전신경화증의 말초혈액 백혈구에서 텔로미어 길이 분석

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 의과학과, 2012. 8. 송영욱.텔로미어는 면역 체계의 기능을 유지하는데 중요하다. 면역노화의 마커 중 하나인 텔로미어 소실은 류마티스 관절염, 전신홍반루푸스와 같은 자가면역질환에서 잘 알려져 있지만, 전신경화증에서 텔로미어 소실에 대해서는 아직 논란의 여지가 있다. 본 연구에서는 전신경화증 환자에서 다양한 종류의 T 세포, B 세포 및 호중구의 텔로미어 길이를 측정함으로써 면역노화 상태를 알아보고자 하였다. 88명의 전신경화증 환자와 88명의 정상인의 말초혈액에서 말초혈액 백혈구의 DNA를 추출하였다. 또한, 추가로 20명의 환자와 20명의 정상인의 말초혈액에서 말초혈액 단핵구를 분리한 후, FACSAria 기계를 이용하여 전체 CD4, naive CD4, central memory CD4, effector memory CD4 T 세포, 전체 CD8, naive CD8, effector memory CD8, terminal effector memory CD8 T 세포와 naive B, memory B 세포를 각각 얻었다. 호중구는 과립구 분획에서 적혈구 용해 시약을 이용하여 얻었고, 분리된 모든 세포에서 DNA를 추출하였다. Monochrome multiplex quantitative PCR (MMQPCR) 방법을 이용하여 말초혈액 백혈구, 다양한 종류의 T 세포, B 세포 및 호중구의 텔로미어 길이를 측정하였다. 텔로미어의 길이는 특정 세포의 텔로미어 발현 대 단일카피유전자 (예: 알부민) 발현의 비율로 계산되었다 (T/S ratio). 전신경화증 환자와 정상인에서 모두, 말초혈액 백혈구의 텔로미어 길이는 나이가 증가함에 따라 점진적으로 짧아졌다 (전신경화증 환자에서 R2 = 0.056, p = 0.026, 정상인에서 R2 = 0.077, p = 0.009). 그러나, 전신경화증 환자와 정상인을 비교했을 때, 말초혈액 백혈구의 텔로미어 길이는 차이가 없었다 (p = 0.504). 전신경화증 환자에서 CD4와 CD8 세포의 텔로미어 길이는 정상인에 비해 상당히 짧아져 있었고 (T/S ratio mean ± SD, CD4 T 세포에서 1.308 ± 0.553 vs 1.956 ± 1.146, p = 0.024, CD8 T 세포에서 0.996 ± 0.342 vs 1.389 ± 0.643, p = 0.013), naive CD4 T 세포 (1.513 ± 0.657 vs 2.320 ± 1.030, p = 0.001), central memory CD4 T 세포 (1.084 ± 0.369 vs 1.686 ± 0.882, p = 0.007)와 effector memory CD8 T 세포 (0.794 ± 0.342 vs 1.134 ± 0.533, p = 0.030)의 텔로미어가 정상인보다 현저하게 소실되어 있는 것을 확인하였다. 또한, 전신경화증 환자의 naive B와 memory B 세포에서도 정상인보다 텔로미어의 길이가 짧아져 있었다 (naive B 세포에서 1.291 ± 0.566 vs 2.373 ± 1.151, p = 0.001, memory B 세포에서 1.534 ± 1.098 vs 3.331 ± 2.330, p = 0.005). 이러한 세포들과 달리, 전신경화증 환자의 호중구에서는 정상인에 비해 텔로미어 길이가 더 긴 경향을 보였다 (p = 0.068). Anti-Scl-70 항체 양성인 환자에서 effector memory CD8 T 세포의 텔로미어가 짧아져 있었지만 (p = 0.037) 임상적 특징에 따른 텔로미어 길이의 차이는 보이지 않았다. 본 연구는 림프구의 텔로미어 소실이 전신경화증의 발병에 기여할 수 있음을 제시하였다.Telomeres are critical for preserving the function of the immune system. Although telomere erosion, a marker of immunosenescence, has been well established in autoimmune diseases, such as, rheumatoid arthritis and systemic lupus erythematosus, telomere length abnormalities in systemic sclerosis (SSc) are still controversial. I investigated immunosenescence status in SSc by measuring telomere lengths in different subsets of T cells, B cells and neutrophils. DNA of peripheral blood leukocytes (PBLs) was extracted from the whole blood of 88 SSc patients and 88 age- and sex- matched healthy controls. For subpopulation analysis, peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were isolated from 20 patients and 20 controls. After isolating total CD4 T, CD8 T, and B cells, subpopulations of T cells (naive, CCR7+CD45RA+central memory, CCR7+CD45RA-effector memory, CCR7-CD45RA-terminal effector memory, CCR7-CD45RA+) and B cells (naive, CD19+CD27-memory, CD19+CD27+) were further isolated using FACSAria. Neutrophils were isolated using RBC lysis buffer from granulocyte fraction. DNA was extracted from the isolated cells. Telomere lengths were measured in PBLs, different subsets of T and B cells, and in neutrophils by monochrome multiplex quantitative PCR (MMQPCR). Relative telomere to single copy gene ratios (relative T/S ratios) were used to represent telomere length. Telomere lengths progressively shortened with aging in PBLs from SSc patients (R2 = 0.056, p = 0.026) and controls (R2 = 0.077, p = 0.009). For PBLs, no significant difference in telomere lengths were found between SSc patients and controls (mean ± SD, 1.571 ± 0.439 in SSc patients vs 1.613 ± 0.400 in controls, p = 0.504 by ANCOVA). However, telomere lengths were significantly shorter in the CD4 and in the CD8 T cells of SSc patients than in those of controls (1.308 ± 0.553 vs. 1.956 ± 1.146, p = 0.0240.996 ± 0.342 vs. 1.389 ± 0.643, p = 0.013, respectively). When subpopulations of T cells were analyzed, telomere lengths were found to be shorter in the naive T cells (1.513 ± 0.657 vs. 2.320 ± 1.030, p = 0.001), central memory CD4 T cells (1.084 ± 0.369 vs. 1.686 ± 0.882, p = 0.007), and the effector memory CD8 T cells (0.794 ± 0.342 vs. 1.134 ± 0.533, p = 0.030) of SSc patients than in those of controls. For B cells, both naive and memory B cells of SSc patients had shorter telomere lengths than those of controls (1.291 ± 0.566 vs. 2.373 ± 1.151, p = 0.0011.534 ± 1.098 vs. 3.331 ± 2.330, p = 0.005, respectively). Unlike other cells, the neutrophils of SSc patients tended to have longer telomere lengths than those of controls (p = 0.068). I found no significant difference between telomere lengths according to clinical subsets and autoantibody status, other than that telomere lengths in effector memory CD8 T cells were shorter in patients with anti-Scl-70 antibody (p = 0.037). These findings suggest that telomere shortening and premature immunosenescence of T and B cells may contribute to the pathogenesis of SSc.Introduction - 1 Materials and methods - 5 Results - 12 Discussion - 31 References - 37 Abstract of Korean - 48Maste

병원기반 건강검진 수검자를 중심으로

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 치의학대학원 치의학과, 2019. 2. 진보형.치주염은 대표적인 구강상병으로 치주병원균과 숙주면역체계 등의 상호작용으로 발생한 지속적인 면역염증반응이 치조골 등 치아주위조직의 파괴를 유발하는 만성염증질환이다. 치주염의 병태기전에 Porphyromonas gingivalis 등 치주병원균과 그 내독소, 염증성 사이토카인이 중요한 역할을 하며, 이 국소적 염증매개물질들이 전신 염증에 영향을 주어 비만이나 제2형 당뇨병, 심혈관질환 등 여러 전신질환과 상호작용하는 것으로 알려져 있다. 따라서 치주질환과 전신건강 간 상호관리가 중요하므로 치주질환과 전신건강의 연관성을 다각도로 평가할 필요가 있다. 그래서 이번 연구는 치주염 및 치주염의 발생과 진행에 관여하는 치주병원균과 전신건강상태를 반영한 다양한 전신건강지표 간 연관성을 평가하고, 치주염 이환 여부와 치주병원균 분포를 조합한 복합치주지표를 활용하여 종합적 치주건강상태와 전신건강지표 간 연관성을 평가하고자 하였다. 2013년 3월부터 2105년 3월까지 서울대학교 건강증진센터에서 종합건강검진과 별도의 구강검진을 받은 총 237명을 연구대상자로 하였다. 종합건강검진에서 임상검사와 설문조사로 비만과 심혈관계 건강상태, 당뇨병 및 인슐린저항성, 골 대사, 염증 및 산화 스트레스, 종양표지자, 병력 등 7가지 주요 건강위험인자 및 전신질환(전신건강상태) 선별 자료와 흡연과 음주, 신체활동 등 건강관리습관(전신건강행동)에 관한 정보를 수집하였다. 구강검진에서는 치주염(치주건강상태) 진단검사와 구강건강인지 및 구강관리습관(구강건강행동) 설문조사를 시행하고, 치면세균막 및 치은열구액을 채취하여 실시간 유전자증폭기술로 6종의 치주병원균 P. gingivalis 및 Treponema denticola, Tannerella forsythia, Prevotella intermedia, Fusobacterium nucleatum, Aggregatibacter actinomycetemcomitan을 정량분석 하였다. 치주염 이환 여부와 치주병원균 양적 수준을 조합한 복합치주지표를 산출하고, 치주염 및 치주병원균, 치주염-치주병원균 복합지표의 세 가지 치주지표와 전신건강지표의 연관성을 다변량 로지스틱 및 선형 회귀분석으로 파악하였다. 여러 전신건강지표가 치주염 이환 여부, 치주병원균 6종의 양적 수준, 그리고 치주염-치주병원균 복합치주상태와 통계적으로 유의한 연관성을 나타내었다. 단일 치주염 또는 치주병원균 지표보다는 치주염-치주병원균 복합지표가 더 많은 전신건강지표와 유의한 연관성을 보였다. 종합적 치주건강상태와 전신건강지표 간 연관성의 상세한 결과는 다음과 같았다. 1. 전신건강지표 중 혈청 아포B지단백과 알칼리성 인산분해효소, 호모시스테인, 암표지자 CA-125 농도는 치주염 이환 여부와 뚜렷한 양의 연관성을, 암표지자 CA-19-9 농도와 골다공증 병력은 음의 연관성을 보였다. P. gingivalis 및 T. denticola, T. forsythia, P. intermedia, F. nucleatum 등 치주병원균 수준 또는 치주염-치주병원균 복합지표와도 유의한 연관성을 보였으며, 단일지표보다 복합지표에서 연관성의 범위가 넓었다. 2. 임상적 치주염과 유의한 연관성을 보이지 않았던 여러 전신건강지표가 치주병원균 수준 또는 치주염-치주병원균 복합지표와 유의한 연관성을 보였다. 비만과 심혈관계 건강상태, 당뇨병 및 인슐린저항성 등 주요 건강위험인자는 P. gingivalis 및 T. denticola, T. forsythia, P. intermedia와 대체적으로 양의 연관성을 보였다. 구강 외 다른 신체부위의 몇몇 질환과 종양표지자는 F. nucleatum과도 연관되었으며, A. actinomycetemcomitans는 당뇨병 등 일부 지표와 음의 연관성을 보였다, 이 또한 단일지표보다 복합지표와 유의한 관계를 보이는 경우가 더 많았다. 3. 성별에 따른 층화분석 결과, 성별이 치주건강상태와 전신건강상태사이에 효과변경인자로 작용하여, 남녀에서의 그 연관성 방향에 차이가 나타났다. 비만과 고지혈증 등 주요 전신건강지표들은 여성에서 양의 연관성을 보이며 그 유의성이 강해진 데 반해, 남자에서는 그 유의성이 상실되는 경향이었으며 흡연경험이 중요한 교란요인으로 작용하였다. 결론적으로, 치주염 이환 여부 및 치주병원균 수준을 조합한 복합치주지표가 치주건강상태와 전신건강지표의 연관성을 더 적절히 설명해주었다. 즉, 치주건강상태와 전신건강문제의 상호작용을 파악하는 데 있어, 임상적 지표와 미생물학적 지표를 동시적으로 고려하는 것이 더 높은 예측력을 보였다. 주요어 : 건강위험요인, 건강지표, 전신질환, 치주병원균, 치주염Periodontitis is a chronic inflammatory disease leading to the destruction of periodontal tissue including alveolar bone loss by immuno-inflammatory response between the host immune system and microbes. The periodontal pathogens in dental biofilms, its lipopolysaccharide, and proinflammatory cytokine play an important role in the etiopathogenesis of periodontitis. In addition, the local inflammatory mediators have effect on systemic inflammation, and periodontitis interacts with many complex systemic conditions including obesity, diabetes, and cardiovascular disease. Thus, it is important to evaluate the relationship between