장티푸스 예방을 위한 효과적인 Vi 다당체 단백결합 백신의 개발과 접종 방법의 연구

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 협동과정 바이오엔지니어링 전공, 2012. 8. 박태현.저개발국가에서 장티푸스는 여전히 높은 발병률을 보이는 중요 질병으로 남아있다. 1995년 이후 승인된 Vi 다당체 백신이 20년 가까이 상용되고 있지만 이 다당체 백신은 2차 면역에 의한 memory B세포가 형성되지 않는 T 세포 비 의존성의 특성과 2세 이하의 소아에서의 면역성이 현저히 떨어지는 단점들을 가지고 있기에 본 연구에서는 Vi 다당체와 면역을 유도하는 단백질로서의 디프테리아 톡소이드를 결합한 Vi 단백결합 백신의 개발을 통해 소아에서 효과적인 장티푸스백신의 개발을 목적으로 하였다. Vi 단백결합 백신의 생산에 있어서 결합되는 Vi 다당체와 디프테리아 톡소이드 단백질의 비율은 결합의 수율을 결정하는 중요한 요소이다. 본 연구에서는 결합되는 단백질의 양을 조절하는 시도를 통해 여러 가지 크기의 Vi 다당체 단백결합 백신을 유도하였다. 결합되는 단백질이 증가할수록 단백결합 백신의 분자량의 크기가 커짐과 동시에 단백질이 결합된 Vi 다당체 사이의 교차 결합이 생성됨을 보였다. 이렇게 생성된 각각의 다른 크기의 단백결합 백신을 생쥐에서의 접종실험을 통해 단백결합 백신의 교차 결합 비율이 증가할수록 유도된 항 Vi 항체와 항 디프테리아 톡소이드의 항체의 생성이 증가함을 확인할 수 있었다. 특히 디프테리아 톡소이드와 결합된 Vi 다당체의 비율이 0.7이하에서 많은 수의 단백질이 부착된 교차결합의 비율이 증가하였고 그로 인한 강한 항 Vi 항체가 생성되었다. 이로써 Vi 단백결합 백신의 물리 화학적 특성과 그것을 통해 유도된 면역성의 연관성을 증명하였다. 현재 양산되는 다른 다당체 단백결합 백신에서 단백질과 결합되지 않고 남은 다당체가 백신 생산공정에서 제거되지 못할 경우 단백결합 백신의 면역반응을 억제한다는 일련의 결과들이 있었다. 그런 결과가 Vi 다당체 단백결합 백신도 적용되는지 확인해 보고자 하였다. Vi 단백 결합백신에 여러 비율의 Vi 다당체를 혼합하여 생쥐에 접종하여 면역성을 확인한 결과 면역억제의 반응을 보이는 다른 다당체 단백결합 백신의 결과와는 달리 Vi 단백결합 백신에 50%까지 혼입된 Vi 다당체는 Vi 단백 결합 백신에서 유도되는 항 Vi 항체보다 높은 수치를 보여 혼입된 Vi 다당체는 면역 증강제와 같은 효과를 가짐을 확인 하였다. 현재 접종되고 있는 Vi 다당체 백신을 접종했을 시 2차접종에서 보이는 면역억제반응은 잘 알려져 있는 결과이다. Vi 다당체 백신과 Vi 단백 결합백신을 여러 가지 백신접종의 순서로 생쥐에 접종해 보았을 때 1차 접종된 Vi 다당체 백신을 통해 억제된 면역성은 2차와 3차로 이어지는 Vi 단백결합 백신의 접종을 통해 면역성이 회복됨을 보였고 재 접종 없이 1차로 접종된 Vi 단백결합 백신으로 유도된 항 Vi 항체가 점진적으로 감소됨을 보였으나 항 디프테리아 항체는 12주까지 재 접종 없이도 항체의 양이 증가하였고 지속됨을 보이고 있었다. 그리하여 본 연구를 통해 확인한 결과인 Vi 단백결합 백신의 물리 화학적 특성과 면역성과의 연관관계와 Vi 다당체가 가지는 단백결합 백 신에의 긍정적은 효과는 백신의 대량생산에 활용하여 더 안전하며 항체생성 능력이 높은 단백결합 백신의 생산에 활용될 수 있겠다. 그리고 기존의 Vi 다당체 백신의 면역억제의 효과를 Vi 단백결합 백신으로 극복 가능하다는 결과를 통해 이 Vi 단백결합 백신이 저개발국가의 소아의 장티푸스 예방에 크게 도움이 될 것이라 생각된다.The incidence of typhoid fever still remains high in infants in many developing countries. Vi capsular polysaccharide vaccine was licensed in 1995 and has provided protection against typhoid fever, however this vaccine is not ideal as it does not induce immunological memory and does not induce an antibody response in infants less than 2 years of age. In this study, an improved vaccine, where the Vi polysaccharide was conjugated to a diphtheria toxoid (DT) carrier protein, was developed and evaluated for immunogenicity. One important factor in the Vi-DT conjugate vaccine is the ratio of Vi polysaccharide to DT in the final product. The physical and chemical characteristics of several conjugates were assessed using size exclusive chromatography and the results showed that the size and cross-linking formation of the conjugate increased when more DT was bound to the Vi. The Vi-DT conjugates were also evaluated for immunogenicity in mice and the results showed that highly cross-linked conjugate with the Vi/DT ratio of 0.7 induced a very strong primary anti-Vi response. This study establishes a correlation between the physico-chemical characteristics of the conjugate and the magnitude of