Cloning and Expression of Genes from Venom Gland of Bungarus multicinctus

本研究利用前期研究中构建的pGEX-BgTX（P22-A31）质粒在大肠杆菌BL21（DE3）中表达并纯化后得到了较纯的重组α-银环蛇毒素同工毒素，得率约为1.225mg/L。用重组蛋白与天然α-银环蛇毒素的抗原性一致。重组α-银环蛇毒素同工毒素的半致死剂量LD50为1.598mg/kg，约为天然α-银环蛇毒素的1/5且有一定的镇痛药效，1/4LD50剂量的镇痛百分率为55.2%，1/8LD50剂量的镇痛百分率为20.5%，在外周镇痛作用中呈一定的量效关系。以上结果表明，本研究重组表达的α-银环蛇毒素同工毒素（P22-A31）具有与天然α-银环蛇毒素相似的生物学活性。α-银环蛇毒素cDNA序列...α-bungarotoxin plays very important role in neuroscience research, clinical application and the pharmaceutical industry. In order to acquire quantites of α-bungarotoxin, we expressed GST-α-bungarotoxin fusion protein using constructed plasmid pGEX-BgTX (P22-A31) in E. coli BL21 (DE3) cell and finally obtained recombinant α-bungarotoxin with yields of about 1.225 mg/L. The results of both ELISA and...学位：理学硕士院系专业：生命科学学院生物学系_生物化学与分子生物学学号：20032610

两个蛇毒基因克隆及cDNA序列多态性再分析

α-银环蛇毒素(α-bungarotoxin)是一种突触后神经毒素,广泛存在于眼镜蛇科蛇类的毒腺中,对于该基因cDNA多态性是否真实一直存有争议。本研究从银环蛇基因组DNA中克隆到α-银环蛇毒素基因序列,并对其中5个克隆进行测序和序列比对分析。作为参照,从同一次反转录得到的cDNA混合物中,克隆了蛇毒神经生长因子cDNA,并对其进行测序、比对和突变情况分析。综合各研究组报道的α-银环蛇毒素cDNA序列、α-银环蛇毒素基因序列和神经生长因子cDNA序列的突变情况,发现α-银环蛇毒素cDNA的多态性在基因组模板上不存在对应的变化,因此推测这种多态性不是从不同的转录本而来,同时考虑到不同研究小组报道的序列突变位点并没有出现相同的情况,因此其多样性也不是RNA编辑的结果。可见这种cDNA序列上的多样性很可能是由反转录过程以及基因克隆过程中人为引入的错误造成的

ApoE基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的相关性研究

目的分析ApoE基因与血脂和颈动脉粥样硬化程度的关系,进一步探讨ApoE基因与动脉粥样硬化性脑梗死的相关性。方法采用病例-对照研究的方法,收集厦门大学附属第一医院神经内科的95例缺血性脑卒中和65例非缺血性脑卒中住院患者。检测患者的ApoE基因型、血脂及颈动脉粥样硬化程度。结果与E2/E3比较,基因型E3/E3、E3/E4可能是缺血性脑卒中的保护因素;缺血性和非缺血性脑卒中患者在血浆TC、LDL-C、ApoB含量比较上均为E3/E4> E3/E3>E2/E3,且2组血浆LDL-C浓度在E3/E4与E2/E3、E3/E3比较中差异有统计学意义(P<0. 05); LDL-C、ApoB与2组颈动脉粥样硬化斑块程度有关,是其危险因素;与基因型E2/E3比较,E3/E4在有斑块组中较无斑块组比例高。结论基因型E3/E3、E3/E4可能是缺血性脑卒中的保护因素。基因型E3/E4可能是导致患者颈动脉粥样斑块形成的危险因素,基因型E3/E4通过影响患者的血浆LDL-C水平进一步导致动脉粥样硬化斑块的形成,但与动脉粥样硬化性脑梗死的相关性研究有待更大的样本量更进一步的研究