periodontal disease and systemic health in various aspects. Therefore, this study aimed to examine the association between periodontitis, periodontopathogens and health screening indices reflecting the systemic health status, and to evaluate the relationship between comprehensive periodontal health status and health screening indices by using the complex periodontal indices combined with the presence of periodontitis and distribution of periodontopathogens. The participants were a total of 237 people who underwent a comprehensive health screening at the center for health promotion and optimal aging in Seoul national university and extra oral examinations from March 2013 to March 2105. In the health screening program, were the data for seven categories of health risk factors and systemic diseases (systemic health status) including obesity, cardiovascular abnormal conditions, diabetes and insulin resistance, bone metabolism, inflammatory and oxidative stress, tumor markers, and medical history and health habit (systemic health behaviors) including smoking, alcohol intake, and physical activity collected. In the oral examinations, were the examination for periodontitis (peridontal health status) and the interview for oral health habit (oral health behaviors) conducted. Also, the quantitative analysis was performed for six periodontopathogens (Porphyromonas gingivalis, Treponema denticola, Tannerella forsythia, Prevotella intermedia, Fusobacterium nucleatum, and Aggregatibacter actinomycetemcomitan) in subgingival biofilms and gingival crevicular fluid using real-time polymerase chain reaction. As inducing the complex periodontal indices combined with the periodontitis and the quantitative levels of pathogens, the association between three periodontal indices of periodontitis, periodonto-pathogens, and periodontitis-periodontopathogen indices and health screening indices were analysed in multivariate logistic and linear regression model. Several health screening indices were statistically significantly associated with periodontitis, the quantitative levels of six periodontopathogens, and complex periodontitis- periodontopathogen status. Complex periodontal indices were widely associated with health indices compared to single periodontitis or periodontopathogen indices. The detailed results for the association between comprehensive periodontal health status and health screening indices were as follows. 1. Of health screening indices, serum apolipoprotein B, alkaline phosphatase, homocysteine, and a tumor marker cancer antigen-125 were positively associated with periodontitis, whereas another tumor marker carbohydrate antigen-19-9 was done negatively. These indices also had the association with periodontopathogens and complex periodontal status including P. gingivalis, T. denticola, T. forsythia, P. intermedia, and F. nucleatum. 2. Several health screening indices which were not significantly associated with periodontitis, presented the association with periodontopathogens and periodontitis- periodontopathogens complex indices. Major health risk factors such as obesity, cardiovascular status, and diabetes were mostly positively associated with P. gingivalis, T. denticola, T. forsythia, and P. intermedia. F. nucleatum-related indices were also associated with some diseases in extra-oral body parts and tumor markers, and A. actinomycetemcomitans-related indices were negatively done with some health indices such as diabetes. 3. In stratification analysis according to sex, as the sex had the effect on the interaction between periodontal health status and systemic health status, the direction of associations were different depending on men and women. Most health indices such obesity and hyperlipidemia showed a positive association with periodontal health indices in women, which was stronger whereas the significance was weaker or disappeared in men. In conclusion, the complex periodontal indices combined with the presence of periodontitis and the quantitative levels of periodontopathogens explained comprehensively the association between periodontal health status and systemic health problems. In other words, the simultaneous consideration for clinical and microbial periodontal indices presented higher prediction for the interaction between periodontal tissue and systemic health problems. Keyword: health risk factor, health screening indices, periodontitis, periodontopathogens, systemic disease국문 초록 ⅰ 목 차 ⅳ 표 목차 ⅴ 그림 목차 ⅷ 용어 설명 ⅸ 제1장 서 론 1 1. 