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    Saccharomyces cerevisiae 와 Candida albicans에서 chitin 합성효소의 조절 기작과 생리학적 역할 : Studies on the regulating mechanisms and physiological roles of chitin synthases of saccharomtces cerevisiae and candida albicans

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    곰팡이의 세포벽을 구성하는 chitin 합성효소는 세포 내에서 여러 동위효소로 존재하며, 세포주기와 발달 단계에 따라 특정한 시기에 매우 분화된 기능을 수행한다. 따라서 chitin 합성효소의 조절 기작은 매우 중요하게 생각되고 있다. 현재까지 알려진 chitin 합성효소의 조절 인자들은 전사 단계나 번역 후 단계에서 chitin 합성효소의 기능을 조절하는 역할을 담당한다. Saccharomyces cerevisiae에 존재하는 chitin 합성 효소 중 Chs3p는, cell wall chitin과 chitin ring을 합성하며, CHS4가 조절 인자로 규명되어 있다. 본 연구에서는 CHS4가 CHS3와의 단백질 수준의 상호작용에 의해 CHS3의 기능을 조절한다는 기존의 보고에 근거하여, Chs4p와 직접 상호 작용하는 Chs3p의 부분을 규명하고, 이 부분을 MIRC3-4라 명명하였다. MIRC3-4 부분은 50개의 아미노산 서열을 포함하며, 다른 여러 종류의 곰팡이에서 CHS3 homolog 간에 유사성이 매우 높은 것으로 조사되었다. 보존율이 높은 14개의 아미노산을 대상으로 PCR을 이용하여 아미노산을 치환한 결과, 이중 일부 아미노산이 치환된 돌연변이 균주 (M3?9, and M 13)의 in vitro 효소 활성도가 정상인 균주에 비해 최고 90% 이상까지 감소하는 것을 관찰하였으며, 세포벽에 존재하는 chitin의 양도 효소 활성도와 비례하여 감소되는 것을 확인하였다. 그러나 항진균 성분인 calcofluor에 대한 민감성은 모든 돌연변이 균주에서 비슷하게 나타났다. 효소 활성도와 세포 내 chitin 양의 변화에 의해 세포 내의 chitin 분포 정도가 영향을 받을 것으로 예상하고, calcofluor 염색법으로 확인한 결과, 효소 활성도가 낮은 균주들에서 chitin ring이 합성되지 못함을 확인하였다. 그러나 모든 돌연변이 균주에서 cytokinesis 이후의 딸세포 세포벽에 형성되는 cell wall chitin의 합성은 영향을 받지 않았다. 그러므로 MIRC3-4 부분이 G1 기에 chitin ring 합성에만 관계되는 부분임을 알 수 있다. 돌연변이에 의해 chitin ring 을 형성하지 못하게 된 균주는 Chs4p 와의 단백질 간 상호작용의 세기도 약화됨을 two hybrid assay를 통해 밝혀내었다. 그러므로 이 부위가 Chs4p와의 직접적인 상호작용에 의해 Chs3p의 기능을 조절하는 부분으로 생각된다. 이전의 연구에서 CHS4는 Chs3p의 localization과 conformation에 관여할 것이라는 보고가 있었으므로, immunofluorescence assay를 수행하여 이를 확인하였다. 모든 돌연변이 균주에서 Chs3p는 세포주기에 따라 정상 균주와 동일하게 localization pattern을 보이는 것으로 미루어, Chs4p는 Chs3p의 recruiter라기 보다는 activator로서, MIRC3-4 부분과의 단백질 수준의 상호작용을 통하여 chitin ring 합성을 조절함을 알 수 있다. Chitin 합성은 병원성 곰팡이인 Candida albicans의 형태 전환에 중요한 요인이므로, chitin 합성효소에 대한 저해제의 작용조건에 대하여 조사하는 것은 중요한 일이다. Nikkomycin Z는 chitin synthase에 대한 경쟁적 저해자 (competitive inhibitor)로서, Saccharomyces cerevisiae 의 세 chitin 합성효소 중 Chs1 과 Chs3를 선택적으로 저해하는 것으로 알려졌다. 본 연구에서는 in vitro 효소 활성도 측정법을 이용하여 Candida albicans 의 chitin 합성효소에 대한 nikkomycin Z의 저해효과를 조사한 결과, 세 chitin 합성효소 모두를 저해함을 확인하였다. IC_50 값은 CaChs1에 대해서는15 μM, CaChs2는 0.8 μM, CaChs3는 13 μM인 것으로 조사되었다. 결과적으로 nikkomycin Z는 S. cerevisiae와 C. albicans에서 chitin 합성효소에 대한 저해도의 차이를 보이며, 이것은 두 organism에서 chitin 합성효소의 기능의 차이와도 연관된다. Nikkomycin Z는 in vivo에서도 배지조건에 따라 C. albicans의 생장과 균사체 형태전환을 다르게 저해하는 양상을 보였다. 균사체 형성을 유도하는 Spider media, corn meal agar, Lee s media에서 각각 Nikkomycin Z의 저해효과를 조사한 결과, Lee s media 에서는 C. albicans의 생장을 거의 저해하지 못하였다. 이와 같은 Nikkomycin Z에 의한 생장도 저해효과는 in vivo 에서 nikkomycin Z가 chitin 합성효소의 활성도를 저해한 결과로부터 기인하는 것임을 calcofluor staining을 통하여 확인할 수 있었다. spider 배지와cornmeal agar 배지에서 nikkomycin Z에 의해 생장도가 저해된 균주들은 septum과 cell wall chitin 의 형성이 저해된 것을 확인할 수 있었다. 특히 CaChs1 의 활성도만 가지고 있는 돌연변이 균주에서는 격벽이 없는 사슬모양의 비정상적인 형태와 세포의 용혈현상도 관찰되었으며, 이러한 현상은 sorbitol을 첨가한 경우 다소 감소하였다. 그러므로 세포 내에서 nikkomycin Z에 의한 chitin 합성효소의 저해와 그로 인한 세포 생장 저해와 용혈현상은 배지 조성에 의한 영향을 받는다고 볼 수 있다. 또한 CaChs1 은 C. albicans에서 세포의 형태를 보존하는 기능을 가지도록 분화되었음을 알 수 있다. Key words: chitin synthase 3, chitin ring, cell wall chitin, ScCHS4, Saccharomyces cerevisiae, Candida albicans, chitin synthase, septum formation, nikkomycin Z, media composition. ; The existence of three different chitin synthases (Chitin synthase 1, 2, and 3) with specific roles during the yeast life cycle suggests that specific their enzymatic regulation should be well modulated. It has been proposed that chitin synthase3-mediated chitin synthesis during the vegetative cell cycle is governed by a regulator encoded by CHS4. To investigate direct protein-protein interaction between their coding products, Chs3p and Chs4p, a domain of Chs3p that is responsible for the interaction with Chs4p was identified by using yeast two hybrid system. Deletion of that domain of 50 amino acids, termed Maximum Interacting Region of Chs3p with Chs4p (MIRC3-4) abolished interaction with Chs4p and some mutations in MIRC3-4 region resulted in disappearance of chitin ring at the early G1 phase, whereas the mutations in MIRC3-4 did not affect chitin synthesis in the cell wall after cytokinesis. CHS4 expression at the transcriptional level and chitin distribution in chs4 mutant cells indicated that CHS4 is involved in the synthesis of chitin ring at the G1 phase and cell wall chitin at the cytokinesis, suggesting that Chs4p regulates CSIII activity with different modes at the G1 phase and cytokinesis. Absence of chitin ring could be caused either by delocalization of Chs3p to the bud-neck or by improper interaction with Chs4p. When Chs3p mutant cells were stained with Chs3p-specific antibody to discriminate between those two alternatives, Chs3p was found to be localized to the bud-neck in all MIRC3-4 mutants. MIRC3-4 domain is probably involved in direct interaction with Chs4p at the G1 phase. Thus Chs3p may be activated from zymogenic form in cooperation with Chs4p, Bni4p, and septin complex for synthesizing chitin ring at the bud neck. Chitin synthesis is also crucial for Candida morphogenesis. Therefore it is important to characterize chitin synthase inhibitors, which can be used as antifungal agents. Nikkomycin Z is a competitive inhibitor of chitin synthases in fungi. It has been reported that it inhibits chitin synthases (Chs) 1 and 3, but not 2 of Saccharomyces cerevisiae. In this study, it was found that 1) Nikkomycin Z inhibited all three Chs isozymes of Candida albicans (CaChs). 