the anti-Vi response. In some instances with other polysaccharide conjugates vaccine un-conjugated polysaccharide can inhibit the response induced by the conjugate. However, in this study, the presence of un-conjugated Vi polysaccharide, up to 50%, in Vi-DT conjugate vaccine did not negatively affect the anti-Vi response. Conversely, the presence of increasing amounts of un-conjugated Vi, up to 50%, administered with the Vi-DT conjugate resulted in increasingly higher levels of both anti-Vi and anti-DT response. Pre-exposure to Vi polysaccharide vaccine suppressed the response to subsequent doses of either Vi or Vi-DT conjugate vaccine. This immune suppression by pre-exposure to Vi could be overcome by two doses of Vi-DT conjugate vaccine. Following one dose vaccination of Vi-DT conjugate vaccine the anti-DT IgG response was strong and protracted and continued to rise for 12 weeks. Therefore the Vi-DT conjugate vaccine developed during this study could be used to vaccinate infants in developing countries. Due to the efficient and high yield of the process developed, this vaccine should be available at affordable prices for public health use in developing countries.Contents Abstract i List of Tables vii List of Figures ix Chapter 1. Research Background and Objective 1 Chapter 2. Literature Review 5 2.1. Typhoid fever and typhoid vaccine 6 2.2. Development of a conjugate vaccine for infants 7 2.3. Conjugation techniques for conjugate vaccines 8 2.4. Vi conjugate vaccine 10 2.5. Immunological properties of the conjugate vaccine 14 Chapter 3. Experimental Procedures 16 3.1. Purification of Vi polysaccharide 17 3.2. Quality control of Vi polysaccharide 18 3.3. Preparation of Vi-DT conjugates 18 3.3.1. Derivatization of the diphtheria toxoid as carrier protein 19 3.3.2. Conjugation of the diphtheria toxoid to the Vi polysaccharide 19 3.3.3. Diafiltration of Vi-DT conjugates using 300 kDa diafiltraion 20 3.4 Reagents and assay methods for the Vi-DT conjugation 22 3.4.1.Reagents for the Vi-DT conjugation 22 3.4.2. TNBS assay 22 3.4.3. Hestrin assay 23 3.5. Chemical and physical analysis of Vi-DT conjugates 23 3.6. Immunization of mice 23 3.7. Immungenicity study 24 3.7.1. Anti-Vi and anti-DT IgG antibody responses to Vi-DT conjugates 24 3.7.2. Immunoglobulin subclass analysis 25 3.8. Statistical analysis 25 Chapter 4. Evaluation of Various Vi-DT Conjugates for Immunogenicity 26 4.1. Evaluation of DT derivatizatization 27 4.1.1. Time dependent derivatization of DT and the effect of EDC 27 4.1.2. Influence of pH on the derivatization of DT 30 4.2. Preparation of Vi-DT conjugates using various derivatization levels of derivatized DT and EDC concentrations 33 4.3. Effect of the Vi and DT ratio on the conjugation 40 Chapter 5. Physico-Chemical Properties and Immunogenicity of Vi-DT Conjugate Vaccines 47 5.1. Introduction 48 5.2. Preparation of the derivatized DT carrier protein 49 5.3. Conjugation of the derivatized DT to the Vi polysaccharide 49 5.4. Chemical and