서 론 2 2. 연구의 필요성 5 3. 연구 목적 7 제2장 연구 배경 8 1. 치주염의 병태기전, 그리고 치주병원균 9 2. 치주염, 치주병원균과 전신건강상태 11 3. 종합건강검진 자료의 활용 23 제3장 연구 방법 24 1. 연구 설계 및 대상자 선정 25 2. 연구 방법 29 제4장 연구 결과 49 1. 치주염 이환 여부에 따른 전신건강지표의 분포 관계 50 2. 치주염 이환 여부와 치주병원균 수준의 관계 67 3. 치주염 및 치주병원균, 치주염-치주병원균 복합지표를 포함한 치주건강상태와 전신건강지표 간 연관성 72 제5장 고 안 94 제6장 결 론 110 참고 문헌 113 Abstract 122Docto

담즙산염이 Porphyromonas gingivalis 리포다당질에 의해 유도된 염증반응에 미치는 효과

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 치의학대학원 치의학과, 2019. 2. 진보형.1. Introduction Periodontitis is a chronic inflammatory disease leading to the destruction of periodontal tissue including alveolar bone loss by immuno-inflammatory response between the host immune system and periodontal pathogens. Chronic inflammation can be described as a shared mechanism which links periodontal disease and various systemic diseases. Bile salts and its derivatives such as sodium glycocholate and sodium taurodeoxycholate are noted as the substances to regulate immune response and could suppress excessive inflammation and tissue destruction universally. However, there is no study to assess their potentials to periodontal inflammation. Therefore, this study aimed to evaluate the inhibitory effect of bile salts on the inflammatory response and osteoclastogenesis in macrophage cell-line RAW 264.7 stimulated by periodontal pathogen Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide (LPS) and a receptor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL). 2. Materials and Methods The myelomonocytic RAW 264.7 cells were activated by P. gingivalis-LPS to induce inflammatory responses, three bile salts including sodium taurodeoxycholate, sodium taurocholate, and sodium glycocholate were treated at different concentrations. The cytotoxicity effect of bile salts was assessed by measuring cell viability with MTT-assay. To evaluate their inhibitory effect to the inflammatory responses, we applied the enzyme-linked immunosorbent assay method to measure the induction levels of the pro-inflammatory cytokines interleukin (IL)-6 and tumor necrosis factor (TNF)-α at 12 hours after treatment of the reagents. In addition, after the cells were stimulated by macrophage colony-stimulating factor and RANKL to promote osteoclastogenesis and treated with three bile salts, it was examined whether they suppress osteoclast differentiation by tartrate-resistant acid phosphatase-staining. 3. Results In cell viability test, sodium taurodeoxycholate and sodium taurocholate had no cytotoxic effect on RAW 264.7 cells at the concentration of equal or less than 200 μM, while sodium glycocholate was non-cytotoxic up to the maximal concentration of 4,000 μM. In the evaluation for their inhibitory effect to inflammatory response, the production levels of pro-inflammatory cytokines IL-6 and TNF-α decreased according to the increasing of concentration of three bile salts in a dose-dependent manner. The expression of IL-6 reduced remarkably in the treatment of sodium taurodeoxycholate and sodium glycocholate (p < 0.001), while the production of TNF-α decreased with the treatment of sodium glycocholate and the significance was relatively weak (p < 0.05). In the evaluation for the effect of bile salts to osteoclastogenesis, only sodium glycocholate at the concentration of 1,000 μM suppressed osteoclast differentiation of RAW 264.7 cells (p < 0.001), while sodium taurodeoxycholate and sodium taurocholate had no inhibitory effect to osteoclastogenesis. 