2) growth inhibition by nikkomycin Z was observed on Spider and corn meal agar plate, but not on Lee s plate. 3) Growth inhibition by nikkomycin Z accompanied by the absence of septum and cell wall chitin, which in turn brought about cell lysis. Nikkomycin Z did not lyse cells in Lee s media and lysis was partially prevented in the presence of sorbitol as an osmostabilizer in Spider medium. Therefore, nikkomycin Z prevented the formation of septum and cell wall chitin by inhibiting chitin synthase activities in a growth media-dependent manner. Key words: chitin synthase 3, chitin ring, cell wall chitin, ScCHS4, Saccharomyces cerevisiae, Candida albicans, chitin synthase, septum formation, nikkomycin Z, media composition.ABSTRACT -------------------------------------------------------------- ⅰ CONTENTS -------------------------------------------------------------- ⅲ LIST OF FIGURES ------------------------------------------------------- ⅵ LIST OF TABLES -------------------------------------------------------- ⅷ LIST OF ABBREVIATIONS ------------------------------------------------- ⅸ INTRODUCTION ---------------------------------------------------------- 1 1. Chitin Deposition in S. cerevisiae -------------------------------- 3 2. Chitin Synthases of S. cerevisiae --------------------------------- 7 3. Chitin Synthases of C. albicans ----------------------------------- 12 4. Nikkomycin Z ------------------------------------------------------ 15 5. Purpose of This Study --------------------------------------------- 17 MATERIALS AND METHODS 1. Identification of a Domain Required for Synthesis of Chitin Ring in S. cerevisiae. 1.1. Bacterial and Yeast Strains, Culture Conditions ---------------- 20 1.2. Construction of Plasmids and Strains --------------------------- 20 1.3. Site-Directed Mutagenesis -------------------------------------- 21 1.4. Construction of Mutated Plasmids ------------------------------- 26 1.5. Determination of Chitin Synthase Activity ---------------------- 26 1.6. Measurement of Chitin Content ---------------------------------- 27 1.7. Test for Calcofluor Susceptibility ----------------------------- 28 1.8. Calcofluor Staining -------------------------------------------- 28 1.9. β-Galactosidase Assay ----------------------------------------- 29 1.10. Synchronization of Cultures with Alpha Factor ----------------- 29 1.11. Northern Analysis --------------------------------------------- 30 1.12. Indirect Immunofluorescence Microscopy ------------------------ 30 2. Inhibition of Chitin Synthases by Nikkomycin Z in Candida albicans 2.1. Strains and Media ---------------------------------------------- 31 2.2. FOA Selection -------------------------------------------------- 32 2.3. Reagents ------------------------------------------------------- 32 2.4. Chitin Synthase Assay ------------------------------------------ 32 2.4. Determination of Susceptibility to Nikkomycin Z ---------------- 34 2.5. Calcofluor Staining of C. albicans Cells ----------------------- 35 RESULTS 1. Identification of a Domain Required for Ssynthesis of Chitin Ring in S. cerevisiae. 1.1. Identification of a Domain in Chs3p Interacting with Chs4p ----- 37 1.2. Sequence Comparison of MIRC3-4 domain -------------------------- 40 1.3. In Vitro Mutagenesis of MIRC3-4 -------------------------------- 40 1.4. Construction of chs3 Disruptant -------------------------------- 41 1.5. Determination of In Vitro CSIII Activity ----------------------- 46 1.6. Determination of Cell Wall Chitin Content ---------------------- 46 1.7. Susceptibility of MIRC3-4 Mutants to Calcofluor ---------------- 49 1.8. Determination of Chitin Ring at the Bud Neck ------------------- 52 1.9. Distribution of Cell Wall Chitin ------------------------------- 59 1.10. Interaction Between MIRC3-4 Mutants and Chs4p ----------------- 59 1.11. Expression of ScCHS4 during the Cell Cycle -------------------- 62 1.12. Localization of Mutated Chs3p --------------------------------- 65 2. Inhibition of Chitin Synthases by Nikkomycin Z -------------------- 71 2.1. Inhibition of In Vitro CS Activity by Nikkomycin Z ------------- 71 2.2. Kinetics of the CaChs1 by Nikkomycin Z ------------------------- 71 2.3. Effect of Nikkomycin Z on the Growth of C. albicans ------------ 74 2.4. Effect of Nikkomycin Z in Different Media Conditions ----------- 78 2.5. Inhibition of Chs Isozymes in Different Media ------------------ 83 DISCUSSION 1. Identification of a Domain Required for Synthesis of Chitin Ring in S. cerevisiae. ------------------------------------------------- 90 2. Inhibition of Chitin Synthases by Nikkomycin Z in Candida albicans ------------------------------------------------------------------- 98 CONCLUSION ------------------------------------------------------------102 REFERENCES ------------------------------------------------------------105 국문초록 --------------------------------------------------------------11

