: Bifidobacterium species 유래 대사물에 의한 CD4+ T cell 분화 조절

학위논문(석사) -- 서울대학교대학원 : 자연과학대학 생명과학부, 2023. 8. 박주홍.Microbiota-derived metabolites play a vital role in mediating the interaction between microbes and host immunity. The Bifidobacterium genus is critical to the regulation of the immune system. Specifically, Bifidobacterium pseudolongum, Bifidobacterium adolescentis, and Bifidobacterium longum subsp. longum have been identified as regulators of CD4+ T cell subsets, including T helper 17 cells (Th17) and regulatory T cells (Treg) involved in adaptive immunity. However, it remains unclear whether their metabolites are involved in immune modulation. Therefore, this study aimed to examine the possibility that the metabolites derived from these three Bifidobacterium species play a role in regulating the differentiation of Treg and Th17 cells. The results of this study demonstrated that the conditioned media of B. pseudolongum promoted the differentiation of Treg cells and upregulated the expression of genes associated with Treg functions. Furthermore, the conditioned media of both B. pseudolongum and B. adolescentis significantly enhanced the differentiation of IL-17A+ Th17 cells. These findings suggest that B. pseudolongum and B. adolescentis may produce immunomodulatory metabolites that regulate the differentiation of CD4+ T cells.장내미생물에서 유래한 대사물은 미생물과 숙주 면역계 간의 상호작용을 매개하는 데 중요한 역할을 담당한다. 비피도박테리움 속은 장내 세균 중 하나로 면역계 발달과 조절에 중요하다. 특히 Bifidobacterium pseudolongum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium longum subsp. longum은 Th17 세포와 조절 T 세포를 포함하는 적응 면역계의 CD4+ T 세포를 조절한다. 하지만 그들의 대사물이 이러한 면역 조절에 관여할 수 있는가에 대한 연구는 부족하다. 본 연구에서는 이 세가지 비피도박테리움 종의 배양액이 Th17 세포와 조절 T 세포에 분화에 미치는 영향을 조사했다. 그 결과, B. pseudolongum의 배양액이 조절 T 세포 분화를 촉진시키고, 관련된 유전자 발현을 증가시킬 수 있음을 관찰했다. 게다가, B. pseudolongum, B. adolescentis의 배양액이 인터루킨 17 A를 발현하는 Th17 세포의 분화를 향상시켰다. 따라서, B. pseudolongum, B. adolescentis의 대사물이 T 세포에 의한 면역 반응을 조절할 수 있는 가능성을 확인하였다.Abstract ⅰ Table of Contents ⅲ List of Figures ⅵ List of Tables ⅷ Abbreviations ⅸ Chapter I. Introduction 1 1. Study Background 2 1.1. CD4+ T cell differentiation in immune system 2 1.2. Gut Microbiota and immune response 2 1.2.1. Overview of gut microbiota 2 1.2.2. Immune modulation by gut bacteria 3 1.2.3. Immunomodulatory bacterial metabolites 4 1.2.3.1. Bacterial tryptophan catabolites-mediated immune regulation 5 1.3. Bifidobacterium and immune response 6 2. The aim of this study 8 Chapter II. Material and Methods 9 1.1. Bacterial strains 10 1.2. Culture conditions 10 1.3. AhR reporter assay 11 1.3.1. Cell culture 11 1.3.2. AhR reporter assay 11 1.4. CD4+ lymphocytes isolation 12 1.5. In vitro T cell differentiation 12 1.6. Fluorescence-activated cell sorting (FACS) 13 1.7. RNA preparation and qRT-PCR 14 1.7.1. RNA extraction 14 1.7.2. qRT-PCR 14 Chapter III. Results 17 1. B. pseudolongum-conditioned media enhance Treg differentiation and gene expression. 18 2. The conditioned media of B. pseudolongum and B. adolescentis promote Th17 differentiation. 32 3. Comparative effects of Bifidobacterium-conditioned media on immune cell differentiation with aryl hydrocarbon receptor activation. 34 Chapter IV. Discussion 37 References 43 국문초록 55석

나노구조체 기반 약물 표적 전달 및 광열치료

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 약학과, 2017. 2. 오유경.표적 약물 전달은 항암제의 치료효과를 증진시키는 유망한 전략 중의 하나로 여겨져 왔다. Protein tyrosine kinase 7 (PTK7)에 특이적으로 결합하는 것으로 알려진 DNA aptamer의 반복서열인 polyaptamer nanothread가 rolling circle amplification (RCA) 기술을 통하여 합성되었고, 환원 그래핀 나노시트 (rGO)에 polyaptamer nanothread를 수식하여 PTK7 과발현 세포주에 항암제 전달 효율을 증진시켰다. 또한 polyaptamer nanothread가 수식된 rGO (PNT/rGO)는 PTK7 과발현 암종이 이식된 쥐에 정맥주사를 통해 항암제인 doxorubicin을 효과적으로 전달하여 암의 성장을 억제하였다. RCA 기법을 통해 antisense oligonucleotide (ASO)에 상보적인 서열을 갖는 DNA nanoball을 제조하였다. Dz13과 OGX-427이 DNA nanoball에 탑재되었고, Mu peptide와 히알루론산(HA)으로 수식되어 CD44를 과발현하는 암세포에 전달하였다. Dz13과 OGX-427을 탑재한 DNA nanoball은 효과적으로 타겟 mRNA와 단백질의 발현을 억제하였고, 세포 수준과 암이식 쥐 모델에서 뛰어난 항암효과를 보였다. 광열치료는 강력하고, 상대적으로 비침습적인 암치료법으로 연구되고 있다. 본 연구에서는 탄닌산 (TA)과 철의 킬레이트 화합물에 의해 표면이 개질된 boron nitride nanosheets (BNNSs)를 안전하고 새로운 광열 치료 물질로 제시하였다. TA-Fe/BNNS는 근적외선 레이저 조사에 의해 온도가 올라가는 광감응성을 보였고, TA-Fe/BNNS의 광열효과는 암세포주의 세포사멸을 유도하였고, 암이 이식된 쥐 모델에 국소 투여 되었을 때 암조직을 완전히 제거하였다. 마지막으로, 금 나노클러스터가 봉입된 DNA nanoball (AuDNB)을 RCA 기술을 통하여 제조하였고, AuDNB는 근적외선 조사에 의한 광열 효과를 나타내었다. 또한 AuDNB를 암세포주에 처리하고, 근적외선을 조사함으로써 AuDNB의 광열 효과에 의한 암세포 사멸효과를 확인하였다.Targeted drug delivery has been considered as a promising strategy to improve therapeutic effects of anticancer agents including chemicals and biomolecules. First, DNA polyaptamer nanothreads against protein tyrosine kinase 7 (PTK7) receptor anchored onto redcued graphene oxide (rGO) nanosheets (PNTrGO) were prepared for targeted delivery. The polyaptamer was produced by rolling circle amplicifation (RCA) and introduced onto rGO nanosheets via high affinity between oligo-T sequence and rGO nanosheets. PNTrGO improved cellular uptake to PTK7 overexpressed cancer and enhanced tumor accumulation in tumor xenografted mice. Moreover, doxorubicin (Dox)-loaded PNTrGO enhanced the inhibition effect of tumor growth in PTK7-positive tumor bearing mice. Secondly, DNA nanoballs which are able to carry antisense oligonucleotide (ASO) and target to CD44 overexpressed cancer were developed. Two types of ASOs, Dz13 and OGX-427, were loaded to RCA product in complementary manner via hybridization. Furthermore, Mu peptide derived from adenovirus was condensed the ASO-loaded RCA product. Hyaluronic acid (HA) coating enhanced the cellular uptake of both Dz13 and OGX-427 to CD44-positive cancer cells, and reduced their target mRNA and proteins effectively. Photothermal therapy (PTT) has been investigated as potent and less invasive cancer treatment method. Boron nitride nanosheets (BNNSs) coated with tannic acid (TA) and iron film (TA-Fe/BNNSs) were prepared as novel and safe PTT agent. TA-Fe/BNNSs showed photothermal activity followed by NIR laser irradiation, and the photothermal effect of TA-Fe/BNNS was enough to eradicate tumor tissues after local administration to tumor-bearing mice. Lastly, gold nanocluster (AuNC)-loaded DNA nanoballs (AuDNBs) were designed as biocompatible PTT agent. AuNCs were synthesized with long single stranded DNA (ssDNA) produced by RCA and incorporated into the RCA product. The assembly of AuNCs located in DNA nanoballs generated heat after NIR laser irradiation, and the anticancer effect was achieved by AuDNB treatment followed by NIR laser irradiation in cancer cells.Chapter I. Overview 1 1. Introduction 2 2. Targeted drug delivery systems for cancer treatment 4 3. Photothermal therapy for cancer treatment 7 4. Scope of the studies 10 5. References 12 Chapter II. Polyaptamer DNA nanothread-anchored, reduced graphene oxide nanosheets for targeted delivery 25 1. Introduction 26 2. Materials and methods 29 3. Results 41 4. Discussion 58 5. References 63 Chapter III. Biomimetic DNA nanoballs for targeted oligonucleotide delivery 68 1. Introduction 69 2. Materials and methods 71 3. Results 80 4. Discussion 97 5. References 103 Chapter IV. Photoresponsive boron nitride nanosheets modified with polyphenol and iron complexes 108 1. Introduction 109 2. Materials and methods 111 3. Results 120 4. Discussion 143 5. References 149 Chapter V. Gold nanoclusters loaded DNA nanoballs for photothermal anticancer therapy 156 1. Introduction 157 2. Materials and methods 159 3. Results 164 4. Discussion 174 5. References 177 Conclusion 183 국문 초록 185Docto