4. Conclusions Three bile salts sodium taurodeoxycholate, sodium taurocholate, and sodium glycocholate inhibited P. gingivalis LPS-induced inflammatory response, and sodium glycocholate at high concentration suppressed RANKL-mediated osteoclastogenesis in RAW 264.7 cells.1. 목 적 대표적인 구강상병인 치주질환은 만성염증질환으로, 치주병원균과 숙주면역체계 등의 상호작용으로 발생한 지속적인 면역염증반응이 치조골 등의 치아주위조직의 파괴를 유발하는 질환이다. 치주염은 많은 전신질환과 함께 만성염증의 기전을 공유하여, 염증조절은 질병 관리의 중요한 목표이다. 한편, 담즙산염은 면역염증과정을 조절할 수 있는 물질로서 가능성을 주목받고 있는데, 패혈증이나 궤양성 대장염, 아토피성 피부염 등에 대한 몇몇 담즙산염의 효과를 평가하는 여러 실험연구에서 면역세포활성 조절 및 염증반응 억제 등에 효과를 보이는 것으로 나타났다. 그러나 치주질환에서 담즙산염의 효과를 평가하는 연구가 부재한 실정이다. 그래서 이번 연구는 주요 치주병원균인 Porphyromonas gingivalis의 리포다당질(lipopolysaccharide, LPS)과 RANKL을 이용하여, 담즙산염이 치주질환의 염증과정 및 골대사 등의 조직파괴과정에 억제효과를 보일 수 있을지에 대한 가능성을 평가하고자 한다. 2. 방 법 대식세포 세포주인 RAW 264.7에 치주질환의 주요 병원균으로 알려진 P. gingivalis LPS를 접종하여 면역염증반응을 유도하고, 3종의 담즙산염 타우로데옥시콜산염(sodium taurodeoxycholate) 및 타우로콜산염(sodium taurocholate), 글리코콜산염(sodium glycocholate) 각각을 농도별로 처리하여 효과를 확인하였다. MTT 측정법으로 세포생존 정도를 측정하여 각 물질의 세포독성효과를 확인하고, 효소결합면역흡착측정법으로 대표적인 염증성 사이토카인 TNF-α 및 IL-6의 생성 정도를 측정하여 각 물질의 염증반응에 대한 억제효과를 확인하였다. 또한, RAW 264.7에 P. gingivalis LPS 및 M-CSF, RANKL을 처리하여 파골세포로의 분화를 유도하고, 3종의 물질을 각각 농도별로 처리한 후, TRAP 염색법으로 파골세포양세포를 확인하여 파골세포로의 분화 정도를 확인하였다. 3. 결 과 세포독성평가에서 타우로데옥시콜산염 및 타우로콜산염 처리군은 200 μM 이하의 농도에서 대조군과 세포생존 정도에 유의한 차이가 없었고, 글리코콜산염 처리군은 실험최고농도인 4,000 μM 이하의 전 농도에서 세포독성을 보이지 않았다. 염증반응평가에서 담즙산염 처리 12시간 후 염증성 사이토카인 생성은 각 물질의 처리 농도가 높아질수록 억제되는 경향이었다. 특히, IL-6의 생성은 타우로데옥시콜산염 100 μM 및 글리코콜산염 10 μM 이상 농도에서 강하게 억제되었다(p < 0.001). TNF-α 생성 또한 각 물질의 농도가 높아질수록 억제되었으나, 유의성은 상대적으로 약했다. 전반적으로 담즙산염 및 그 유도체는 유의한 세포독성을 보이지 않으며, P. gingivalis LPS에 의한 염증반응을 억제하는 것으로 나타났다. 담즙산염의 파골세포 분화에의 영향은 글리코콜산염에서만 확인할 수 있었다. 글리코콜산염을 1,000 μM 처리 시 RAW 264.7의 파골세포로의 분화가 현저하게 억제되었으나 (p < 0.001), 타우로데옥시콜산염과 타우로콜산염은 대조군과 비교 시 파골세포 분화에 유의한 영향을 주지 않았다. 4. 결 론 타우로데옥시콜산염 및 타우로콜산염, 글리코콜산염을 비롯한 담즙산염은 P. gingivalis LPS로 유도된 염증반응을 억제하였고, 글리코콜산염은 높은 농도에서 RANKL에 의한 RAW 264.7 세포의 파골세포로의 분화를 억제하였다.Ⅰ. Introduction 1 1. Background 1 2. Purpose 5 Ⅱ. Materials and Methods 6 1. Bile salts and reagents 6 2. RAW 264.7 cell cultures 6 3. MTT assay for cell viability test 7 4. ELISA for cytokine detection 8 5. TRAP staining for osteoclastogenesis detection 9 6. Statistical analysis 9 Ⅲ. Results 11 1. Three bile salts had no cytotoxic effect at most concentrations on RAW 264.7 cells 11 2. Three bile salts inhibited the production of pro-inflammatory cytokines IL-6 and TNF-α in Pg-LPS-stimulated RAW 264.7 cells 14 3. Sodium glycocholate at the highest concentration remarkably suppressed osteoclast differentiation of RAW 264.7 cells 19 Ⅳ. Discussion 23 Ⅴ. Conclusion 29 Ⅵ. References 30 국문초록 34Maste

적응 유연성과 영적 안녕 및 부모애착 간의 관계 : 적응유연 청소년, 위험 청소년, 유능 청소년의 비교

이 연구는 청소년 문제가 점점 부정적이고, 심각화되는 경향성을 보이는 상황에서, 똑같이 위험하고 열악한 상황임에도 불구하고 부적응을 보이지 않고 잘 적응하고 있는 적응유연 청소년들의 심리적 특성을 이해하고, 위험요소에 노출되었을 때 부적응의 가능성을 감소시키는 보호요소로 영적 안녕(종교적 안녕, 실존적 안녕)과 부모애착을 밝히는데 그 목적이 있다. 이 연구에서는 위험요소 수준과 적응 수준에 따라 적응유연 청소년, 고위험 청소년, 유능 청소년 집단으로 분류하고, 이들 세 집단 간에 영적 안녕(종교적 안녕, 실존적 안녕)과 부모 애착이라는 보호요소의 차이를 분석하고, 각 보호요소 간의 상관을 알아보았다. 이 연구의 가설은 다음과 같다: (a) 적응유연 청소년은 고위험 청소년에 비해 영적 안녕(종교적 안녕, 실존적 안녕) 점수가 더 높고, 유능 청소년에 비해 영적 안녕(종교적 안녕, 실존적 안녕) 점수가 더 낮을 것이다. (b) 적응유연 청소년은 고위험 청소년에 비해 부모애착 점수가 더 높고, 유능 청소년에 비해 부모애착 점수가 더 낮을 것이다. (c) 영적 안녕(종교적 안녕, 실존적 안녕)과 부모 애착 사이에는 정적인 상관을 나타낼 것이다. 이 연구는 초, 중, 고등학생 344명을 대상으로 위험요소 수준과 적응 수준에 따라 분류한 적응유연 청소년 30명, 고위험 청소년 39명, 유능 청소년 40명을 대상으로 실시하였다. 영적 안녕 측정을 위하여 Paloutzion 과 Ellison(1982)이 개발한 영적 안녕 척도를 사용하였고, 부모애착 측정을 위하여 Armsden 과 Greenberg(1987)가 개발한 부모애착 척도를 사용하였다. 그리고 적응유연 청소년, 고위험 청소년, 유능 청소년 세 집단 간 영적 안녕(종교적 안녕, 실존적 안녕) 및 부모 애착 점수의 차이가 있는지 알아보기 위해 일원분산분석(ANOVA)과 사후검증으로 Tukey 검증을 실시하였다. 그리고 영적 안녕(종교적 안녕, 실존적 안녕)과 부모애착간의 관계 정도를 보기 위해 상관분석을 실시하였다. 이 연구의 결과는 다음과 같다. 첫째, 종교적 안녕에서 유능 청소년, 적응유연 청소년, 고위험 청소년 순으로 높은 점수를 보였으나, 통계적으로 유의미한 점수 차이는 없었다. 그러나 실존적 안녕에서 유의수준 .05에서 적응유연 청소년은 고위험 청소년보다 유의하게 높은 점수를 나타내었고, 유능 청소년보다는 유의하게 낮은 점수를 나타났다. 둘째, 부모 애착에서 유의수준 .05에서 적응유연 청소년은 고위험 청소년보다 유의하게 높은 점수를 나타내었고, 적응유연 청소년과 유능 청소년간에는 유의한 점수 차이가 없었다. 