飞地:孤悬在外的领土

什么是飞地飞地,如果从来没有听说过这个地理学名词的话,乍一听是很有些“晕“的。但是细细想来,这个词语的字面其实很生动,仅顾名思义,也可以作出一番推断:既是飞地,不过“飞来之地“或是“飞去之地“,其“飞“的形式足以说明这块土地是游离的,而从何处飞来——它的母体在哪里,又飞至何处——它的现居位置,正是它的两大核心。右侧4幅示意图列举了几种较为普遍的飞地形式,前两幅都是在陆地的环境下,后两幅是有水域的情况。按照《牛津地理学词典》的定义,图1中A地是b国的内飞地,同时也是C国的外飞地,而在图2中,A地是C国的外飞地,却由于是夹在两个以上国家的边境之间,因此不是b和d任何一国的内飞地

股权经理选择及其业绩评价

本文旨在介绍一种选择货币经理的方法,并对其在12年期间里的业绩进行考察。我们应用一系列应用于其他数据分析的著名的统计程序来对其业绩作出经验性评估。该研究的价值在于其数据的独特性,以及它首次使用根据特定选择标准选出的一组养老基金经理的业绩

The Application of Bioinformatics in the Research of Alternative Splicing

基因选择性剪接现象是真核生物基本而又重要的调控机制。由于基因的选择性剪接在形成生物复杂性和多样性上具有极其重要的作用,同时选择性剪接与许多人类疾病也密切相关。因此,研究基因选择性剪接是一项十分重要的工作。生物信息学作为一门新兴的学科在研究基因选择性剪接上起关键的作用,尤其在研究基因表达调控机制、选择性剪接基因预测以及选择性剪接基因进化上。文章综述了这方面的最新研究进展,为更深入了解真核生物基因的表达调控机理提供依据。Alternative splicing,a fundamental and important regulatory mechanism in eukaryotes,allows one pre-(mRNA) to be processed into many different mature forms within a cell,each of which can have distinct functions.As alternative splicing is associated with human diseases,the study of alternative splicing becomes quite important.Bioinformatics is a new subject for the study of alternative splicing,especially for its regulatory mechanism,prediction and origin.Of course,bioinformatics must be combined with experimental research so as to clarify these aspects of alternative splicing.This paper reviewed the recent research progress in this field in the hope to gain a deeper understanding of eukaryotic gene expression regulation.国家自然科学基金项目(编号:60305001,30470938)资助~

One New Ten-membered Lactone from Phomopsis sp. B27,an Endophytic Fungus of Annona squamosa L.

目的:研究番荔枝内生真菌拟茎点霉B27的化学成分。方法:通过色谱层析柱对提取物进行分离纯化,并通过波谱解析(一维、二维的核磁共振谱和质谱)确定化合物的结构。结果:分离纯化得到5个化合物,鉴定为十元大环内酯phomolide C(1),1-甲基-8-羟基-9,10-蒽醌(2),1,8-双羟基-9,10-蒽醌(3),cytosporone C(4)和Altiloxin A(5)。结论:化合物1是新化合物;化合物1-5首次从拟茎点霉属菌株中分离得到。AIM: To study the chemical constituents of Phomopsis sp. B27, an endophytic fungal strain of Annona squamosa L. METHODS: The extract was isolated and purified by column chromatography. The structures of chemical components were deter-mined by spectroscopic analyses including 1D-, 2D-NMR and MS data. RESULTS: Five compounds were isolated and determined as a ten-membered lactone, namely phomolide C (1), 1-methoxy-8-hydroxy-9,10-anthraquinone (2), 1,8-dihydroxy-9,10-anthra-quinone (1,8-DHA) (3), cytosporone C (4) and altiloxin A (5). CONCLUSION: Compound 1 is a new ten-membered lactone; and compounds 1-5 were isolated from the genus Phomopsis for the first time.the National Science Foundation for Distinguished Young Scholars to Y. Shen. (No.30325044).~