physical analysis of Vi-DT conjugate vaccines 52 5.5. Immunogenicity of Vi-DT conjugate vaccines 57 5.5.1. Antibody response to Vi polysaccharide in the Vi-DT conjugate 57 5.5.2. Antibody response to DT carrier protein 60 5.6. Summary 63 Chapter 6. Adjuvant-like Effect of Unbound Vi on Immunogenicity of Vi-DT Conjugate Vaccines 65 6.1. Introduction 66 6.2. Vi-DT conjugate vaccines containing various amounts of un-conjugated Vi polysacchride 67 6.3. Influence of un-conjugated Vi in Vi-DT conjugate vaccine on immunogenicity 69 6.4. IgG subclass distribution following dosing with Vi-DT conjugate and un-conjugated Vi 73 6.5. Summary 75 Chapter 7. An Efficient Vaccination Strategy for using Vi-DT Conjugate Vaccines 76 7.1. Introduction 77 7.2. Immunization plan 79 7.3. Anti-Vi responses following different vaccination strategies 79 7.4. Anti DT responses following vaccination with the Vi-DT conjugate 83 7.5. IgG subclass distribution following conjugate or Vi inoculation 85 7.6. Summary 87 Chapter 8. Overall Discussion, Conclusions and Further Suggestions 88 8.1. Overall discussion … 89 8.2. Conclusions and futher suggestions 92 초 록 94 References 97Docto

The Change in the ratio of gesture utilization in children's grammar formation phase : Focusing on iconic gestures

The object of this research is to observe the change in the ratio of gesture utilization by categorizing children by age regarding 24 to 27 months old children through accurate detailed categorization of gestures. To analyze the ratio change of detailed gestures such as instrumental gestures, pointing, conventional gestures and iconic gestures as the age ofchildren increased, Ihaveused the MANOVA method, and to find out whether there are differences in the utilization oficonic gestures according to language developmen to feach child, Ihaveused the ANOVA method. Also, tofind out the existence of increase of iconic gestures according to language development, I have carried out hierarchical regression analysi. As a result, among deictic gestures, instrumental gestures and among representational gestures, conventional gestures respectively decreased as the age of children increased, and such gestures were used the most frequently among group 1, which was the youngestgroup. On the other hand, among deictic gestures, pointing did not show any sign if i cant changes regarding age, but it was the most frequent gestures used among detailed categorization ofgestures. Among representational gestures, the utilization oficonic gestures increased significantly according to children's age, and they were the most frequently used among group4, which was the oldest group. When looking attherel at ionship between language development and iconic gestures, the change of the frequency of utiliz at ion of iconic gestures according to languag edevelopment was significant, and even in situations where age was controlled, language development in dependently influenced the utilization frequency of iconic gestures by 14%, which