    (A) STUDY ON THE DEVELOPMENT OF THE THEORY OF EQUATION

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    고대 그리이스, 4대문명 발상지와 더불어 시작된 지식의 한 독립체로서 수학이 탄생된 이래로 거의 이천년 이상에 걸쳐 수학자들은 진리를 추구하였다. 이러한 진리를 추구하면서 발달한 수학은 단순한 지식의 누적으로 인한 발전뿐만 아니라 항시 어떤 새로운 paradigm의 출현으로 인하여 수학의 맥이 형성되고 있으며 앞으로도 이러한 과정은 되풀이될 것이다. 본 논문에서는 방정식론의 발전에 대해 연구하고자 하는데 그 목적을 두고있다. 고대의 중국과 이집트를 중심으로한 실생활에 필요했던 이유로 생긴 계산술론적인 paradigm으로부터 오늘날의 추상적인 군론적 Paradigm에 이르기까지 단순한 지식의 누적외에 창조적인 paradigm의 출현이 오늘날의 방정식론의 위치를 형성하고 있다. 이리하여 고대에서 근대로 이어지는 방정식론의 역사를 더듬으면서 인류의 이성의 진보과정을 발견하려 한다.;The purpose of the thesis is to study the development of the theory of equation. First we review the method of solving equation in ancient Chaina & Egypt were developed for the practical purpose such as surveying the lands and the measurement. Therefore the calculative paradigm had formed. But modern theory of equations have made astonishing result discovering the abstract group and field paradigms. I hoped to find t h e advanced process of the human thinking by Considering the development of the theory of equations form ancient to modern times.목차 = ⅲ 논문개요 = ⅳ Ⅰ. 서론 = 1 A. 연구의 목적 = 1 B. 연구의 방법 = 3 Ⅱ. 고대의 방정식 = 4 A. 이집트와 메소포타미아 = 4 B. 중국 = 7 C. 그리이스 = 11 Ⅲ. 중세의 방정식 = 14 A. 인도 = 14 B. 아라비아 = 16 C. 유럽과 중국 = 19 Ⅳ. 르네상스 시대의 방정식 = 23 A. 사회적 배경 = 23 B. 3, 4차방정식의 해법 = 24 C. 대수학의 기초작업 = 27 Ⅴ. 근대의 대수학 = 30 A. 사회적 배경 = 30 B. 대수방정식의 일반적 해법에 관하여 = 31 Ⅵ. 결론 = 39 참고문헌 = 41 ABSTRACT = 4