직교류 내 고체입자 포함 제트유동에서의 입자 분산에 대한 실험연구

학위논문(박사) -- 서울대학교대학원 : 공과대학 기계항공공학부, 2023. 8. 박형민.직교류 내 고체입자 포함 제트 유동은 제조 시설과 같은 산업 현장이나, 화산이나 화재 현장과 같이 자연에서도 흔히 발생하는 유체역학적 현상이다. 직교류 내 제트 유동 내에서는 복잡한 와류 구조들이 생성되기 때문에, 이러한 와류 구조에 의한 고체입자 분산 메커니즘에 대한 이해는 다양한 유형의 유동 구조들에 적용 가능하다. 본 연구에서는 제트 출구 근처에서 국부적으로 불어오는 직교류 내 고체입자 포함 제트 유동에 대해 와류 구조와의 상호작용을 통한 고체입자 분산(농도)를 실험적으로 관찰하였다. 요약하자면, 본 논문은 1) 직교류 내 고체입자 포함 제트 유동 내에서 발생하는 다양한 고체입자 분산 패턴들뿐만 아니라 2) 유동 내 미세 액적 함량에 따른 입자 거동 제어 방법론까지 포함한 고체입자와 공기 유동 사이의 상호작용에 대한 종합적인 분석으로 구성되어 있다. 먼저, 고체입자 분산 패턴과 분산 메커니즘들은 다양한 유동 속도비(제트/직교류 R = 1.0 – 3.5)와 입자 Stokes number(St = 0.01 – 27.42)에 대하여 관찰되었다. 직교류가 없을 때는, 수평 방향을 따라 지지배적인 와류 구조가 존재하지 않기 때문에 대부분의 입자가 수직방향으로 상승하며 제트 중심 밖으로 분산되지 않는다. 반면, 직교류가 있는 경우에는, 제트 출구 위에서 counter-rotating vortex pair (CVP)가 형성되며 CVP의 세기는 R이 감소할수록(제트가 더 꺾일수록) 증가한다. R이 작을수록 CVP에 의해 입자에 작용하는 항력의 크기가 증가하고, 특히, St가 1 미만으로 매우 작은 입자들은 이러한 항력이 입자 거동에 가장 중요하게 작용한다. 따라서, CVP가 발달하는 시기에 많은 양의 입자들이 CVP에 의해서 제트 중심 바깥으로 분산된다. St가 1에 가까운 경우에는, 항력 방향의 전환에 의해서 입자들이 CVP 내부 (특히 제트 중심)에 머물게 된다. 다양한 Stokes number와 R에 대해 관찰된 분산 패턴들은 최종적으로 3가지 유형으로 분류가 되었고, 분산 메커니즘들은 경험적 입자 분산모델까지 확장된다. 이러한 입자 분산 특성 규명 연구에 이어서, St < 1의 입자가 공기 중 미세 액적과 상호작용할 때 발생하는 입자 분산 특성 변화를 실험적으로 관찰하였다. 해당 실험에서는 친수성(Si)과 소수성(PTFE) 입자의 거동 변화를 직교류 내 다양한 미세 액적 부피분율 조건(0%, 0.014% & 0.03%)에 대하여 분석하였다. R = 2.85인 유동에서는 Si와 PTFE 입자 모두 미세 액적의 양과 관계없이 항상 일정한 거동 특성을 보였다. 높은 속도비의 유동에서는 jet 내부로의 적은 직교류 유량 때문에 약한 CVP가 발생하므로 입자들이 미세 액적과 상호작용할 확률이 현저히 낮아지기 때문이다. 반면에 R = 1.1인 경우, 유동 내 미세 액적 분율이 높을 때 Si 입자가 제트 중심쪽에 우위적으로 집중되어 먼 위치까지 분산되는 입자 양의 증가한다. 이러한 현상은 입자와 액적사이의 상호작용에 의하여 입자가 제트 중심쪽으로 항력을 받게 되어, CVP 외부로 거의 분산되지 않기 때문에 발생하는 현상이다. PTFE 입자는 낮은 R의 유동에서도 미세 액적의 영향을 받지 않아 분산 특성이 변하지 않았다.A particle-laden jet with a crossflow is a common phenomenon in industrial sites, such as manufacturing facilities, and in nature, such as volcanoes and fires. Since complex vortex structures are generated in the jet with crossflow, an understanding of the mechanisms of solid particle dispersion by these vortex structures is applicable to lots of different types of flow structures. In the present study, particle dispersions (concentrations) through vortical interactions are experimentally investigated for a particle-laden upward jet, with a horizontal crossflow covering a vertical range partially near the jet exit (Reynolds numbers of 1170–5550). In summary, this paper consists of a comprehensive analysis of the interaction between solid particles and air flow, including 1) various solid particle dispersion patterns occurring in the particle-laden jet with crossflow, and 2) a methodology for changing particle behavior based on the mist droplet content in the flow. Firstly, solid particle dispersion patterns and dispersion mechanisms were observed for various flow velocity ratios (jet/crossflow = R = 1.0 - 3.5) and particle Stokes numbers (St = 0.01 - 27.42). Without crossflow, there is no dominant vortical structure along the horizontal direction; thus, the particles are not dispersed significantly out of the jet core in most cases. With crossflow, on the other hand, counter-rotating vortex pairs appear above the jet exit and become stronger as the velocity ratio decreases. The smaller R increases the magnitude of the drag force exerted on the particles by the CVP, and especially for very small particles with St less than 1, this drag force is the most important factor in particle behavior. Therefore, during the period of CVP development, a large amount of particles are dispersed out of the jet center by the CVP. When St is close to 1, the particles are kept inside the CVP (especially in the jet center) by a change in drag direction. The observed dispersion patterns for various Stokes numbers and R were finally categorized into three regimes, and the dispersion mechanisms were extended to empirical particle dispersion models. Following this study, we experimentally observed the changes in particle dispersion patterns that occur when particles with St < 1 interact with mist droplets in the air. In these experiments, the changes in the behavior of hydrophilic (Si) and hydrophobic (PTFE) particles were analyzed for different mist droplet volume fraction conditions (0%, 0.014% & 0.03%) in the crossflow. For R = 2.85, both Si and PTFE particles always exhibited constant behavior regardless of the amount of mist droplets. This is because at high velocity ratio flow, the less entrainment crossflow into the jet causes weak CVP, which significantly reduces the probability of particles interacting with mist droplets. On the other hand, for R = 1.1, when the mist droplet fraction in the flow is the highest, Si particles are preferentially concentrated at the center of the jet, increasing the amount of particles dispersed to distant locations. This occurs because the interaction between the particles and the droplets causes the particles to be dragged towards the center of the jet, so they disperse very little outside the CVP. The PTFE particles were not affected by the mist droplets even at low R flow.Abstract i Contents v List of Tables viii List of Figures ix Nomenclature xvii Chapter 1. Introduction 1.1 Solid particle preferential concentration in vortical structures 1 1.2 Flow characteristics in a jet with crossflow 3 1.3 Particle concentration influenced by mist droplets 5 1.4 Main purposes 6 2. Experimental setup and procedure 2.1 Flow facility for an upward jet with a partial crossflow 10 2.2 Airflow moisture control in the wind tunnel 12 2.3 Solid particle characteristics 13 2.3.1 For particle inertia comparison 13 2.3.2 For particle surface condition comparison 16 2.4 Measurement techniques 17 2.4.1 Particle-image velocimetry (PIV) 17 2.4.2 Planar nephelometry (PN) 20 3. The particle dispersion mechanism by various St 3.1 Airflow structures 32 3.2 Particle dispersion patterns 42 3.2.1 Particle concentration decay away from the jet exit 42 3.2.2 Dispersion regime classification based on St and R 49 3.2.3 Empirical models of particle dispersion 51 3.3 Force analysis for understanding the particle dispersion mechanism 53 3.3.1 Scale analysis of force components on the particles 53 3.3.2 Dominant force terms depending on St and R 56 3.3.3 Summary of particle dispersion patterns 60 4. The particle dispersion changed by mist droplets 4.1 Variation of crossflow characteristics by droplet number 89 4.2 Airflow characteristics change by Φ ̅_b 91 4.2.1 Airflow structure 91 4.2.2 Airflow entrainment into the jet 93 4.3 Particle dispersion patterns 95 4.3.1 Particle concentration maxima line 95 4.3.2 Particle concentration variation by Φ ̅_b 97 4.4 Force analysis for understanding the particle dispersion mechanism 99 4.4.1 Drag force for particle dispersion 99 4.4.2 Increased particle body force by contact with droplets 100 4.4.3 An experimental observation of contact between particles and mist droplets 102 4.4.4 Summary of particle dispersion patterns by contact with droplets 103 5. Concluding remarks 125 Bibliography 129 Abstract in Korean 140박