is significant. Also, language development explains the frequency of iconic gestures better than the sole factor of age This research significantly explains the change in gesture utilization of children older than 24 months by accurate detailed categorization of gestures and strongly supports there lationship between iconic gestures and language development.;언어발달이 미숙한 아동은 몸짓과 단어를 함께 조합하여 다른 사람과 상호작용하지만,더 이상 발화를 보충하지 않아도 될 만큼 언어가 발달해도 몸짓은 사라지지 않고 계속 사용되는 중요한 의사소통 수단이다.그러나 24개월 이후 아동의 몸짓과 언어발달에 대한 연구는 많지 않으며,연구결과 역시 일관되지않다.이는 대부분의 연구에서 발달 양상이 다른 몸짓을 하나로 통합하는 등 몸짓의 세부 분류가 정확하지 못하여 몸짓의 유의미한 변화를 찾지 못한 것이다.예를 들면,선행연구에서는 관습적 몸짓과 참조적 몸짓을 주로 ‘표상적 몸짓’으로 단일하게 보았으나 관습적 몸짓은 월령이 증가함에 따라 사용 비율이 줄어들지만 참조적 몸짓은 늘어나는 경향이 있기에 이들을 하나로 본다면 의미 있는 결과를 얻기 힘들다.그렇기에 본 연구에서는 몸짓 발달의 유형을 정확히 세분화하여 월령이 증가함에 따라 몸짓이 어떻게 변화하는지를 살펴보고, 세부 몸짓 중 참조적 몸짓 사용이 아동의 언어발달과 관계가 있는지를 알아보고자 한다. 이를 위해 24~47개월 아동과 엄마 40쌍을 모집하여 가정집에 방문해 놀이도구를 사용하여 상호작용하는 모습을 25분간 녹화하였다.녹화한 자료를 통해, 몸짓은 지시적 몸짓-도구적 몸짓,가리키기-과 표상적 몸짓-관습적 몸짓,참조적 몸짓-으로 나누었으며,빈도를 이용한 선행 연구에서 아동의 개인차에 영향을 받아 결과에 유의미한 영향을 미친 것을 고려하여,아동 개인차에 영향을 받지 않도록 비율로 분석하였다.발화는 총 발화의 형태소의 수를 총 발화의 수로 나누어 평균을 구하는 MLU-M(Mean Length of Utterance in Morphemes)에 근거하여 분석하였다.월령이 증가함에 따라,세부 몸짓(가리키기,도구적 몸짓,관습적 몸짓,참조적 몸짓)사용 비율이 어떻게 변화하는지를 알아보기 위해 MANOVA를 사용하였으며,아동의 언어발달에 따라 참조적 몸짓 사용에 차이가 있는지 알아보기 위해 ANOVA를 실시하였다.또한,월령을 통제하고도 언어발달정도에 따라 참조적 몸짓 사용이 증가하는지를 알아보기 위해 위계적 회귀분석을 실시하였다. 그 결과,월령 집단에 따른 몸짓 사용 비율에 유의미한 차이가 존재하였다. 지시적 몸짓(deictic gestures)의 하위 몸짓인 도구적 몸짓(instrumental gestures)은 월령에 따라 사용 비율이 유의미하게 줄어들었으나,가리키기(pointing)는 월령에 따른 유의미한 차이는 나지 않았지만,세부 몸짓 중 가장 빈번하게 사용하는 몸짓이었다.표상적 몸짓(representationalgestures)의 하위몸짓인 관습적 몸짓(conventionalgestures)은 월령이 증가함에 따라 사용비율이 점차적으로 감소하였으나,참조적 몸짓(iconicgestures)은 유의미하게 많아졌다. 이는 선행 연구에서 표상적 몸짓을 참조적 몸짓과 관습적 몸짓으로 분류하지 않고 하나의 범주로 분석하였을 때에는 발견하기 힘든 부분이었다. 또한,아동의 언어발달에 따른 참조적 몸짓 사용 비율의 차이가 유의미하여 언어가 발달할수록 참조적 몸짓 사용 비율이 많았으며 ,월령을 통제한 후 언어발달이 단독적으로 참조적 몸짓 사용 비율에 영향을 주는 정도는 14%로 유의미하였다. 즉,월령과는 독립적으로 언어발달이 유능할수록 참조적 몸짓 사용비율이 증가한다고 볼 수 있으며,회귀계수의 유의미성에 있어 마지막 모델에서 월령은 유의미하지 않고,언어발달만 의미 있는 것으로 보아 월령보다 언어발달이 더 많은 설명량을 갖는다는 것을 알 수 있었다. 본 연구는 몸짓의 정확한 세부 분류를 통해 문법형성 단계인 24개월 이후 아동의 몸짓 사용 변화에 대한 의미 있는 결과를 도출하였으며,참조적 몸짓은 다른 몸짓과 다르게 월령에 따라 유의미하게 증가함을 알아내었다.또한 월령을 통제하고도 언어발달정도가 참조적 몸짓 사용에 유의미한 영향을 주고,월령보다 언어발달정도가 참조적 몸짓 사용 비율에 더 많은 설명량을 가진다는 결과를 통해 참조적 몸짓과 언어발달의 강력한 관계를 입증해주었다.Ⅰ. 서론 = 1 A. 연구의 필요성 및 목적 = 1 B. 연구 문제 = 5 Ⅱ. 이론적 배경 = 6 A. Reference와 상징 = 6 B. 몸짓 발달 = 8 1. 몸짓의 정의와 종류 = 8 2. 나이에 따른 몸짓 변화 = 10 C. 문법 발달 = 11 D. 언어 발달과 몸짓의 관계 = 14 1. 두 단어 골격형성 후 몸짓의 역할 = 14 2. 언어숙달에 따라 다른 몸짓의 역할 = 16 Ⅲ. 연구 방법 및 절차 = 18 A. 연구 대상 = 18 B. 연구 도구 = 20 1. 덴버 발달 선별검사 = 20 2. MCDI-K 유아용 = 20 3. 놀이 도구 = 21 4. 발화 및 몸짓 분석 기준 = 22 가. 몸짓 분석 기준 = 22 나. 발화 분석 기준 = 24 C. 연구 절차 = 24 D. 자료 분석 = 25 Ⅳ. 연구 결과 = 26 A. 아동의 언어발달과 세부 몸짓 사용 비율 = 26 1. 아동의 언어발달 = 26 2. 아동의 세부 몸짓 사용 비율 = 28 B. 아동의 언어발달과 참조적 몸짓 사용과의 관계 = 32 1. 아동의 언어발달과 참조적 몸짓 사용 = 32 Ⅴ. 결론 및 제언 = 37 A. 결과 요약 및 논의 = 37 B. 연구의 의의 및 제언 = 43 참고문헌 = 46 부록1. 아동 배경 정보 설문지 = 50 부록2. MCDI-K: 유아용 = 54 부록3. 발화의 구분 원칙 = 66 부록4. 형태소의 구분 원칙 = 67 ABSTRACT = 7