    (TMTSF)₂ClO₄의 양자 홀 효과에 관한 연구

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    준 일차원 유기 전도체 중 하나인 (TMTSF)_(2)ClO_(4)가 자기유도스핀밀도파 상태일때 보이는 양자 홀 효과에 대해 연구하였다. (TMTSF)_(2)ClO_(4)에서의 양자 홀 효과는 시료에 가해진 자기장이 점점 증가하는 경우와 감소하는 경우에 따라 같은 자기장에서 서로 다른 홀 저항의 크기를 갖는 이력현상을 보인다. 이러한 이력현상의 원인을 알아보기 위하여 밀도파를 피닝(pinning)-디피닝(depinning)시키는 방법을 사용하였다. 펄스를 이용하여 피닝 과 디피닝을 반복시키는 방법을 컨디셔닝(conditioning)이라고 한다. 펄스의 크기를 점점 증가시킬수록 이력 폭은 점점 줄어들었으나 ρ_(xy)와 ρ_(xy)에서 예상하지 못했던 비등방성을 볼 수 있었다. 즉, ρ_(xy)에서는 이력현상이 완전히 사라지지 않는 반면 ρ_(xy)의 경우는 펄스의 크기가 2mA 일때 이력 폭이 완전히 사라졌다. 또한 이력폭이 사라지는 형태도 ρ_(xy)는 이력 폭이 점점 가운데로 좁아지는 모습을 보였고 ρ_(yx)는 자기장이 증가하는 경우의 홀 저항값에 수렴하는 형태를 보였다. 두 가지 형의 펄스를 가해보았으나 결과에는 아무런 차이를 보이지 않았으며 마찬가지로 펄스의 방향도 영향을 미치지 않았다. 이력현상이 펄스의 크기에만 영향을 받는 것은 결국 펄스에 의한 포텐셜이 영향을 미치는 것이라 볼 수 있는데 긴즈버그(Ginzburg)-란다우(Landau)이론을 도입하여 해석해보면 각각의 부위 상들이 갖는 에너지 상태들 사이에 포텐셜 장벽들이 존재하기 때문에 이력현상이 생기는 것이라고 볼 수 있다. 가해주는 펄스는 부위상들이 전이할 때 포텐셜 장벽을 넘을 수 있도록 도와주는 역할을 한다고 할 수 있으며 이러한 해석은 펄스의 크기를 증가시킬수록 이력폭이 줄어드는 결과를 잘 설명해준다. 그러나 ρ_(xy)와 ρ(_yx)의 비등방성은 아직 설명 할 수 없다.;In this thesis, the origin of hysteresis of quantum Hall effect in (TMTSF)_(2)ClO_(4) has been studied. Using the pulse conditioning method, we can reduce the hysteresis but ρ_(xy) and ρ_(yx) show different appearance each other. Indeed, in ρ_(xy) hysteresis decays exponentially to a finite value as pulse amplitude increases. To the contrary, hysteresis disappears completely in ρ_(yx) above 2 mA. Following the Ginzburg-Landau theory we understand that pulses play a role as help so that FISDW states can cross a potential barrier. Such an interpretation is in accord with the observation that the shape or direction of pulses has no effect on hysteresis behavior and character of N=3 state which is vanishes when decreaing magnetic field. Anisotropic property of ρ_(yx) is not yet explained.목차 = ⅰ 그림목차 = ⅲ 논문개요 = ⅴ 1. 서론 = 1 2. 이론 = 3 2.1 (TMTSF)_(2)CIO_(4)의 일반적인 성질 = 3 2.2 자기유도스핀밀도파 = 9 2.3 양자 홀 효과 = 16 3. 실험 = 25 3.1 실험방법 = 25 3.2 실험결과 = 33 3.2.1 a형 펄스를 더한 경우 = 33 3.2.2 b형 펄스를 더한 경우 = 38 4. 토의 = 41 4.1 펄스의 역할에 대한 이해 = 41 4.2 긴즈버그-란다우 이론에 의한 해석 = 45 5. 결론 = 49 참고문헌 = 51 Abstract = 5

    A qualitative research on inter married women’s perception and attitude toward raising children in their mother tongue and raising children as bilinguals