서울시 시민아파트 부지의 공원녹지화 요인과 효과에 관한 연구

학위논문 (석사)-- 서울대학교 환경대학원 : 환경조경학과, 2014. 2. 이유미.본 논문은 동일한 토지가 공동주택인 아파트에서 사회 기반 시설인 공원녹지로 용도가 바뀐 현상에 주목하였다. 연구의 목적은 이러한 토지 이용의 변화가 일어난 요인과 이로 인해 발생한 효과를 밝히는 데 있다. 연구의 대상은 1960년대 후반에서 1970년대 초반 서울시에 건설된 시민아파트다. 현재 서울시에 지어진 시민아파트 건물은 99% 이상이 철거되었다. 시민아파트 건립 당시 32개였던 지구 중 철거 후 절반에 해당하는 지구의 전체 혹은 일부가 공원녹지로 바뀌었다. 본 연구는 크게 3개의 장으로 구성된다. 우선, 시민아파트의 건설에서 부지정리까지의 과정을 살펴보고, 현재 전체 32개 지구의 이용 현황을 조사하였다. 1960년대 이후 급격한 도시화로 인한 주택공급량의 부족으로 서울 시내 구릉지와 천변 등의 방치된 공공용지를 중심으로 불법·불량주거지가 형성되었다. 시민아파트는 이러한 상황을 개선하기 위해 공공의 주도로 건설된 아파트다. 그러나, 1970년 서강지구 와우아파트의 붕괴사고로 시민아파트 건설 계획은 전면 폐기되었다. 곧이어 건물의 안전에 문제가 있음이 밝혀진 뒤 구조물 안전진단 결과에 따른 각각의 건물 별로 철거가 진행되었다. 이후 1997년에 이르러 당시까지 남아 있던 건물 전체에 대한 종합적인 정리계획을 세워 향후 이용방향을 제시하였다. 그 결과, 1997년의 종합 계획 이전에 이미 공원녹지로 바뀐 부지를 포함하여 총 15개 지구의 전체 혹은 일부가 공원녹지로 용도 전환되었다. 둘째, 공동주택인 시민아파트가 사회기반시설인 공원녹지로 변화된 요인을 살펴보았다. 아파트가 공원녹지로 바뀐 주요 요인은 부지의 토지특성, 서울시 도시계획 및 공원녹지 관련 정책의 변화, 주택관련 규제의 강화에 있다. 시민아파트 부지는 표고 40미터 이상의 구릉지에 위치한 소규모 공공용지가 주를 이룬다. 이들 부지는 새로운 공동주택 건설을 위해 시민아파트가 건설된 시기에는 없었던 신설된 법적 규제를 충족하기 어려운 조건이었다. 따라서 개별 부지에 대한 자발적 개발은 지연되었고, 그 사이 안전진단 결과에 따라 철거가 결정된 시민아파트 건물은 공공에 의해 수용되었다. 또한, 이러한 변화의 시간동안 시민아파트 부지에 대한 활용은 아파트 개발을 중심에 둔 시각에서 벗어나 사회적 요구와 필요에 대응할 수 있는 공공부지로 새롭게 인식되었다. 이것은 기존 주택지 내에 공원녹지, 주차장, 어린이집 등 각종 기반시설 조성의 필요성과 요구가 증가한 상황과 맞물린다. 결과적으로 부지의 대부분이 도시 내 산림녹지를 배후에 두고 있다는 특성을 살려 시민아파트 철거 후 다수의 부지에 대한 공원녹지화가 이루어졌다. 마지막으로, 이렇게 공원녹지로 용도가 변화하면서 얻을 수 있는 효과는 다음의 네 가지로 정리된다. 첫째, 노후건축물 철거로 인한 경관개선 효과다. 시민아파트 건물은 대지조성방식, 접지방식, 건축물의 형태 등이 구릉지 경관 관리 정책의 평가 지침 상 가장 지양해야 할 모습을 띄고 있었다. 이러한 건축물을 철거함으로써 경관 훼손 요인이 제거되었다. 이후 공원녹지로 이용되면서 부지 내 건축물은 엄격한 높이 규제가 적용된다. 이로 인해 구릉지의 건전한 경관 형성에 저해되는 거대 건축물의 건립이 원칙적으로 불가능해졌다. 둘째, 공원 확충을 통해 주택밀집지역의 주거환경을 개선하였다. 시민아파트 주변은 기반시설의 정비를 필요로 하는 주택밀집지역이 대부분이다. 기반 시설 중 공원은 공간 시설로 분류되어, 주거환경 개선을 위해 우선 정비되어야 하는 대상이다. 시민아파트 부지는 도시 내 산림의 최외곽 경계부에 위치하여 상대적으로 접근이 용이하였다. 또한 아파트를 건설할 때 이미 부지의 평탄화를 마쳤으며, 접근로를 확보한 상태였다. 이를 활용하여 조성비용을 절약하면서 공원 등의 기반 시설 조성이 필요했던 지역에 도보권 이하 소규모 공원을 조성할 수 있었다. 셋째, 도시지역 내 산림의 적절한 이용을 도모하였다. 공원녹지화 부지 대부분은 서울의 주요산과 그 지맥의 경계 부분에 위치한다. 이러한 영역은 도시 산림의 이용자에게 도시공원으로써 여가·휴식·운동 공간을 제공한다. 동시에 방문이 빈번한 시설을 경계공간에 배치함으로써 내밀한 숲의 안쪽 생태환경을 지키는 역할을 동시에 수행한다. 넷째, 변화하는 도시계획에 유동적으로 대응할 수 있는 공공용지를 확보할 수 있었다. 현재 공원녹지로 전환된 필지 중 일부는 법적으로 공원녹지 지정없이 일반주거지역만 설정되어 있는 상태다. 구청은 아파트 철거 후 발생한 공공용지를 빈 땅으로 방치할 수 없었기 때문에 일단 시설물의 설치가 적은 주차장이나 공원녹지로 이용하기 시작하였다. 이때, 공원녹지화는 일시적인 용도로, 이러한 토지는 개발 유보지로 향후 도시계획 및 정책의 변화에 따라 필요한 기반시설을 추가로 조성할 수 있는 가능성의 부지다. 그리고, 공원 부지에는 법적으로 지역사회에 필요한 대부분의 기반 시설의 설치가 가능하다. 따라서 공원녹지화는 미래의 도시계획 및 사회적 변화에 융통성 있게 대응할 수 있는 선택이다. 본 연구는 1960년대 후반에는 공동주택을 건립하게 이끌었던 토지의 특성이 사회가 변화하고 시간이 흘러 시민아파트가 철거되는 시기에서는 오히려 공원녹지화를 이끌었다는 관점을 가지고 진행되었다. 더불어, 토지특성 외에 변화하는 인식과 제도가 아파트 부지가 공원녹지로 바뀌는데 영향을 미쳤다고 보았다. 동일한 토지 위에 더 이상 공동주택을 건설하기 어렵게 하는 주택 건설 규제와 제도의 발전에 공원녹지의 필요성에 대한 인식과 요구가 더해져 시민아파트가 철거되어 발생한 부지의 공원녹지화를 이끌었다. 1970년대 초반까지 서울 뿐 아니라 부산, 대구를 비롯해서 전주, 춘천 등 전국에 같은 목적을 가진 공공주택이 건설되었다. 현재 이러한 아파트는 건설 후 40년 이상이 흘러 해당 도시 내 대표적인 노후 건축물이 되었다. 이들 중 일부는 이미 철거되었거나, 현재 철거 후 부지 활용에 대해 검토 단계일 것으로 예상된다. 하지만 서울을 제외한 지역에서는 현황조차 파악되지 않았다. 노후공공아파트 부지는 기존 시가지 내에 위치하여, 변화하는 도시계획의 실행을 위해 유효하게 활용할 수 있는 공공부지다. 이러한 가치를 충분히 발휘할 수 있게 정확한 실태 파악과 종합적인 이용계획을 수립함에 있어 본 연구가 시발점이 되고자 한다.제1장 서론 제1절 연구의 배경 및 목적 제2절 연구의 범위 및 방법 1. 연구의 범위 2. 연구의 방법 제3절 선행연구 및 연구의 차별성 1. 용어의 정의 2. 선행연구 3. 연구의 차별성 제2장 시민아파트 부지 발생과 이용 제1절 시민아파트의 건립 1. 시민아파트 건립 요인 2. 시민아파트 건립 3. 시민아파트 건립의 의미와 한계 제2절 시민아파트 철거 및 지구의 정리 1. 시민아파트의 철거 2. 시민아파트 지구의 정리 제3절 시민아파트 부지 이용 현황 제3장 시민아파트 부지의 공원녹지화 요인 제1절 시민아파트 부지의 토지특성 1. 지형적 특성 2. 법제적 특성 3. 지리적 특성 제2절 법제 및 정책 변화 : 1960년대 후반-2000년대 중반 1. 도시계획 및 공원녹지 정책 2. 주택관련 정책 제3절 소결 제4장 시민아파트 부지의 공원녹지화 효과 제1절 공원녹지 확충을 통한 주거환경 개선 제2절 구릉지 경관 복원 제3절 도심 산림녹지의 이용 증대 제4절 도시계획 실행을 위한 공공용지 확보 제5장 결론 부록Maste