A Study on elementary school students’ satisfaction with their school social welfare utilization : Focusing on M elementary school in Seoul Area

The purpose of this study is to build a ground for enhancing and activating the effectiveness of school social welfare services, by examining conditions of school social welfare utilization and satisfaction with school social welfare utilization at large with high graders in elementary schools as its focus. I have established the following research issues for the purpose of this study. First, how are conditions of school social welfare utilization in accordance with elementary school high graders’ genders and grades? Second, how is elementary school high graders’ entire satisfaction with school social welfare utilization? Third, what are the factors having influence on the satisfaction with school social welfare utilization? For the implementation of the research issues, I have carried out a survey with 402 fifth and sixth graders. According to the results of this study through the survey, I have attained the following conclusions. First of all, on the side of the conditions of utilization, first, the existing methods of publicity for the office of school social welfare such as bookmarkers or posters have not achieved much effectiveness, and we can learn that publicity effectiveness for school social welfare differed by gender. Second, we can tell that peers’ influence is great on school social welfare utilization. On the other hand, given the fact that only one student reported that ‘parents’ recommendation’ was influential, parents’recognition of school social welfare has appeared to be low. Third, the lounge in the office of school social welfare has been found to quite greatly serve as a space for rest and play for students in a school with deficient play spaces. Fourth, as it has appeared that students most frequently participated in programs for preventing school violence, school social welfare may have positive influence on prevention of, and make solutions to, school violation. Next, with respect to the satisfaction with school social welfare utilization at large, first, the fact that satisfaction with great group program utilization, with utilization of the lounge inthe office of school social welfare, and with utilization of the office of school social welfare has appeared to be high at large means that the entire satisfaction with school social welfare utilization was high. Second, regarding the satisfaction with school social welfare office utilizationby programs, students showed the highest satisfaction when they used the office of school social welfare for individual consults, and they appeared to be satisfied with school social welfare office utilization as the average score of the satisfaction with school social welfare office utilizationin all of the programs was above 3.0. Thus, it seems that programs provided by the office of school social welfare were effectively operated