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    유입 이민자의 수가 단기간에 급속하게 증가하면서 한국 사회는 빠른 속도로 다문화 시대에 접어들었다. 그러나 한국이 단일민족, 단일문화, 단일언어 국가라는 오랜 전통적 믿음이 광범위하고 깊게 퍼져있어, 다문화 사회로의 전환 속도에 그 인식의 전환이 미치지 못하고 이러한 과정에서 여러 문제와 모순이 야기되고 있다. 본 연구는 이러한 문제의식에서 출발하여 다문화주의에 근거, 결혼 이민 여성으로 구성된 다문화가정에서 모어 육아 및 이중언어 교육이 필요하다는 관점에 따라 질적 연구를 진행하였다. 연구 대상자는 각각 베트남. 중국, 캄보디아. 태국, 필리핀 출신의 결혼 이민 여성으로, 나이는 평균 36.6세, 한국 거주 기간은 평균 8.8년, 평균 자녀수는 1.8명, 자녀의 평균 연령은 6.4세이다. 이들을 대상으로 빈구조화 면접, 심층 면접을 진행하였다. 연구 문제는 아래와 같다. 연구 문제 1. 결혼 이민 여성이 육아 시 사용하는 언어는 무엇이며 해당 언어를 사용하게 된 이유는 무엇인가? 연구 문제 2. 한국어로 육아하는 과정에서 느끼는 어려움과 우려는 무엇인가? 연구 문제 3. 모어 육아와 가정 내 이중언어 교육에 어려움을 미치는 요인은 무엇인가? 연구 문제 4. 사회적 지지 환경이 마련되었을 때, 모어 육아 및 가정 내 이중언어 교육을 실시할 의향이 있는가? 연구 대상자인 결혼 이민 여성들은 모두 가정에서 한국어를 사용하고 있었으며 자녀의 출생 시부터 한국어를 사용해 이들을 양육하고 있었다. 한국어가 낯설고 한국어 수준이 낮음에도 불구하고 한국어를 사용해서 자녀를 양육하게 된 것은 주변 가족 구성원에 의해 출신국 언어 사용을 제한받거나, 이들 스스로 주변의 비판적 시선을 우려하여 자신의 모국어를 사용하지 않았기 때문이다. 이들은 대부분 한국어 능력이 부족하여 자녀의 언어 습득에 미칠 악영향을 우려해 자녀에게 말을 거의 하지 않는다고 하였으며, 자녀를 양육하는 과정에서 자녀와의 상호작용에 어려움을 겪고 있었다. 언어 능력이 부족하여 자녀에게 전달하고자 하는 의미를 적절하게 표현하지 못했고 자녀는 어머니의 말을 건성으로 듣거나 소통 자체를 기피하는 경향을 보이기도 했다. 자녀들은 이들 여성의 출신국에 대하여 자연스럽게 인식을 하거나 긍정적인 느낌을 갖고 있기도 하였으나 어머니가 지닌 특수성 및 그 차이에 대해서는 미처 인식하지 못하기도 하였고, 연구 참여자 자신은 본인이 외국인이라는 사실이 자녀에게 어려움을 미치는 요인이 될 것을 두려워하는, 차이에 대한 두려움을 보였다. 이들은 모두 모어 육아 및 이중언어 교육을 희망하고 있었으며 실제로 양육 과정에서 모국어를 가르치려는 시도를 하였다. 그러나 대부분 자신의 모국어를 자녀에게 가르치기에는 너무 늦었다고 판단하여 자녀의 한국어 능력 신장에 더 많은 관심을 기울이고 있었으며 교육에 대한 부담감으로 인해 모어 육아 및 이중언어 교육을 적극적으로 고려하지 않았다. 공통적으로, 모어 육아 및 이중언어 교육에 대한 정책 제시 등 사회적 지지 기반 구축을 강력하게 희망하고 있었다. 정책적으로 모어 육아 및 이중언어 교육에 대한 필요성이 강조되면 가족의 지지를 얻기 용이할 것으로 보고 있었으며, 본인 자신이 느끼는 불안감 역시 줄어들 것으로 기대하는 것으로 나타났다. 본 연구는 연구 대상의 규모와 범위가 지극히 제한적이라는 점 등의 한계를 갖고 있지만 현재까지 진행된 다문화 관련 연구와는 다른 관점으로 결혼 이민 여성과 그 자녀에 대한 연구에 접근하였다. 질적 연구를 통해 다문화가정의 양육 및 언어 사용 환경에 대하여 현실적으로 파악하였고 모어 육아 및 이중언어 교육에 대하여 보다 본격적으로 논의할 수 있는 기반을 마련하였다는 의의를 지닌다.;The purpose of this qualitative research was to find out what inter married women, living in Korea with their Korean husband, think on raising children in their mother tongue and raising children as bilinguals. And to find the main factors that discourage them from using their mother tongue to their own children. Semi-constructed, in-depth interviews were conducted with 5 inter married women living in Seoul, Korea with their children and Korean husband. The participants were from Cambodia, China, Philippines, Thailand, Vietnam and the average age was 36.6 years. They have lived in Korea about 8.8 years and they have 1.8 children on average. The average age of their children were 6.4 years. Except one participant who lived with her parents in law other than her husband and children, all of the participants formed a nuclear family. The research explored the participants' perspectives and attitudes toward language use at home and interaction with children. The result of the study indicated that: 1.The participants use Korean at home because their Koran family urged them to use it even though the language is very strange to them. Some of them use Korean because they are afraid of being blamed by others of letting their children speak participants' mother tongue. One of them use both Korean and her native language to let children learn the mother's native language and understand the culture of their mother's country. All of them barely interact with their children because of the participants' low level of Korean. Most of them are afraid that they might have bad influence in children's language development. 2. All of the participant wants to teach their children their native language so that they can interact their children more. But the main factor which discourage them using and teaching their mother tongue to children was an anxiety about negative influence of the multilingual environment to the educational achievement of their child . 3. The participants are anxious because they cannot get proper and professional information especially on rearing. They strongly hope that the government give them a proper guide.Ⅰ. 서론 1 A. 연구의 필요성 및 목적 1 B. 용어의 정의 5 1. 다문화가정 5 2. 다문화주의 6 3. 모어(母語)와 모어 육아 7 C. 논문의 구성 9 Ⅱ. 이론적 배경 및 선행 연구 고찰 10 A. 이론적 배경 10 1. 어머니와 유아의 상호작용 10 2. 이중언어 사용과 이중언어 교육 11 3. 다문화주의 13 B. 선행연구 고찰 16 1. 어머니와 유아의 상호작용 16 2. 한국 내 다문화가정 양육 현황 20 3. 이중언어 교육 25 4. 다문화 환경에서의 이중언어 습득 및 교육 28 5. 한국 내 다문화가정 자녀의 언어 및 인지 발달 현황 33 6. 한국의 다문화 환경과 이중언어 교육 37 C. 연구문제 및 연구가설 41 Ⅲ. 연구방법 44 A. 연구방법 44 1. 질적연구 44 2. 질적면접 45 3. 반구조화 면접 46 B. 연구참여자 46 1. 연구참여자 선정 46 2. 연구참여자 47 C. 연구절차 48 1. 질문내용 선정 48 2. 사전 면접 49 3. 본면접 49 D. 분석방법 49 Ⅳ. 연구결과 및 논의점 51 A. 연구참여자 51 B. 의미 단위 범주화 56 C. 결과분석 58 1. 언어사용 58 2. 양육현황 61 3. 양육에 대한 부담 64 4. 모어 육아와 이중언어 교육 65 5. 정책적 방향 요구 69 Ⅴ. 결론 및 제언 73 A. 연구결과 요약 73 B. 연구의 제한점 및 후속 연구에 대한 제언 74 C. 한국어 교육에 대한 시사점 75 참고 문헌 77 부록 84 ABSTRACT 8

    A Validation Study on Factors Adversely Affecting Successful Support for Children with Low Achievement in Basic Academic Skills