셋째, 종교적 안녕, 실존적 안녕, 부모애착 간에는 각각 유의수준 .01에서 통계적으로 유의한 정적인 상관관계를 보였다. 이상의 결과를 연구자의 가설과 비교해 볼 때, 첫 번째 가설인 세 집단 간 종교적 안녕 점수 차이가 연구자가 설정한 가설의 방향으로 나타났으나 유의미한 차이가 없었던 것만 제외하고 연구결과는 연구자의 가설을 모두 지지하였다. 고위험 청소년 및 유능 청소년과 비교해볼 때 적응유연 청소년은 삶의 의미와 목적을 추구하고, 삶에 대해 행복을 느끼고, 장래에 대한 긍정적인 믿음을 가지고 있는 등 실존적 안녕이 높아 동일한 위험상황을 다르게 지각·해석하며, 또한 부모와의 긍정적인 관계가 위험요인의 부정적인 영향을 완충시키는 보호요소로 작용하였기 때문에 높은 적응을 보이는 것을 알 수 있다. ; This study was performed to compare among three adolescent groups(i. e., resilient adolescents, at-risk adolescents and competent adolescents) in their spiritual well-being and parent attachment. Data were collected from 344 adolescents and classified into three groups as to the level of risk factors and adaptation: 30 resilient adolescents, 39 at-risk adolescents and 40 competent adolescents. The questionnaire was composed of Demographic questions, Spiritual Well-Being Scale, Inventory of Parent Attachment and Adaptation Scale and they were administrated in groups at elementary, middle and high schools. Results indicated, as expected, resilient adolescents were shown to be higher existential well-being and higher parent attachment compared to at-risk adolescents. But there was not a significant religious well-being s difference in three groups. And there was a significant positive correlation between spiritual well-being and parent attachment. Implications for future study and counseling for at-risk adolescents were suggested.논문요약 = vii I . 서론 = 1 A. 문제제기 = 1 B. 연구문제 및 가설 = 5 II . 이론적 배경 = 6 A. 적응 유연성 = 6 1. 적응 유연성의 개념 = 6 2. 위험요소 = 7 3. 보호요소 = 9 4. 위험요소와 보호요소 = 11 B. 영적 안녕감 = 11 1. 영성과 영적 안녕의 개념 = 11 2. 종교적 안녕과 실존적 안녕 = 14 C. 청소년기 부모애착 = 15 D. 영성과 부모애착의 관련성 = 17 III. 연구방법 = 20 A. 연구대상 = 20 B. 연구도구 = 23 1. 영적 안녕 척도 = 23 2. 부모 애착 척도 = 24 3. 적응척도 = 24 C. 연구절차 = 26 D. 자료분석 = 27 1. 위험 수준의 결정 = 27 2. 적응 수준의 결정 = 28 3. 집단의 분류 = 29 4. 통계 분석 = 29 IV. 연구결과 = 30 A. 집단 간 분포 = 30 B. 집단 간 종교적 안녕 차이 = 31 C. 집단 간 실존적 안녕 차이 = 32 D. 집단 간 부모 애착 차이 = 34 E. 종교적 안녕, 실존적 안녕, 부모 애착간의 상관분석 = 35 V. 논의 = 37 참고문헌 = 42 부록 질문지 = 5

Looking with Contemplative Attitude

세상을 살아가는 수많은 사람들은 빠르게 돌아가는 사회 속에서 반복된 일상을 보내고 다른 사람들과 복잡한 관계를 맺으며 생활한다. 이러한 삶 속에서 우리는 심신의 휴식을 가질 수 있는 시간을 갖기 쉽지 않다. 신체의 휴식도 분명 필요하지만 그보다 우리의 정신과 마음이 쉬지 못하게 되면 내면의 평안과 여유가 없어 지치게 된다. 그렇게 되면 자신에게 일어난 원치 않는 상황이나 사건에 필요 이상으로 예민하게 반응하기도 하며 걱정, 근심, 불안함, 두려움, 분노 등 여러 부정적인 감정이나 생각에 사로잡히게 된다. 존 카밧진(Jon Kabat-Zinn)은 “당신은 파도를 멈출 수 없다. 그러나 파도를 타는 법을 배울 수 있다.”고 말한다. 이는 우리의 삶에서 필연적으로 일어나는 문제를 우리의 힘으로 멈출 수가 없고 스트레스로 인한 고통스러운 감정을 한 번에 떨쳐버리기는 어렵지만, 이것을 극복하는 방법을 배울 수 있다는 것이다. 이러한 방법을 찾으려 했던 본인의 내적 동기가 본인의 작업 주제의 출발점이 된다 할 수 있다. 아무도 없는 공간 안에서 혼자만의 시간을 보냄으로써 차분하게 스스로를 돌아보았다. 그 시간동안 본인에게 스트레스를 주는 것들에 대해 거리를 두고 관조적으로 바라볼 수 있게 되었고, 마침내 정신적, 심적으로 편안해 질 수 있었다. 따라서 본 논문에서는 스트레스에서 벗어나 정신과 마음의 휴식을 갖기 위한 방법으로 ‘관조적 태도’를 제시하였고 그러한 태도를 취할 수 있도록 환경적 수단으로써 갖는 혼자만의 시간과 공간, 즉 ‘긍정적 고독’에 대해 설명하였다. 그리고 이를 바탕으로 본인 작업의 주제와 표현 방법에 대해 연구하였다. 본 논문에서 말하고자 하는 관조적 태도는 자신에게 일어나는 원하지 않는 상황이나 부정적인 경험으로 야기된 생각, 감정들에 지나치게 반응하지 않고 있는 그대로 바라보며 수용하는 태도이다. 이에 대해 중국의 사상가 장자가 제시한 관조적 태도와 명상 수행법의 하나인 ‘마음 챙김’에서도 관조적 태도의 속성을 가진다 생각하여 이에 대해 알아보았다. 이러한 관조적 태도는 ‘긍정적 고독’이라는 환경에서 더욱 잘 얻을 수 있다고 보았다. 긍정적 고독은 조용히 자신을 돌아볼 수 있도록 적극적, 의도적으로 택한 혼자 있는 상황이다. 이러한 상황 안에서 관조적 태도를 취함으로써 얻을 수 있는 정신과 마음의 안정, 즉 내적인 ‘쉼’에 대해 서술하였다. 본인은 마음 챙김을 실천하여 관조적 태도를 얻고자 하였으며 작품을 통해 이러한 관조적 태도를 취하는 본인의 내적 상태를 표현하고자 하였다. 주로 혼자만의 시간과 공간 속에서 관조적인 시선으로 무언가를 바라보고 있는 인물이나, 그 사람의 상태를 간접적으로 드러낼 수 있는 사물을 소재로 사용하여 나타냈다. 이와 같은 내용을 드러내고자 이미지의 외곽선을 불분명하게 하여 형태를 모호하게 표현하고 담한 색을 사용하여 채색하였는데 이러한 조형성과 표현 방법에 대해 연구하였다. 그리고 이러한 작업의 내용 및 표현 방법 뿐 아니라 혼자 있는 시간 안에서 본인 자신의 모습을 계속해서 그리며, 담하게 여러 번 채색하는 반복적인 작업 방식이 수행과 같은 특성을 보였기에 이 또한 관조적 태도를 반영한 경험이라 생각했다. 이상의 본 연구에서는 정신과 마음의 쉼을 얻기 위한 방법으로 취할 수 있는 내적 자세인 관조적 태도와 이러한 태도를 얻도록 하는데 필요한 긍정적 고독이라는 상황을 제시하고자 하였다. 이론적인 배경을 마련하여 작업의 주제를 더욱 확고히 하는 기틀을 잡을 수 있었다. 