for the students. Lastly, with respect to the factors having influence on the satisfaction with school social welfare utilization, first, all of the items received an average of 3.0 in the itemized analysis of the satisfaction with great group programs provided by school social welfare utilization, and especially those items related to teachers showed the highest satisfaction. Second, we can learn that there are differences in accepting great group programs in accordance with participants’ grades. Third, as a result of the itemized analysis of the satisfaction with school social welfare office utilization, though the average scores of all the question items were above 3.0, the responses to the question ‘is the office of school social welfare a place for help when you need a help?’showed relatively low satisfaction. Based on the results above, I come up with the following suggestions. First, a more effective method of publicity seems to be necessary escaping from the existing ones. Especially, study of publicity methods in consideration of genders in order to make effective publicity of the office of school social welfare for male children. Second, because peers’ influence is great on the utilization of the office of school social welfare, publicity through those students who have been using the office of school social welfare could be an effective method. Third, it is necessary to increase parents’ recognition of school social welfare in ways like active publicity of school social welfare and parent education. Fourth, for serious school problems like school violence, small group programs should be run simultaneously along with great group programs. Fifth, for program participation and sufficient time for program activities, which were somewhat behind in the ranking of question items about the satisfaction with great group programs, we should lead students to more positively participate in the programs, and reserve more time for program activities. Sixth, we should make up more of afterschool supplementary learning and summer vacation program administration, which were relatively low in satisfaction among other school social welfare office programs, and carry out various programs through research on students’ demands. Lastly, we should consider introduction of school social welfare as a solution to school problems as the fact that the students were highly satisfied with it at large means that it has positive influence on them. Given that school social welfare has positive impact on students, it will be helpful to introduce school social welfare for solving school problems and attaining ultimate goals for education.;본 연구의 목적은 사회복지서비스를 경험하고 있는 초등학교 고학년들을 중심으로 학교사회복지 이용 실태 및 전반적인 학교사회복지 이용 만족도를 알아보고 이러한 학교사회복지 이용 만족도에 영향을 미치는 요인을 분석함으로써 초등학교의 학교사회복지 서비스의 효과를 높이고 이를 활성화시키기 위한 기반을 마련하는 것이다. 본 연구를 위해 다음과 같은 연구 문제를 설정하였다. 첫째, 고학년 초등학생들의 성별과 학년에 따른 학교사회복지 이용 실태는 어떠한가? 둘째, 학교사회복지 이용에 대한 초등학교 고학년 학생들의 전반적인 만족도는 어떠한가? 셋째, 학교사회복지 이용 만족도에 영향을 주는 요인은 무엇인가? 