生物陶瓷隔药灸治疗宫颈癌术后尿潴留疗效观察

目的:观察生物陶瓷隔药灸治疗宫颈癌术后尿潴留的临床疗效。方法:将79例患者随机分成治疗组和对照组。治疗组选择生物陶瓷隔药灸疗法,将自拟活血温经方的药物研粉后外敷于关元、中极、双侧水道4个穴,以敷贴粘牢固定,再用加热过的生物陶瓷温灸球置于敷贴上温灸。对照组选择神经肌肉电刺激治疗。比较两组治疗后的残余尿量和临床疗效。结果:在改善残余尿量及临床疗效方面,治疗组均优于对照组。结论:生物陶瓷隔药灸治疗宫颈癌术后尿潴留有较好疗效

Expression and functional analysis of recombinant α-bungarotoxin (P22-A31)

α-银环蛇毒素在神经科学研究以及在临床和制药上有重要作用,为获得大量的α-银环蛇毒素,我们用已构建的pGEX-BgTX(P22-A31)质粒在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,并用谷胱甘肽Sepharose FF纯化GST-α-银环蛇毒素融合蛋白,再用凝血酶切掉融合标签谷胱苷肽转移酶(Glutathione S-transferase,GST),得到了较纯的重组α-银环蛇毒素同工毒素,得率约为1.225mg/L。用重组α-银环蛇毒素制备多克隆抗体,经ELISA和Western杂交鉴定后可知重组α-银环蛇毒素与天然α-银环蛇毒素的抗原性一致。小鼠毒性试验表明,重组α-银环蛇毒素同工毒素的半致死剂量LD50为1.598mg/kg,约为天然α-银环蛇毒素的1/5。小鼠化学法镇痛试验显示,重组α-银环蛇毒素有一定的镇痛药效,1/4LD50剂量的镇痛百分率为55.2%,1/8LD50剂量的镇痛百分率为20.5%,在外周镇痛作用中呈一定的量效关系。α-bungarotoxin plays very important role in neuroscience research, clinical application and the pharmaceutical industry. In order to acquire quantitites of α-bungarotoxin, we expressed GST-α-bungarotoxin fusion protein using constructed plasmid pGEX-BgTX (P22-A31) in E.coli BL21 (DE3)cell, purified GST-α-bungarotoxin using glutathione-Sepharose FF, cleavaged Glutathione S-transferase(GST) tag by thrombin in the column, and finally, we obtained recombinant α-bungarotoxin with yields of about 1.225 mg/L. In order to compare the immunogenicity of recombinant protein and crude α-bungarotoxin, we prepared multi-antibody using recombinant α-bungarotoxin. The results of both ELISA and Western blot showed that recombinant α-bungarotoxin has the same antigenicity as natural α-bungarotoxin. In vivo toxicity tests showed that the LD_ 50 of recombinant α-bungarotoxin was 1.598 mg/kg, about 1/5 that of natural α-bungarotoxin. Analgesis percentages with doses of 1/4 LD_ 50 and 1/8 LD_ 50 were 55.2% and 20.5% respectively, indicating that recombinant α-bungarotoxin possesses analgesic efficiency.国家自然科学基金(No.30470938);; 教育部留学回国人员启动基金资助~

九龙江流域地表水锰的污染来源和迁移转化机制

锰是人体必需微量元素,但近年来河流湖库等地表水锰超标现象时有发生,威胁供水安全.本文于2016—2017年在福建省九龙江流域开展水系沿程梯度调查及机理实验,结合历史监测资料综合研究,探明九龙江锰含量的时空分布与迁移转化规律,揭示九龙江锰的污染来源、超标成因与调控机制.结果表明,溶解锰高值及超标站位集中在北溪上游矿区支流和干流部分水库,且主要发生在枯水期;上游矿区支流颗粒锰含量最高,随后从上游到下游沿程递减,且与总悬浮颗粒物(TSM)和pH显著正相关(p7.8)环境促进亚热带红壤颗粒富集锰,大量富锰颗粒进入pH逐渐下降的河流下游和电站库区后向溶解锰转化,从而导致锰超标.河流下游及库区pH值下降的主要原因包括酸沉降、酸性废水排放、富营养化条件下有机物分解等.研究结果为我国地表水锰污染防控、饮用水安全保障与流域水环境综合管理提供科学依据.国家重点研发计划(No.2016YFC0502901);;福建省环保科技计划项目(No.2016R017)~