줄기세포와 그래핀의 융합을 통한 심근경색의 치료

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 화학생물공학부, 2015. 8. 김병수.Myocardial infarction (MI) is one of the major causes of death worldwide. However, the clinical therapies to treat MI is very limited, and the number of patients increases every year. Therefore, there is an urgent need to develop alternative therapeutic methods for cardiac repair after MI. Recently, stem cell and tissue engineering emerged as a potential strategy for MI treatment. In addition, graphene has also drawn much attention for their application in the field of biomedical engineering due to its unique electrical, chemical, optical, and physical properties. Therefore, in this dissertation presents the integration of stem cells and graphene for the treatment of MI. The major goals of this study is summarized as follows. 1) Development of a graphene platform to promote stem cell differentiation towards cardiac lineage, and the investigation of its mechanisms. 2) Improvement of stem cell therapy efficacy for MI treatment by utilizing reduced graphene oxide (RGO) to promote paracrine factor secretion and gap junction protein expression by stem cells. 3) Utilizing graphene oxide (GO) flakes to prevent stem cell anoikis when implanted to ischemia and reperfusion injury after MI. First, we showed that graphene can promote cardiomyogenic differentiation process of mesenchymal stem cells (MSCs). MSCs have drawn much attention as a source of MI therapy because MSCs are easy to isolate and expand, and are capable of differentiating into various cell types. However, the conventional methods to differentiate stem cells to cardiomyocytes require expensive growth factors or toxic chemical inducers. In this study, we demonstrated that the cardiomyogenic differentiation process of MSCs could be promoted simply by culturing MSCs on graphene without using additional inducers for the differentiation. This may be attributed to the enhanced expression of extracellular matrix (ECM) proteins related to cardiomyogenic differentiation. In addition, the signaling molecules required for cardiomyogenic differentiation are upregulated in MSCs cultured on graphene. Collectively, graphene was able to promote cardiomyogenic gene expressions in MSCs. Second, we showed that the incorporation of RGO flakes into MSC spheroids enhanced the expression of angiogenic growth factors and gap junction proteins in MSCs, and resulted in the attenuation of cardiac remodeling after MI. The secretion of paracrine factors and the formation of gap junctions by the implanted cells promote cardiac repair. The formation of spheroids by MSC clustering is known to promote growth factor secretion by promoting cell-cell interactions. However, cell-ECM interactions, which can further promote growth factor secretion, is very limited in MSC spheroids. Therefore, in this study, we incorporated RGO, which can adsorb ECM proteins, in MSC spheroids to promote cell-ECM interactions. As a result, the secretion of paracrine factors was further enhanced in MSC-RGO hybrid spheroids. The enhanced secretion of paracrine factors by the incorporation of RGO upregulated the gap junction protein expression in MSCs. The implantation of MSC-RGO spheroids promoted cardiac repair compared to the implantation of MSC spheroids. Finally, the adhesion of GO flakes to MSCs prior to implantation enhanced the therapeutic efficacy of MSCs in MI. The restoration of blood flow after MI results in a burst of reactive oxygen species (ROS). ROS hinders the adhesion of the implanted MSCs to the injured myocardium, resulting in cell anoikis (i.e. cell death due to the loss of adhesion). Therefore, we have protected MSCs from undergoing anoikis by adhering GO flakes to MSCs prior to their implantation to the injured myocardium. GO is capable of effectively adsorbing ECM proteins. ECM protein-adsorbed GO flakes protected MSCs from undergoing anoikis when MSCs-GO were exposed to ROS condition in vitro. In vivo, MSCs-GO showed enhanced engraftment in the reperfused myocardium after MI compared to MSCs alone. The enhanced engraftment of MSCs-GO resulted in enhanced paracrine factor secretion. Therefore, the adhesion of GO flakes to MSCs promoted cardiac tissue repair and cardiac function restoration.Abstract I Table of contents IV List of figures VIII List of tables XI Abbreviations XII Chapter 1. Research backgrounds and objectives 1 1.1. Myocardial infarction (MI) 2 1.2. MSCs for MI treatment 4 1.2.1. Differentiation of MSCs into cardiac lineage 7 1.2.2. Paracrine factor secretion of MSCs for cardiac repair 9 1.3. Nanobiomaterial-incorporated stem cell therapy for cardiac repair 11 1.3.1. Therapeutic molecule delivery system 13 1.3.2. Cell delivery vehicle 16 1.3.3. Nanotopographical cues of nanobiomaterials 19 1.3.4. Electrically conductive nanobiomaterials 22 1.3.5. Intrinsic chemistry of nanobiomaterials 25 1.4. Limitations of previous stem cell therapies for MI treatment 27 1.5. Graphene for tissue engineering applications 29 1.6. Research objectives of this dissertation 32 Chapter 2. Experimental procedures 33 2.1. Preparation of graphene and graphene derivatives 34 2.1.1. Graphene preparation 34 2.1.2. GO and RGO preparation 35 2.2. Characterization of graphene and graphene derivatives 36 2.3. Cell preparation 37 2.3.1. MSC culture on graphene-coated coverslips 37 2.3.2. MSC-RGO spheroid formation 38 2.3.3. GO adhesion to MSCs 39 2.4. In vitro assays 40 2.4.1. TEM analyses 40 2.4.2. Quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (qRT-PCR). 41 2.4.3. Analyses of cell viability. 43 2.4.4. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) 44 2.4.5. Western blot 45 2.4.6. Immunocytochemistry 46 2.4.7. Dye transfer 47 2.4.8. Analyses of GO adhesion on MSCs 48 2.4.9. Assays for cell adhesion and viability with or without GO under reactive oxygen species (ROS) condition 49 2.4.10. Detection of ROS 50 2.4.11. Adhesion of fibronectin (FN)- or vitronectin (VN)- adsorbed GO flakes to MSCs 51 2.4.12. Competition between free ECM proteins and ECM proteins adsorbed on GO for their interactions with MSCs 52 2.5. Experimental procedures in vivo 53 2.5.1. MI induction and MSC-RGO spheroid implantation 53 2.5.2. Induction of MI and MSC-GO implantation 54 2.5.3. Analyses of surviving MSCs 55 2.5.4. Histochemical and immunohistochemical staining. 56 2.5.5. Evaluation of cardiac function 58 2.6. Statistical analyses 59 Chapter 3. Graphene-regulated cardiomyogenic differentiation process of mesenchymal stem cells by enhancing the expression of extracellular matrix proteins and cell signialing molecules 60 3.1. Introduction 61 3.2. Results and discussion 63 3.2.1. Fabrication of graphene 63 3.2.2. Characterization of graphene 65 3.2.3. Biocompatibility of graphene 68 3.2.4. Cardiomyogenic lineage commitment of MSCs cultured on graphene 70 3.2.5. Enhanced ECM gene expression by graphene 73 3.2.6. Regulation of cell signaling pathway by graphene 76 Chapter 4. Graphene potentiates the myocardial repair efficacy of mesenchymal stem cells by stimulating the expression of angiogenic growth factors and gap junction protein 78 4.1. Introduction 79 4.2. Results and discussion 82 4.2.1. Characterization of RGO flakes 82 4.2.2. Formation of MSC-RGO hybrid spheroids 84 4.2.3. Enhanced cell-ECM interactions by RGO incorporation into MSC spheroids 89 4.2.4. Enhanced angiogenic growth factor expression in MSC-RGO spheroids 91 4.2.5. Enhanced Cx43 expression in MSC-RGO spheroids 95 4.2.6. Improved cardiac repair by MSC-RGO hybrid spheroid implantation 98 4.2.7. Improvement in cardiac function by MSC-RGO hybrid spheroid implantation 101 Chapter 5. Graphene oxide flakes as a cellular adhesive: prevention of reactive oxygen species-mediated death of implanted cells for cardiac repair 102 5.1. Introduction 103 5.2. Results and discussion 106 5.2.1. Characterization of GO flakes 106 5.2.2. GO adhesion on MSCs 108 5.2.3. Enhanced cell adhesion and survival under ROS condition in vitro 111 5.2.4. The mechanism of enhanced cell survival 114 5.2.5. Enhanced survival of MSCs implanted in a myocardial ischemia and reperfusion model 121 5.2.6. Improvement in myocardial repair by MSC-GO 124 Chapter 6. Conclusions 132 References 135 요약 (국문초록) 173Docto