연구 문제의 수행을 위하여 402명의 5, 6학년 학생들을 대상으로 설문조사를 실시하였다. 설문지 분석을 통해 얻어진 연구 결과에 따라 다음과 같은 결론을 얻었다. 우선 이용 실태 면에서는 첫째, 학교사회복지실의 인식 경로에서 ‘지나가다가 우연히 발견해서’라는 답이 가장 큰 비율을 차지하여 학교사회복지실 홍보의 효과가 기존의 책갈피나 포스터만으로는 큰 효과를 거두지 못하고 있으며, 성별에 따라 학교사회복지의 홍보 효과가 달라짐을 알 수 있었다. 둘째, 학교사회복지실 이용 이유에서는 ‘친구 추천’이라는 응답이 가장 많았는데, 이를 통해 학교사회복지 이용에 있어 또래의 영향력이 크다는 것을 알 수 있다. 반면에, ‘부모님의 추천’이라고 응답한 학생은 단 한명에 불과하여 학부모들의 학교사회복지에 대한 인식 정도가 낮았다. 셋째, 학교사회복지실 쉼터 이용률이 76.4%라는 높은 비율을 차지하고 있다는 점, 그리고 학교사회복지실 쉼터 이용 만족도가 높게 나타났다는 점을 연결 지어 생각해보면, 학교사회복지실 쉼터는 마땅한 놀이 공간이 부족한 학교에서 학생들에게 하나의 휴식 및 놀이공간으로서의 역할을 톡톡히 해내고 있는 것으로 보인다. 넷째, 학교사회복지실의 프로그램별 이용 빈도를 살펴보면, 가장 많이 참여한 프로그램은 학교폭력 예방 프로그램으로 나타나, 학교 폭력 문제를 예방하고 해결할 수 있도록 긍정적인 영향을 미칠 것으로 보인다. 다음으로 학교사회복지 이용의 전반적인 만족수준을 살펴보면, 첫째, 대집단 프로그램 이용 만족도, 학교사회복지실 쉼터 이용 만족도, 학교사회복지실 이용에 대한 전반적 만족도가 높은 것으로 나타났는데, 이는 학교사회복지 이용에 대한 전반적인 만족도가 높다는 것을 의미하는 것이다. 둘째, 프로그램별 학교사회복지실 이용 만족도에서 개별상담을 받기 위해 학교사회복지실을 이용했을 때가 가장 만족도가 높았으며 모든 프로그램별 학교사회복지실 이용만족도가 평균 3.0이상으로, 만족하고 있는 것으로 나타났다. 따라서 학교사회복지실 프로그램도 학생들을 대상으로 효과적으로 운영되고 있는 것으로 보인다. 마지막으로 학교사회복지 이용 만족도에 영향을 주는 요인에서는 첫째, 학교사회복지 대집단 프로그램 이용 만족도에 대한 문항별 분석에서 모든 응답에서 평균 3.0이 넘었으며 특히 교사관련사항이 가장 만족도가 높았다. 둘째, 학년에 따라 학교사회복지 대집단 프로그램을 받아들이는 데에 차이가 있다는 것을 알 수 있다. 셋째, 학교사회복지실 이용 만족도에 대한 문항별 분석 결과 문항별 평균이 모두 3.0을 넘었지만 ‘학교사회복지실이 도움에 필요할 때 언제나 도움을 받을 수 있는 곳인가’라는 문항에서 상대적으로 봤을 때 가장 만족도가 낮게 나타났다. 위의 결론을 토대로 다음과 같이 제언하였다. 첫째, 기존의 방법을 탈피한 보다 효과적인 홍보 방법이 필요할 것으로 보이며, 특히 남자아이들에게도 학교사회복지실에 대해 보다 효과적으로 홍보할 수 있는, 성별의 차이를 고려한 홍보 방법의 연구가 필요할 것이다. 둘째, 학교사회복지실 이용에 있어서 또래의 영향이 크기 때문에 기존의 학교사회복지실을 이용하는 학생들을 통한 홍보가 효과적인 방법이 될 수 있다. 셋째, 학부모에 대한 학교사회복지에 대한 적극적 홍보와 학부모 연수 등과 같은 방법을 통하여 학교사회복지에 대한 인식 정도를 높일 필요가 있다. 넷째, 학교폭력과 같이 심각한 학교 문제에 대해서는 대집단 프로그램과 동시에 소집단 프로그램을 운영해야 한다. 다섯째, 대집단 프로그램 만족도에 대한 문항에서 상대적으로 만족도가 낮은 프로그램 참여도와 프로그램 활동 시간의 충분정도에 있어서는 학생들의 프로그램에 대한 보다 적극적인 참여를 유도하고, 프로그램 활동 시간을 좀 더 확보해야 한다. 여섯째, 학교사회복지실 프로그램들 중에서 상대적으로 만족도가 낮은 방과 후 보충 학습과 여름 방학 교실 프로그램 운영을 좀 더 보완하고, 학생들의 요구 조사를 통한 다양한 프로그램들을 운영해야 한다. 마지막으로 학교사회복지 이용에 대한 전반적인 만족도가 높다는 것은 학생들에게 긍정적 영향을 준다는 것을 의미하므로 학교사회복지를 학교 문제의 해결방안으로써 도입하는 것을 고려해야 한다. 학교사회복지가 학생들에게 긍정적인 영향력을 행사하고 있다고 볼 때, 학교사회복지를 도입한다면 학교문제를 해결하고, 교육의 궁극적인 목표를 달성하는 데에 많은 도움이 될 것이다.논문개요 = viii 1. 서론 = 1 A. 연구의 필요성 및 목적 = 1 B. 연구문제 = 4 Ⅱ. 이론적 배경 = 7 A. 학교사회복지의 개념 = 7 B. 우리나라 학교사회복지의 발전 = 12 C. 학교사회복지의 실천 전략 = 15 D. 교육인적자원부의 교육복지 증진 및 학교폭력 예방을 위한 사회복지사 활용 연구학교 사업 (2004～2007) = 19 E. 선행연구 고찰 = 20 Ⅲ. 연구 방법 = 26 A. 연구대상 = 26 B. 조사도구 = 29 C. 자료 분석 방법 = 33 Ⅳ. 연구결과 및 분석 = 34 A. 연구 대상자의 변인별 분포 분석 = 34 B. 이용 실태 = 35 C. 학교사회복지 이용 만족 수준 = 46 D. 학교사회복지 이용 만족도에 영향을 주는 요인 = 47 Ⅴ. 요약 및 결론 = 55 A. 요약 = 55 B. 결론 = 58 C. 제언 = 60 참고문헌 = 62 부록-학교사회복지 이용 만족도에 관한 설문지 = 64 ABSTRACT = 7

환경스트레스에 의한 와편모류의 세포사멸프로그램(Programmed Cell Death)의 발현 특성

이 연구는 와편모류의 환경 스트레스에 의한 PCD 발현 특성을 연구하였다. 대상종은 Amphidinium carterae와 Cochlodinium polykrikoides이며 스트레스는 수온(10,20 30, 35℃)과 영양염 결핍(질산염, 인산염)으로 주었다. PCD 발현 특성은 Sytox-Greenstainning, Annexin V stainning, Caspase 3/7 assay를 하여 분석하였다. 실험 결과 A.carterae는 10℃와 35℃로 스트레스를 주었을 때 PCD가 발현한 것으로 보였지만, 영양염 결핍에 대해서는 발현됐다고 보기 어려웠다. 한편 C. polykrikoides 경우 스트레스로 인해 개체수감소 및 외부 형태 변화를 보였으나 PCD 발현 여부를 확인할 수 없었다.stainning, Annexin V stainning, Caspase 3/7 assay를 하여 분석하였다. 실험 결과 A.carterae는 10℃와 35℃로 스트레스를 주었을 때 PCD가 발현한 것으로 보였지만, 영양염 결핍에 대해서는 발현됐다고 보기 어려웠다. 한편 C. polykrikoides 경우 스트레스로 인해 개체수감소 및 외부 형태 변화를 보였으나 PCD 발현 여부를 확인할 수 없었다.2

