the Pearl River Estuary and Guangdong coastal areas.The community structure indicates diatoms are the dominant phytoplankton species in winter.High values of dinoflagellate/diatom ratio occur near the slope area owing to intrusion of the Kuroshio,which favors the growth of dinoflagellates.The coccolithophorid/diatom ratio displays an increasing trend from the Pearl River Estuary to offshore region due to the advantage of coccolithophorids in oligotrophic environment,which is opposite to the productivity pattern of all biomarkers.These results are consistent with previous studies using phytoplankton cell and pigments,which provides support for the use of biomarker to reconstruct phytoplankton productivity and community structure in the SCS.国家重点基础研究发展计划项目(2007CB815934、2009CB421201);国家自然科学基金项目(40776029