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    요약본 연구는 기초학력부진 아동들을 위해 학교에서 제공하는 지원 프로그램에 대한 교사들의 반응을 중심으로 교육적 지원에 장애가 되는 요인들을 추출하여 이를 근거로 「기초학력부진 아동 지원의 장애요인」선별 척도를 개발하고 타당화하는 데 그 목적이 있다. 이 목적을 위하여, 1차년도 사전 질적 연구에서 심층 면담을 통해 드러난 요인들을 기초로 총 88문항의 설문지를 개발한 후, 기초학력책임제의 일환으로 보충지도반을 운영하는 서울시 공립 초등 129개교에 재직 중인 일반교사, 특수교사, 보충지도반 강사 등 총 440명을 대상으로 현장 검사를 실시하였다. 수집한 자료에 대해 신뢰도 분석과 탐색적 요인분석을 실시한 결과, 총 16개 문항이 제거되어 최종 72개 문항이 선별되었고, 각 요인에 대해 1~3개씩 총 16개의 하위요인이 추출되었다. 문항 제거 후, 본 척도의 문항 전체, 요인별, 하위요인별 내적일치도는 높은 것으로 나타났으며, 구조방정식 모형을 이용한 확인적 요인분석을 통해 구인타당도를 검토한 결과 본 연구의 가설 모형은 전반적으로 적합한 것으로 나타났다. 이로써 「기초학력부진 아동 지원의 장애요인」선별 척도는 기초학력이 부진한 초등학생들에게 보충 프로그램을 제공함에 있어 어려움은 무엇이고 어느 정도인지를 측정하기 위한 도구로서 적절한 심리측정적 속성을 확보한 것으로 판단된다. 이러한 연구결과로부터, 본 연구가 갖는 의의, 연구의 제한점 및 향후 연구 과제를 논하였다. The purpose of this study was to develop and validate the scale of factors adversely affecting successful support for children with low achievement in basic academic skills, which can be used at schools running the program for supplementary lessons. For this purpose, the scale was developed with items from the results of a previously conducted qualitative study. The complete form of the scale was given to a total of 440 elementary school teachers in order to confirm the reliability and validity as a useful measurement tool. Through the item analysis and exploratory factor analysis, 16 items were excluded from the scale and the final scale ended up with 8 factors, 16 sub-factors, and 72 items with high reliability. Through the confirmatory factor analysis using structural equation model, the scale appeared to have appropriate construct validity. In conclusion, it can be said that the newly developed scale in the present study ensured acceptable psychometric properties. Based on the results, future research directions were discussed

    Relationship between perceived nursing care role orientation, job characteristics, and turnover among nurses