그리고 관조적 태도라는 추상적인 내용을 회화라는 시각적 형태로 표현하는데 있어서 사용하는 소재나 조형적인 표현 방법에 대해 연구 할 수 있었고 이러한 연구를 통하여 앞으로의 작업 방향에 대해 모색할 수 있는 계기가 되었다.; So many people in this fast paced world are living their life in repeated patterns and are bombarded with complex relationships. Therefore, it is quite difficult for us to have time to rest our mind and body. Physical rest is obviously important but if our mind and spirit don’t get a proper rest, then we will not have peace of mind. This can lead us to becoming overly sensitive to things, face unintended consequences, and negative side effects such as anxiety, fear, anger, and nervousness. Jon Kabat-Zinn once said, “You cannot stop the waves. But you can learn to surf.” It is difficult to control inevitable problems that come in our way and gain instant relief from painful emotions derived from stress, but there is a way to overcome and manage these problems. My work began from my motive to solve this issue. When spending time in solitude, I can look back upon myself in a calm manner and observed issues in a contemplative way; thus, I was able to achieve inner peace. So, the paper shows how having a ‘contemplative attitude’ enables a person to overcome stress and have a peace of mind and based on the context of ‘positive solitude,’ we have come up with ways to create external measures that the person may need to recognize the ‘positive attitude’. And based on this way, I studied the subject matter and method of expression in my work. First, this paper points out the term contemplative attitude as an outlook where a we observe and accept our undesirable situations and negative experiences rather than reacting emotionally to them. A Chinese thinker Zhuāngzǐ proposed ways to give less of an attachment to our minds and achieve the positive ‘attitude. Similar to context of the contemplative attitude can also be found in Buddhist meditation practices, called ‘Mindfulness’. To achieve this, we intentionally confines ourselves in solitude to reflect on life; it must be emphasized that we are performing willingly on our own behalf to create a positive solitude. Within the process of this experience, we can empty our mind and spirit, thus feeling secure and restful. I wanted to proactively gain a contemplative attitude by way of practicing mindfulness and delve further into my inner state through the works. My work mostly consisted of a figure, looking at something in a contemplative gaze and showing subtle things that indirectly evoke the figure’s inner state. And in order to express the strong resilience and flexibility of its mind, the outer form was purposely made in vague structure and repeatedly applied lighter colors by using light colored technique. So I studied these formativeness and technique. To add on top of the subject of this work, going through numerous amounts of time painting images of myself alone and using repetitive processes by applying various light colors made me realized that I was experiencing the contemplative attitude in and of itself. Although it was unintended, I was actually meditating throughout the process of my work. In this foregoing thesis, it proposes series of steps on how we can easily rest our inner mind and spirit to obtain the contemplative attitude and present the situation with the importance of positive solitude. And the completion of the research, it provided atheoretical background relating to the content of my work and it further consolidated the main subject and laid a strong foundation of my work. Moreover, I’ve found that how to express visual imagery the experience of contemplative attitude by using image and formativeness and technique. And I had a chance to review my works and seek the direction of my works in future.Ⅰ. 서론 1 A. 연구 목적 1 B. 연구 내용 및 방법 2 Ⅱ. 이론적 배경 4 A. 관조적 태도 4 B. 긍정적 고독(Solitude) 10 C. 관조적 태도를 통한 ‘쉼’ 14 Ⅲ. 표현내용 및 방법 16 A. 주제 연구 16 1. 관조적 태도의 경험 16 2. 혼자만의 시간과 공간 19 3. 인물과 사물 이미지 20 B. 조형성과 기법연구 24 1. 모호한 형태를 통한 심상 표현 24 2. 담채(淡彩)를 통한 심상 표현 30 Ⅳ. 작품 분석 34 Ⅴ. 결론 56 참고문헌 58 ABSTRACT 6

Anatomy of the Femoral Attachment Site of the Anterior Cruciate Ligament and the Posterolateral Structures Related to the Stability of the Knee Joint