변화하는 업무 패러다임을 중심으로

학위논문(석사) -- 서울대학교대학원 : 환경대학원 환경계획학과, 2022. 8. 정현주.The desire for self-actualization due to an unstable employment environment and low job satisfaction is emerging as a social problem with various anxiety among the young generation. At the same time, having a ‘lifetime job’ rather than a ‘lifetime job’ is considered a new goal, and many people are inducing them to start a business. Despite many aspirations for entrepreneurship, the economic instability of young solo workers is deepening along with urban spatial limitations that cannot support them. Against this background, they voluntarily gather in a space where they can share work space and practice coworking. They pursue an independent future more than anyone else, but they are trying to settle down by forming weak ties. In this study, we try to focus on the social meaning of co-working and alternative workspaces that young solo workers are experiencing while working together despite the anxiety they are experiencing. Although the number of startups among young people has increased rapidly in line with the changes of the times, only the positive aspects have been mainly focused on through the media. The purpose of this study is to provide implications that can be used in various policies by capturing changes in the way young solo workers work together and the creation of alternative workspaces so that the startups of young solo workers can contribute to creating other jobs. Through this study, it was possible to know the various social meanings of the formation of coworking and loose solidarity among young solo workers. Young solo workers formed loose solidarity without boundaries and practiced co-working. The members were always changing their world itself according to the present. Because it does not have an identity, it can embrace any user, and since it does not assume the same purpose, it can be said to be a community that can truly communicate. In addition, the diverse cultures and networking experiences created by operators, beyond simple space sharing, strengthen the position of uneasy solo workers and greatly contribute to business prosperity. However, the economic instability of early young solo workers makes it difficult to even pay the moving-in fee, which makes it difficult to move to a lower work environment or to decide to re-employ. Therefore, government policies and support to support stable start-up activities are urgently needed. In addition, depending on the size of the company, cracks form in the horizontal community, and it has the character of a temporary work space that naturally becomes a place to leave. In a community that was formed horizontally, as solo workers were hired, cracks began to appear, and they felt the limitations of the current space and thought about moving the work space. Lastly, the co-working space market, which has been in the public domain for just over 5 years, is facing a crisis due to the non-face-to-face communication environment that has grown along with the corona era. It is expected that the digital work environment in which even the physical work space has become unnecessary will result in the disappearance of a new type of work community or community. Reflecting the above social meaning, an alternative work space for young solo workers should be located in an area with a high proportion of young people in order to ensure a stable work environment, and should be provided