人脐血间质干细胞一般特性及其多向分化潜能

【目的】观察人脐血间质干细胞增殖能力、细胞表面分子标志及多向分化潜能。【方法】从人脐血中分离出单个核贴壁细胞并进行体外培养。将细胞以单克隆抗体标记后用流式细胞仪进行检测。向培养细胞中加入成骨、成软骨和成脂肪诱导剂，检测其多向分化能力。【结果】脐血间质干细胞原代培养时间为7周。流式细胞分析显示这些细胞CD29、CD13、CD44等表达为阳性，但是它们不表达造血干细胞表面标志物。加入成骨诱导剂会导致细胞碱性磷酸酶的表达。采用微球培养法并加入软骨诱导剂对细胞进行诱导，用阿尔新蓝染色显示有蛋白多糖表达。在加入成脂诱导剂后，会导致细胞形态学改变，且油红O染色为阳性。【结论】通过体外传代培养的方法可以从人脐血单个核贴壁细胞中得到纯化的间质干细胞。脐血有望成为间质干细胞的替代来源

靶向乙型肝炎病毒的外源性microRNA的构建及作用

【目的】探讨靶向乙型肝炎病毒的外源性microRNA（amiRNA）的构建及其抑制HBV复制的作用。【方法】应用 Invitrogen公司miRNA在线设计软件（BLOCK-iT TM RNAi Designer）针对HBV基因设计4条amiRNA序列；构建amiRNA真核表 达质粒，Lipofectamine2000转染至人肝癌细胞株HepG2.2.15；荧光定量PCR检测HBV-DNA，ELISA检测HBsAg和HBeAg表 达水平。【结果】设计合成的4条amiRNA均可下调培养体系中HBV-DNA水平以及HBsAg和HBeAg水平，与阴性对照组相 比差异有统计学意义（P < 0.05）。其中以miR3抑制HBV-DNA复制的效果最为显著。【结论】靶向HBV基因适当位点设计 合成的amiRNA在体外可以有效抑制HBV的复制