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    지역사회 간호학과/석사[한글] 의료조직은 여러 전문직 인력이 함께 일하고 있는 조직체이므로 인적자원의 확보 및 유지가 병원경쟁력의 중요한 요인이 된다. 그러나 인적자원 중 30~40%를 차지하는 간호인력은 조직내에서 다양한 역할담당과 전문직으로서의 성장단계를 거치지 못하고 비용효과적인 경력단계에서 높은 이직율을 보이고 있다. 이에 본 연구는 경력 3년이하의 간호사가 인지하는 간호의 역할명확성과 간호업무의 직무특성을 파악하고 이직의도와의 관계를 분석하여 효율적인 인력관리에 대한 기초자료를 제공하고자 한다. 본 연구는 서술적 조사연구로서, 연구대상은 서울시 소재 2개, 경기도 소재 2개의 종합병원에서 근무하는 3년이하 경력을 가진 간호사 256명을 대상으로 하였다. 연구도구로 설문지를 이용하였으며 역할명확성 측정은 Jacqueline S.이 개발한 도구를 번역하여 사용하 였고, 직무특성은 Hackman과 Oldham에 의하여 개발된 도구를 사용하였다. 자료수집기간은 2002년 5월 10일부터 2002년 5월 24일까지 2주간이었으며 자료수집은 각 병원 간호부의 동의를 얻어 설문지를 총300부 배부하고 256부를 회수하였다. 수집된 자료는 SPSS/PC+를 이용하여 전산처리 하였다. 본 연구의 결과는 다음과 같았다. 1) 연구대상자는 간호업무에 대한 높은 역할명확성(70.3)을 보여주었다. 직무특성중에서는 과업중요성(11.02)과 피드백(10.23)을 높게 인지하였다. 이직의도는 14.5점(총20점)으로 매우 높게 나타내었다. 이직을 생각하는 가장 큰 요인으로는 불규칙한 근무시간이라고 하였다. 2) 연구대상자 역할명확성의 하위영역에서 간호사/환자요인은 근무경력에 따라 유의하였으며, 근무경력 1년미만의 대상자가 가장 높게 인지하였고, 협력요인은 경제상태에 따라 유의한 차이를 보여주었으며 경제수준을 중간정도라고 생각한 집단에서 가장 높게 인지하였다. 직무특성에서 기술다양성은 근무부서에 따라 통계적으로 유의한 차이가 있었고, 기타부서, 수술장, 내과계, 외과계의 순서로 높게 인지하였다. 과업중요성은 근무경력과 근무부서에서 유의한 차이를 보여주었으며, 근무경력에서 1년미만의 대상자가 과업중요성을 가장 높게 인지하였다. 근무부서에서는 산소아계, 중환자계, 내과계, 외과계의 순으로 높게 인지하였다. 과업정체성과 자율성은 통계적으로 유의한 변수가 없었다. 마지막으로 피드백은 근무경력이 증가하면 피드백도 높게 인지하였으며, 근무부서에서는 산소아계가 가장 높은 피드백을 인지하였다. 3) 일반적인 특성과 이직의도는 교육수준과 근무경력에 따라 유의한 차이를 보였다. 교육수준에서는 대학졸업자의 이직의도가 가장 높았었고, 대학원이상에서는 전체적인 이직의도는 낮은 반면 조건제공시 타직종으로의 이직의도가 가장 높았었다. 근무경력에서는 1년이상 2년미만의 간호사가 가장 높은 이직의도를 갖고 있었다. 4) 역할명확성, 직무특성, 이직의도와의 상관관계는 역할명확성이 증가하면 이직의도가 약간 감소하였으나, 직무특성요인은 이직의도와 유의한 차이는 없었다. 연구의 결과 이직의도는 역할명확성이나 직무특성보다는 근무경력과 교육수준에 따라 유의한 차이를 보여주므로 경력에 따른 차별화된 교육프로그램이 효율적인 인력관리를 위해 개발되어야 하며, 이직의 가장 큰 요인으로 생각하는 근무체계에 대한 다각적인 방법에 대한 연구가 필요하다. [영문] It seems that the security and maintenance of personnel resources may be functioned as one of the most important factors in the medical system, and the efficient management of nursing manpower would greatly contribute to the enhancement of competition. However, it is true that nurses have thus far neither played satisfied roles within their hospitals nor gone through proper growth stages, with a high rate of turnover at cost-effective experience stages. With this in view, the objective of this study focused on grasping for the role definition of the nurse and the job specificity of nursing perceived by those nurses with a short career, analysing their relationships with the intention of turnover and then providing basic data needed for efficient personnel management. For that purpose, sampled out from two third-level and two second-level medical institutions were nurses with a short career less than three years. Role definition was measured by the translated version of J. Stemple Role Definition Measurement Tool and job specificity by the Job Diagnosis Survey proposed in the theory of job specificity. The term of data collection ranged for two weeks from May 10, 2002 though May 24, 2002. The method of data collection depended upon the utilization of a self-filling-up questionnaire, questionnaire forms were distributed to the study subjects and withdrawn from them. The collected data were computerized using the SPSS/PC+ program. Results were revealed as follows: 1) The respondents showed a high cognition of the Nursing care role orientation. Job characteristics represented a high cognition of the significance of task (11.02) and feedback (10.23) but a low cognition of autonomy (9.17) and the variety of skill (8.30). A high response was disclosed of the intention of turnover by 14.52. One of the most greatest causes to take turnover into consideration was principally attributed to irregular working hours. 2) As for Nursing care role orientation in relation to the general characteristics of the study subjects, a high response was reflected from married status than single, a high academic career, a new nurse with less than one year of experience, an operation room. Autonomy/research factors, a subvariable of Nursing care role orientation, revealed a significant difference by working experience. As for work experience, the highest cognition of orientation was shown in new nurses with less than one year of experience. Collaborationn, a subvariable of role definition, revealed a significant difference by economic conditions, regards economic conditions, the medium degree showed the highest collaboration factor. Job characteristics not presented a statistically significant difference. But, subvariable of job characteristics, the variety of skill was significant in working departments, high cognition came in order of operation units, internal medicine and surgeries. Task identity did not disclose any significant variables and the significance of task was of the highest cognition among the respondents''s duties. What showed a statistically significant difference here was their working experience and department, as for work experience, the highest cognition of task significance was shown in new nurses with less than one year of experience and as for workplaces the highest cognition shown in order of ob&gyn/children units, intensive care units, emergency care units, internal medicine and surgeries. Furthermore, autonomy did not show any statistical significance but the Finally, feedback pointed out statistic significance in work experience and working departments. The higher their work experience, the higher feedback they showed, along with the highest feebback in ob&gyn/children units. 3) General characteristics and the intention of turnover represented a significant difference in work experience and academic careers. The highest intention of turnover came from one to two years, with the highest intention from college graduates. However, Institutions higher than graduate schools gave a low intention of turnover but the highest intention of turnover from one type to another type of occupation. 4)Correlations among Nursing care role orientation, job characteristics and the intention of turnover indicated that when Nursing care role orientation was on the increase, the intention of turnover was on the decrease but little correlation. Job characteristics factors did not point to statistically significance with the intention of turnover. However, the lowest intention of turnover was shown from those new nurses with less than one year of experience, while the lowest job specificity from the academic career higher than postgraduate courses with the highest intention of change of occupation to another type. As aforementioned, inasmuch as the intention of turnover and work experience reflected significant difference, it is needed to develop differentiated efficient educational programs varying with experience and prosecute follow-up studies of multilateral methods of the function of the working system in which turnover is functioned as one of the greatest factors.ope

    비트겐슈타인의『확실성에 관하여』에 나타난 데카르트적 회의주의와 확실성의 문제

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    학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :철학과 서양철학전공,1999.Maste

    (An) analysis of dental carries & obesity related characteristic between with and without school health nurse in elementery