at a low cost. In addition, for young solo workers who will rapidly change the size and nature of the organization, the method of moving in and occupying the work space should be flexible. Next, it is necessary to provide a work space without hierarchies that breaks down the discrimination or distinction that space gives, and to plan an indoor space where small group groups are possible. Lastly, it is important to induce young solo workers to have social and mental support through culture and social programs within the alternative work space that fosters networking.불안한 고용환경과 낮은 업무만족도로 인한 자아실현의 욕구는 청년세대에게 다양한 불안을 안기며 사회적 문제로 대두되고 있다. 동시에 ‘평생직장’보다 ‘평생직업’을 가지는 것이 새로운 목표로 여겨지며 많은 이들을 창업으로 유도하고 있다. 창업을 향한 여러 열망에도 불구하고 청년 솔로워커의 경제적 불안정성은 그들을 뒷받침하지 못하는 도시공간적 한계와 더불어 심화하고 있다. 이러한 배경에서 그들은 자발적으로 업무공간을 공유할 수 있는 공간에 모여 코워킹을 실천하고 있다. 그들은 누구보다 독립적인 미래를 추구하지만, 느슨한 연대(weak ties)를 형성하며 정착을 시도하고 있었다. 본 연구에서는 청년 솔로워커들이 겪고 있는 불안 속에서도 그들이 함께 일하며 형성하는 코워킹의 사회적 의미와 대안적 업무공간에 주목하려 한다. 시대의 변화에 발맞춰 청년세대들의 창업이 급격하게 증가하였지만, 언론을 통해 주로 긍정적인 측면만 주목받아왔다. 이에 청년 솔로워커의 창업이 또 다른 일자리 창출에 이바지할 수 있도록 업무 패러다임의 변화와 대안적 업무공간의 조성 방식을 포착하여 다양한 정책에 활용될 수 있는 시사점을 제공하는 것이 이 연구의 목적이다. 본 연구를 통해 청년 솔로워커들의 코워킹 형성과 느슨한 연대의 다양한 사회적 의미를 알 수 있었다. 청년 솔로워커들은 경계 없는 느슨한 연대를 형성하며 코워킹을 실천하고 있었다. 구성원들은 늘 현재에 맞춰 자신들의 세계 자체를 변화시키고 있었다. 정체성을 갖고 있지 않기에 어떤 사용자도 포용할 수 있고 동일한 목적을 상정하지 않았기에 진정한 소통이 가능한 공동체라 할 수 있을 것이다. 또한, 단순한 공간 공유를 떠나 운영자들이 만드는 다양한 문화와 네트워킹 경험은 불안한 솔로워커의 입지를 단단하게 하며 사업 번창에 큰 도움이 된다. 하지만 초기 청년 솔로워커의 경제적 불안정성은 입주비용의 지불마저 어렵게 하고, 이는 더 낮은 업무 환경으로의 이동 혹은 재취업을 결정하게 한다. 이에 안정적인 창업 활동을 뒷받침하기 위한 정부의 정책과 지원이 절실한 상황이다. 또한, 기업의 규모에 따라 수평적 공동체에 균열이 생기며 자연스럽게 떠나야 할 곳이 되는 임시 업무공간으로서의 성격을 가진다. 수평적으로 형성되었던 공동체는 솔로워커에게 고용이 발생하며 균열이 생기기 시작하고 현재 공간에서의 한계를 느끼며 업무공간의 이동을 고민하게 된다. 마지막으로 보편화한 지 5년 남짓에 불과한 코워킹 스페이스 시장은 코로나 시대와 함께 성장한 비대면 소통환경으로 인해 위기에 직면했다. 물리적 업무공간마저 불필요해진 디지털 업무환경은 새로운 형태의 업무공동체 혹은 공동체의 소멸을 낳을 것으로 예상한다. 위의 사회적 의미를 반영하여 청년 솔로워커를 위한 대안적 업무공간은 안정적인 업무환경을 보장하기 위해 청년세대의 거주비율이 높은 지역에 위치해야 하며 저렴한 비용으로 제공되어야 한다. 또한, 조직의 규모와 성질이 빠르게 변화할 청년 솔로워커를 위해 업무공간의 입주방식과 공간점유 방식이 유연해야 한다. 다음으로 공간이 주는 차별 혹은 구별을 타파한 위계 없는 업무공간을 제공하고 소규모 그룹핑이 가능한 실내공간을 계획해야 한다. 마지막으로 네트워킹을 조성하는 대안업무공간 내의 문화와 소셜프로그램을 통해 청년 솔로워커들이 사회적·정신적 지지대를 갖추도록 유도하는 것이 중요하다.제1장 서론 01 제1절 연구의 배경 01 제2절 연구의 질문 및 목적 02 제2장 이론적 고찰 04 제1절 변화하는 직장개념과 청년 솔로워커의 등장 04 1. 평생직장 개념의 변화 04 2. 4차 산업혁명과 직업의 미래 07 3. 청년 솔로워커의 출현 11 제2절 업무공간의 변화 양상 12 1. 조직유형에 따른 업무공간의 변천 12 2. 업무형태에 따른 업무공간의 혁신 16 1) 디지털 기술사회와 포스트 코로나 시대의 도래 16 2) 긱경제 시대의 디지털 노마드를 담는 코워킹 스페이스 17 제3절 대안적 업무공간의 등장 18 1. 대안적 업무공간의 목적 18 2. 대안적 업무공간의 다양한 양상 19 제4절 선행연구 검토 21 1. 관련 선행연구 검토 21 2. 연구의 차별성 22 제3장 연구의 대상 및 방법 24 제1절 연구의 대상 24 제2절 연구의 방법 27 제4장 업무공간 불안계급의 공간전략 30 제1절 청년 솔로워킹의 시작 30 제2절 기존 업무공간에서의 청년 솔로워커의 불안정성 34 1. 재택근무 36 2. 코피스족 39 3. 근린상가 및 오피스텔 40 제3절 대안업무공간으로의 재귀속 실천 41 1. 느슨한 연대(weak ties)를 향한 갈망 41 2. 재귀속의 양상 43 1) 정부주도 1인창조기업비즈니스센터 44 2) 위워크(wework) 46 3) 트라이그라운드(tryground) 47 제5장 코워킹 공동체로서의 대안업무공간 경험 49 제1절 대안업무공간의 시작 49 1. 청년 거주비율이 높은 지역과 대안업무공간의 입지 49 2. 청년 솔로워커를 우선하는 입주자 확보의 원칙 51 제2절 대안업무공간에서의 즐거움 53 1. 개선된 업무공간과 비용절감의 혜택 53 2. 공간이 만드는 느슨한 연대(weak ties) 56 3. 직주근접으로 구현된 솔로워킹의 출발점 59 4. 암묵지의 교류를 통한 다양한 코워킹의 형태 62 제3절 대안업무공간의 한계 65 1. 회사의 규모에 따라 벗어나야 할 임시적 업무공간 65 2. 새로운 업무방식과 맞지 않는 공간과의 타협 67 3. 입주자간 친화도에 따른 폐쇄성 및 관계의 종료 69 4. 청년 솔로워커들의 불안정성이 만드는 운영의 난관 71 제6장 청년 솔로워커의 코워킹 형성을 위한 대안적 업무공간 고찰 75 가. 청년 거주비율이 높은 지역 입지를 통한 직주근접 실현 75 나. 유연한 임대 및 공간점유 방식 75 다. 공간의 위계는 없되 소규모 그룹핑이 가능한 공간구획 76 라. 입주자들의 네트워킹을 조성하는 소셜 프로그램 77 제7장 결론 79 참고문헌 8