The anterior cruciate ligament (ACL) and the posterolateral structures are functionally important structures that assist with the stability of the knee joint. Sport-related injuries to these structures and reconstructive surgery are becoming more frequent. However, the anatomic characteristics and the relationship between these structures are not well understood. We measured the morphological characteristics of the posterolateral structures of the knee and the ACL, and we identified the anatomic relationship between the center of the femoral attachment area of the ACL and other femoral structures. We dissected 34 cadaveric knees with no signs of previous surgery, knee abnormality, or disease. The lateral collateral ligament (LCL) and the popliteus tendon (PLT) were present in all knees, although the popliteofibular ligament (PFL) was not present in 20.6% of knees. The mean length of the LCL was 51.99 mm and differed significantly between men and women (P<0.05). The mean length of the PLT was 21.59 mm, and the mean length of the PFL was 18.49 mm. In 67.7% of knees, the PLT was attached to the inferior aspect of the femoral attachment of the LCL, and the femoral attachment of the PLT was covered by the bundle of the LCL. The ACL was distinguished into anteromedial (AM) and posterolateral (PL) bundles in all knees. The mean lengths of the AM and PM bundles were 22.14 mm and 15.98 mm, respectively. The measured lengths in each bundle differed significantly between men and women (P<0.05). The mean distance between the center of the femoral attachment area of the ACL and the intercondylar line was 8.36 mm in the AM bundle, 15.98 mm in the PL bundle, and 10.96 mm in the entire ACL. The mean distance between the center of the femoral attachment area of the ACL and the medial border of the lateral condyle was 8.14 mm in the AM bundle, 7.36 mm in the PL bundle, and 8.45 mm in the entire ACLope

A study on the influencing factors of oral health-related behaviors of the elderly in elderly welfare facilities on oral health-related quality of life

Objectives: In order to understand the factors that influence the oral health-related quality of life of older adults, we investigated the quality of life, oral health status, and oral health behavior of older adults in a metropolitan city in Korea. Methods: Data were collected from October 2019 to March 2020, after approval was obtained from the authors institutional review board. Oral examinations were administered and a structured questionnaire was distributed to 150 older adults at a public nursing home. Data on sociodemographic factors, oral health behaviors, general health questions, and oral health-related quality of life (assessed with the Oral Health Impact Profile-14 [OHIP-14]) were collected with the questionnaire. To assess the general health condition of the participants, grip strength and upper arm and calf circumference were measured. Multiple logistic regression analysis was used to determine the correlation between oral health-related quality of life and other variables. Results: Whether brushing was performed, the number of remaining teeth, and the presence of periodontal disease were found to correlate with OHIP-14 scores (P&lt;0.05). Oral Health Impact Profile-14 scores and sociodemographic factors in older adults through multiple logistic regression analyses with general health, oral health habits and conditions, and need for assistance with daily oral health care. Correlations between OHIP-14 scores and general health variables, such as thigh circumference and grip strength, revealed a low oral health-related quality of life in participants who needed help during brushing (P&lt;0.05). Conclusions: Results of the study confirmed a relationship between OHIP-14 scores and oral health and habits among older adults in public nursing homes with socioeconomic status, and general health, and oral health, and each variable affects the relationship. Further analysis and additional epidemiological studies are needed to understand the interrelationships.N