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    지역사회간호학과/석사[한글] 본 연구는 양호교사 상주학교와 순회학교 초등학교 학생의 충치와 비만에 관한 교육 경험과 지식, 건강행위 이행의 정도 차이를 비교하기 위해 시도된 단면조사연구이다. 경기도에 소재 하는 도시·농촌 지역 초등학교 중 양호교사 상주학교와 순회학교 각 4학교를 표본 초등학교로 채택하였다. 자료수집은 각 표본 초등 학생 중 3, 4, 5, 6,학년 총 800명을 임의 표출하여 대상자로 선정하였다. 본 연구의 도구는 문헌고찰과 현재 초등학교 체육교과서, 보건교과서를 통해 개발하였으며, 전공교수 3인과 현직 양호교사 3인의 자문을 거쳐 질문지의 내용을 수정 보완한 후 질문지를 확정하였다. 질문지는 총 23문항으로 일반적 특성 5문항, 충치 관련 특성 8문항, 비만 관련 특성 9문항으로 이루어져 있다. 자료수집 기간 및 방법은 2001년 9월 1일부터 10월 31일 사이에 우편설문으로 이루어졌고, 800부를 배부하여 전부 회수하였으나, 회수된 질문지 중 결과분석이 부적당한 질문지를 제외하고 733부를 분석에 사용하였다. 자료 분석은 SPSSWIN 9.0 프로그램을 사용하였고, 빈도분석, (Chi-square)검정, 일원변량분석(One way Anova), t-검증, post-hoc test를 활용하여 분석하였다. 주요 분석 결과를 요약하면 다음과 같다. 첫째, 연구대상자 중 5학년이 전체의 8.2%로 가장 많았고, 6학년이 5.6%로 가장 적었다. 부모의 직업유무 대해서는 아버지가 직업을 가지고 있는 경우는 전체 대상자의 95.8%이었으며, 어머니가 직업을 가지고 있는 경우는 전체 대상자의 과반수가 넘는 55.5%였다. 연구 대상자중 95%이상이 부모와 함께 살고 있는 것으로 나타났다. 둘째, 충치 및 비만 예방 교육에서 연구 대상자의 70.2%가 충치 예방 교육, 35.1%가 비만 예방교육을 받았으며, 양호교사 상주학교와 순회학교 초등학생간 충치 및 비만 예방교육 경험은 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다. 셋째, 충치 및 비만에 관한 지식 중 , 충치에 관한 지식에서는 양호교사가 상주하여 교육하는 경우가 순회양호교사, 담임교사, 체육교사가 교육하는 경우보다 이 닦는 방법에 대한 지식과 치아 건강에 좋은 음식에 대하여 잘 알고 있는 것으로 나타났다. 또한 충치 예방 교육을 받은 경우가 그렇지 않는 경우에 비해 이 닦는 방법을 잘 알고 있는 것으로 나타났고 통계적으로 유의한 차이를 보였다. 또한 충치 교육 경험이 있는 경우가 그렇지 않은 경우에 비해 치과 치료 경험이 많은 것으로 나타났다. 비만에 관한 지식에서는 양호교사 상주학교와 순회학교간에 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다. 넷째, 충치 및 비만에 관한 건강 행위 이행에 대해서는 양호교사 상주학교와 순회학교간 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다. 다만, 양호교사가 상주하는 경우는 순회하는 경우보다 비만정도에서 표준체중의 20-30%이상인 경도비만이 전체 비만 중 가장 많았으며, 이에 비해 순회학교에서는 비만 정도가 표준체중의 30-50% 이상인 중등도 비만이 38.5%로 전체 비만 중 가장 높게 나타났다. 이상의 연구결과를 고려할 때, 초등학교 시기의 대표적인 건강문제인 충치와 비만에 있어서 충치 예방교육을 받은 초등학생이 충치 예방 지식을 많이 알고 있었고, 그 중 양호교사가 상주하여 교육하는 초등학생의 경우가 그렇지 않은 경우보다 충치 예방에 대해 더 잘 알고 있는 것으로 나타났으므로, 학생들의 건강 문제를 직접 중재하고, 지속적인 지도와 교육을 제공할 수 있도록 모든 초등학교에 양호교사가 상주할 수 있도록 해야한다. 또한 학교보건 사업에 대한 국가의 정책적인 뒷받침과 관심이 필요하다. [영문] The aim of the study is to search the influence of school nurses activities in elementary school students health care by comparing the students knowledge of cavity and corpulence and their accomplishment of health activities in the schools where nurse teachers reside, to that in the schools where nurse teachers patrol. Among the elementary schools in Kyunggi province, in both urban and rural areas, 4 schools where school health nurse reside and where they patrol were respectively selected as samples. The materials came from the arbitrary selection of 800 elementary students of the third, fourth, fifth and sixth grades, those who were attending the sample schools. The tool of the study was developed on the basis of the current physical education text and health education text used in elementary schools. Also the tool was corrected and revised by 3 professors of the same major field. Finally, the content and structure of the questionnaires were modified and reconstructed by three incumbent school health nurse advice and confirmation. The questionnaire was composed of 23 questions in total. Among them, there were 5 questions about general characteristics, 8 questions related with cavity, and 9 questions connected with corpulence. The period of collecting the material was from September 1, 2001 to October 31, 2001, and the method was processed through delivering mail questions. Among the questionnaires withdrawn, 733 were used for the analysis excluding the improper results. SPSSWIN 9.0 was used for the material analysis,(Chi-square), One way Anova, t -test and Post-hoc test was applied to examine. The summary of the main analysis result is as follows: First, Fifth grade of the object of the study is 8.2% the most numerous case, Sixth grade of the object of the syudy is 5.6% the lest numerous case. Most of the object of the study reside with the parent. Second, 70.2% out of the object of the study have got the education about the prevention against cavity, 35.1% have got the education against corpulence. There was no significant difference between the students in the schools where nurse teachers reside and where they patrol. Third, in the knowledge of cavity, the case that nurse teachers reside is better in knowing well the method to brush teeth and the food that is good for tooth health, than the case that nurse teachers patrol, or physical education or responsible teachers take charge of. In addition, it was statistically meaningful that getting the prevention instruction against cavity, the students are better informed about the way of tooth brushing than the opposite case. However, the study shows that those who have the experience of cavity education take dental treatment more frequently. In the knowledge of corpulence, there was no meaningful gap between the students in the schools where nurse teachers reside and where they patrol. Forth, in the fulfillment of the health activities about cavity and corpulence, there was little distinction. However, if nurse teachers reside, slight corpulence, 20-30% overweight from standard weight, was the most numerous case. On the other hand, if nurse teachers patrol, the rate of the middle corpulence , 30-50% overweight from standard, was 38.5%, the highest in the whole. Considering the study above, it does not matter seriously whether nurse teachers reside or not in cavity and corpulence, which are the major health problems in elementary school age. Nevertheless, the study indicates, when the students get the prevention education against cavity, they had more information about cavity prevention. Thus, it is essential that nurse teachers in every schools, who can directly mediate the students medical matters, and who can offer continual guidance and instruction. Also, governmental support and attention for school health are required.ope

    이옥 소품문의 작품 세계

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    학위논문(석사)--서울대학교 대학원 :국어국문학과 국문학전공,2004.Maste

    「집회 및 시위에 관한 법률」 상 소음규정에 대한 문제점과 개선방안

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