Green tea catechins increase cholesterol 7a-hydroxylase mRNA and promoter activity in HepG2 cell

본 실험에서는 녹차의 카테킨에 의하여 cholesterol 7α-hydroxyase (CYP7A1) 유전자의 전사가 조절되는 기전을 규명하기 위하여 human hepatocarcinoma cell line인 HepG2 cell을 이용해서 녹차 카테킨 처리 후 human CYP7A1 유전자 발현 및 promoter의 활성을 측정하였다. HepG2 cell에 카테킨 종류별로 5μM 농도로 처리한 후 40시간 배양하여 총 RNA를 추출하여 CYP7A1의 mRNA 발현율을 Real time PCR을 이용해서 측정한 결과 대조군에 비해서 ECG (5배) &amp;gt; EGCG (4배) &amp;gt; EGC (3배) &amp;gt; EC (2배) 순으로 발현이 증가되었다. EGCG를 0, 0.1, 1, 5, 10, 20μM 농도별로 처리한 결과 EGCG 5, 10μM에서 발현율이 약 4배가 증가하였다. CYP7A1 promoter를 HepG2 cell의 genomic DNA를 주형으로 하여 PCR로 증폭시킨 후 PGL3-basic vector에 재조합 하였다. 재조합된 DNA를 HepG2 cell에 transfection 시킨 후 catechin의 종류별로 처리하여 40시간 배양시킨 후 promoter 활성을 측정한 결과 대조군에 비해 ECG (6배) &amp;gt; EGCG (4배) &amp;gt; EGC (3배) &amp;gt; EC (2배) 순으로 promoter 활성을 증가시키는 것으로 나타났다. EGCG를 0, 0.1, 1, 5, 10, 20μM 농도별로 처리한 결과EGCG 5~10μM 처리군에서 promoter 활성이 약 4~5배 증가하였다. Promoter의 활성과 mRNA 발현이 비슷한 정도로 증가함을 나타내 CYP7A1은 녹차의 카테킨에 의해서 전사가 조절되며 이는 promoter 활성에 영향을 주기 때문으로 추측된다. -1312 bp, -311 bp, -92 bp CYP7A1 promoter를 제작하여 deletion study를 실시해 본 결과 -1312 CYP7A1 promoter만이 유일하게 EGCG에 의한 활성의 증가를 보여 EGCG에 의해서 전사 조절의 영향을 받는 위치는 -1312 bp와 -311 bp 사이에 위치하는 것으로 사료된다. -311 bp CYP7A1 promoter의 활성은 -1312 CYP7A1 promoter에 비하여 3~4배 높게 나타났는데 이것은 -311 bp의 upstream에 repressor sequence가 존재하고 downstream에는 activator sequence가 존재하기 때문으로 사료된다. 결론적으로 본 연구를 통해서 EGCG는 CYP7A1 promoter의 -1312 bp 와 -311 bp 사이에 작용하며 CYP7A1의 mRNA의 발현율을 증가시켜줌으로써 콜레스테롤 강하효과를 보여주는 것으로 사료된다.;In the present study, to find molecular mechanism of CYP7A1 by catechins of green tea, we investigated the effect of catechins on the CYP7A1 mRNA level and promoter activity. For this purpose we used human hepatocellular blastoma cells called HepG2 in vitro system. After EGCG, EGC, ECG or EC treatment of 5μM concentration in HepG2 cells were incubated for 40 hr, total RNA was extracted. mRNA expression of CYP7A1 was estimated by using Real time PCR. The result of EGCG, EGC, ECG or EC treatment was shown in the order ECG (5-folds) &amp;gt; EGCG (4-folds) &amp;gt; EGC (3-folds) &amp;gt; EC (2-folds) compared to control. HepG2 cells were treated with EGCG of 0, 0.1, 1, 5, 10, 20 μM concentration. 5, 10 μM EGCG treatment increased the mRNA expression superlatively by approximately 4-fold compared to untreated with EGCG. The human CYP7A1 promoter was made by polymerase chain reaction(PCR) using genomic DNA isolated from HepG2 cells as a template. The human CYP7A1 promoter was recombinated with pGL3-basic vector. To analysis promoter activity, HepG2 cells were treated with EGCG, EGC, ECG or EC of 5μM concentration for 40 hr after transfected with the recombinated DNA. The data were shown in the order ECG (6-folds) &amp;gt; EGCG (4-folds) &amp;gt; EGC (3-folds) &amp;gt; EC (2-folds) compared to control. HepG2 cells were treated with EGCG of 0, 0.1, 1, 5, 10, 20 μM concentration. 5, 10 μM EGCG treatment increased promoter activity superlatively by approximately 4, 5-folds compared to untreated with EGCG. The activity of promoter was elevated by EGCG treatment similarly with mRNA. From these results, it can be guessed that the regulation of CYP7A1 gene expression involved the regulation of promoter activity. In order to define the promoter region which mediated the hypocholesterolemic effect by EGCG, the CYP7A1 promoter (-1312 bp, -311 bp, -92 bp) was recombinated with reporter gene. HepG2 cell transfected with CYP7A1 promoter was treated 5μM concentration of EGCG. The effect of EGCG on the activity of -1312 bp CYP7A1 promoter was significant but -311 bp, -92 bp CYP7A1 promoters were not affected by EGCG treatment. Therefore it can be postulated that the promoter region involved in the EGCG action may be located between -1312 bp and -311 bp of the CYP7A1 promoter. As compared to -1312 CYP7A1 promoter, regardless of EGCG treatment, the activity of -311 bp CYP7A1 promoter was increased by approximately 3~4 fold. It can be thought that the repressor region may be located upstream of -311 bp and activator region downstream of -311bp. In conculusion, EGCG may stimulate CYP7A1 promoter between -1312 bp and -311 bp and induce up-regulation of CYP7A1 mRNA. Through this mechanism, EGCG may have hypocholesterolemic effect finally.CONTENTS Ⅰ. INTRODUCTION = 1 Ⅱ. MATERIALS AND METHODS = 7 A. Materials = 7 B. HepG2 cell culture = 8 C. CYP7A1 mRNA = 8 D. Subcloning = 10 E. Transient transfection and luciferase activity assay = 12 F. Statistical analysis = 14 Ⅲ. RESULTS = 15 A. Effect of different kind of catechins on the CYP7A1 mRNA = 15 B. Effect of different kind of catechins on the CYP7A1 promoter activity = 15 C. Effect of EGCG on the CYP7A1 mRNA = 16 D. Effect of EGCG on the CYP7A1 promoter activity = 17 E. The regulatory region of CYP7A1 promoter involved in the EGCG effect = 18 Ⅳ. DISCUSSION = 19 Ⅴ. REFERENCES = 28 Ⅵ. ABSTRACT = 36 Ⅶ. 국문초록 = 3

Legibility Difference Depending on Age by Font Type and Color in Display Interface

본 연구는 사용자가 디스플레이 인터페이스에서 글자를 읽어 정보를 얻는데 가독성이 좋은 환경을 제공하는데 목적이 있다. 이 연구를 통해 연령별, 다른 디스플레이 환경, 폰트종류, 배경색, 글자색의 차이에 의한 글자의 가독성 평가를 통해 디자이너가 사용자에게 적합한 디스플레이 인터페이스를 고려할 때, 연구의 결과가 기초 자료로서 도움이 되도록 하고자 한다. 이에 본 연구는 디스플레이 인터페이스에서 폰트종류, 글자색, 배경색이 가독성에 영향을 미치는 요인임을 확인하고, 연령과 디스플레이 종류가 가독성 평가에 어떠한 영향을 미치는지 알아보고자 하였다. 모니터 실험환경에서 폰트종류는 가장 기본적으로 사용되는‘고딕’, ‘굴림’, ‘명조’로 설정하였고, 모바일 실험환경에서는 기본적으로 사용되는 폰트 종류 3가지와 폰트‘한강’을 추가하여 실험을 진행하였다. 실험은 배경색과 글자색의 명도단계를 세분화한 무채색화면과 고명도, 중명도, 저명도의 Red-Green화면을 샘플로 제작하였다. 실험군은 20-30대의 성인군과 55세이상의 노령군으로 나누어 진행하였다. 실험 결과의 분석은 노령군과 성인군의 연령별 가독성 평가를 비교하고, 디스플레이 환경별 가독성 평가를 비교 분석하였다. 가독성 평가를 비교분석한 결과에서 무채색화면과 Red-Green화면의 폰트종류, 글자색, 배경색이 가독성 평가에 영향을 미치는 요인임을 확인하였다. 연령별 차이가 유효한 조건들을 분석해보면, 모바일에서 무채색 화면을 가독할 때 성인군이 노령군보다 대체적으로 가독성 평가가 높았다. 이와 반대로 노령군은 모니터에서 가독할 때 가독성 평가가 성인군보다 높게 나타났다. 실험 환경별 가독성 평가를 비교분석한 결과 노령군의 경우 무채색화면과 Red-Green화면을 모니터에서 볼 때 가독성이 높게 나타났다. 이 결과 디스플레이 종류에 따른 디스플레이 크기와 해상도에 의한 차이보다는 모바일보다 모니터에서 휘도가 크기 때문에 노령군의 가독성 평가가 더 좋게 나타난 것으로 예상된다. 성인군의 경우 실험 환경별 비교 분석에서 가독성 평가 차이가 유효한 조건들의 수가 노령군보다 적게 나타났다. 무채색화면과 Red-Green화면에서 전반적으로 배경색과 글자색의 휘도대비차가 클 때 노령군과 성인군 모두 가독성 평가가 높게 나타났음을 알 수 있었다.;The purpose of this study is to provide users with the environment with great legibility to get information by reading letters in display interface. This study aimed to provide useful basic data when designers consider the display interface suitable for users through the legibility evaluation of letters based on differences in display environment, font type, background color, and letter color depending on age. Thus, this study aimed to verify that font type, letter color, and background color would be the factors having effects on legibility in display interface, and also to understand the effects of age and display type on the legibility evaluation. In the monitor experimental environment, ‘Gothic’, ‘Gulim’, and‘Myungjo’was most basically used were set up as font type. In the mobile experimental environment, on top of the basic three font types, the font‘Hangang’was added. As samples, it produced the achromatic-color screen with subdivided lightness stage of background color and letter color, and also the Red-Green screen with high/middle/low lightness. The experimental group was divided into an adult group in the 20s-30s and an elderly group for more than 55 years. Comparing the legibility evaluation between the elderly group and adult group, the legibility evaluation for each display environment was comparatively analyzed. In the results of comparatively analyzing the legibility evaluation, it was verified that the font type, letter color, and background color were the factors having effects on the legibility evaluation in the achromatic-color screen and Red-Green screen. Analyzing conditions with valid differences in each age, when reading the mobile achromatic-color screen, the adult group mostly showed higher legibility evaluation than the elderly group. On the contrary, when reading the monitor, the elderly group showed higher legibility evaluation than the adult group. In the results of comparatively analyzing the legibility evaluation in each experimental environment, the elderly group showed high legibility when viewing the achromatic-color screen and Red-Green screen through monitor. As the luminance of monitor is higher than the one of mobile rather than differences caused by display size and resolution in accordance with display type, the legibility evaluation of the elderly group might be shown better. In case of the adult group, in the comparative analysis in each experimental environment, the number of conditions with valid differences in the legibility evaluation was lower than the elderly group. When the luminance contrast difference of background color and letter color was big in the achromatic-color screen and Red-Green screen, both elderly group and adult group showed the high legibility evaluation.Ⅰ. 서론 1 A. 연구의 배경 및 목적 1 B. 연구의 범위 및 방법 2 Ⅱ. 이론적 배경 4 A. 폰트(Font)와 가독성(Legibility)의 이해 4 1. 폰트(Font)의 개념 4 2. 글자의 가독성(Legibility) 개념 6 B. 성인과 고령자의 시각 변화와 가독성 차이 8 1. 성인기에서 노년기까지의 시각기능 변화 8 2. 성인과 고령자의 시각특성 가독성 차이 11 C. 디스플레이(Display)의 특성에 따른 가독성 관계 13 1. 디스플레이의 크기와 해상도의 가독성 관계 13 2. 디스플레이의 대비비와 가독성의 관계 16 Ⅲ. 무채색 화면에서 글자의 가독성에 영향을 미치는 요인 연구 및 분석 17 A. 연구 설계 및 방법 17 1. 실험대상 17 2. 실험샘플 제작 18 3. 실험 환경 및 방법 19 B. 분석 도구 및 방법 25 C. 무채색 화면에서 글자의 가독성에 영향을 미치는 요인들 분석 26 1. 글자의 가독성 평가에 영향을 미치는 요인들에 대한 분석 26 2. 글자의 가독성 평가에 영향을 미치는 요인에 대한 연령별, 실험 환경별 비교분석 36 D. 무채색 화면에서 글자의 가독성 평가 종합분석 요약 66 Ⅳ. Red-Green 화면에서 글자의 가독성에 영향을 미치는 요인 연구 및 분석 67 A. 연구 설계 및 방법 67 1. 실험샘플 제작 67 2. 실험방법 69 B. Red-Green 화면에서 글자의 가독성 평가에 영향을 미치는 요인들에 대한 분석 70 1. 모바일 디스플레이에서 연령별 Red-Green 화면의 가독성 평가 결과 분석 70 2. 모니터 디스플레이에서 연령별 Red-Green 화면의 가독성 평가 결과 분석 73 C. 글자의 가독성 평가에 영향을 미치는 요인에 대한 실험 환경별 비교 분석 75 1. Red-Green 화면에서 연령에 따른 글자의 가독성 평가 비교에 대한 분석 76 2. Red-Green 화면에서 디스플레이 실험 환경에 따른 가독성 평가 비교 분석 92 D. Red-Green 화면에서 글자의 가독성 평가 종합분석 요약 107 Ⅴ. 결론 및 제언 109 참고문헌 113 ABSTRACT 11