적조피해 최소화를 위한 적조탐지,예측시스템 구축 및 실증화 최종보고서

□ 요약 ○ 실시간 유해 적조 탐지·예측 시스템 개발 - 해양 환경 및 기상 관측 자료 기반의 적조 발생 예보 (72시간) 알고리즘 연구 및 발생 예측 시스템 운용 기술 개발 - 유해 적조 음향탐지 시스템을 이용한 실시간 탐지 체계 구축 및 현장 운용 기술 적용 및 자료가시화 - 유해생물 원격탐사를 위한 GOCI 위성 및 초분광 특성 기술 개발 - 실증화 해역(통영, 여수, 거제)에 대한 GIS 기반 적조 정보 시스템 적용 - 다중 모델 앙상블 고해상도 해류 이동 모델 개발 및 적용 (150 m 격자) - 해류 모델과 생물 모델을 적용한 적조 이동 예측 기술 개발 및 적용 (72시간) - 신속 탐지 기법 등을 활용한 실시간 적조 예측 정보 보정 - 적조 발생, 이동 예측 모델 결과 비교 분석용 광역 및 고정점 조사 및 분석 ○ 실시간 적조 탐지·예측 시스템 현장 적용 - 적조 정보 통합 및 가시화 체계 구축 및 운용 - (1차년도) 통영, (2차년도) 통영-여수, (3차년도) 통영-여수-거제 해역 적용 - 적용 : 실증화 해역 어민 양식장 및 연안 - 시스템 : 기상, 해양환경 및 적조 탐지 시스템 (해상 플랫폼), 자료 통합, 분석, 모델 운용 및 가시화 시스템 (육상 플랫폼) - 적용 기간 : 매년 하계 시기 3개월 - 시스템 가동률 : 96.3 % (하계 시기 3개월 기준 3년 평균) ○ 실시간 적조 정보 및 예보 서비스 시스템 구축 및 시범 운용 - 대상 : KIOST, 국립수산과학원, 지자체, 장비 운용 양식장 어민 - 서비스 방법 : SMS, 웹기반 홈페이지 - 정보 제공 : 실시간 적조 정보 자료, 72시간 예측 정보 (매 1시간) ○ 적조 정보 및 예보 서비스를 활용한 후속 적조 대응 방안 - 어류 방류에 활용할 FTP 기반 적조 생물 정보 제공 (국립수산과학원) - 장비활용 및 유지보수 방안을 위한 ILS 기반 유지 보수 방안 제시 - 사용자 만족도 조사 : 평균 79.8점으로 만족하는 수준임 (타 매체 64.6점) □ 연구의 목적 및 내용 1. 최종 목표 : 적조 피해 최소화를 위한 적조 탐지·예측 시스템 구축 및 실증화를 통한 실시간 적조 정보 서비스 제공 ○ 실시간 적조 탐지·예측 시스템 개발 ○ 실시간 적조 탐지·예측 시스템 현장 적용 ○ 실시간 적조 정보 및 예보 서비스 시스템 구축 및 시범 운용 ○ 적조 정보 및 예보 서비스를 활용한 후속 적조 대응 방안 2. 세부 목표 ○ 실시간 적조 탐지·예측 시스템 개발 - 해양 환경 및 기상 관측 통계를 이용한 예보 시스템 - 유해 적조 음향탐지 시스템을 이용한 실시간 탐지 - 원격 탐사(RS), GIS 기반 적조 정보 시스템 - 다중 모델 앙상블 적조 이동 예측 시스템 - 신속 탐지 기법 등을 활용한 실시간 적조 예측 정보 보정 ○ 실시간 적조 탐지·예측 시스템 현장 적용 - 대상 해역 : (1차년도) 통영, (2차년도) 통영-여수, (3차년도) 통영-여수-거제 - 적용 : 양식장 및 연안 - 적용 시스템 : 해양 기상 및 환경 탐지 시스템 (해상), 예측 시스템 (육상) - 예측 기간은 3일, 시간 간격은 1시간 이내 기준 ○ 실시간 적조 정보 및 예보 서비스 시스템 구축 및 시범 운용 - 대상 : 지자체, 관련 기관, 인근 어업인 - 서비스 방법 : SMS, 인터넷홈페이지, 스마트폰 앱 - 정보 제공 : 실시간 탐지 자료, 72시간 예측 정보 (매 1시간) ○ 적조 정보 및 예보 서비스를 활용한 후속 적조 대응 방안 - 장비활용 및 유지보수 - 사용자 만족도 조사 □ 연구개발성과 ○ 실시간 적조 탐지·예측 시스템 개발 - 해양 환경 및 기상 관측 자료 기반의 적조 발생 예보 (72시간 예측, 예측률 76.8%) 알고리즘 연구 및 발생 예측 시스템 운용 기술 개발 - 유해 적조 음향탐지 시스템을 이용한 실시간 탐지 체계 구축 및 현장 운용 기술 적용 및 자료 가시화 - 유해생물 원격탐사를 위한 GOCI 위성 및 초분광 특성 기술 개발 - 실증화 해역(통영, 여수, 거제)에 대한 GIS 기반 적조 정보 시스템 적용 - 다중 모델 앙상블 고해상도 해류 이동 모델 개발 및 적용 (150 m 격자) - 해류 모델과 적조 생물 모델을 적용한 적조 이동 예측 기술 개발 및 적용 (1시간 간격, 72시간 예측, 예측률 69.5%) - 신속 탐지 기법 등을 활용한 실시간 적조 예측 정보 보정 - 적조 발생, 이동 예측 모델 결과 비교 분석용 광역 및 고정점 조사 및 분석 ○ 실시간 적조 탐지·예측 시스템 현장 적용 - 적조 정보 통합 및 가시화 체계 구축 및 운용 - 연차별 적용 : (1차년도) 통영, (2차년도) 통영-여수, (3차년도) 통영-여수-거제 - 적용 해역 : 실증화 해역 내 어민 양식장 및 연안 - 적용 기간 : 매년 하계 시기 3개월 - 시스템 가동률 : 96.3 % (하계 시기 3개월 기준 3년 평균) - 무인체를 이용한 적조 탐지 가능성 제시 ○ 실시간 적조 정보 및 예보 서비스 시스템 구축 및 시범 운용 - 대상 : KIOST, 국립수산과학원, 지자체, 장비 운용 양식장 어민 - 서비스 방법 : SMS, 웹기반 홈페이지 - 정보 제공 : 실시간 적조 정보 자료, 72시간 예측 정보 (매 1시간) ○ 적조 정보 및 예보 서비스를 활용한 후속 적조 대응 방안 - 장비활용 및 유지보수 방안을 위한 ILS 기반 유지 보수 방안 제시 - 어류 방류에 활용할 FTP 기반 적조 생물 정보 제공 (국립수산과학원) - 사용자 만족도 조사 : 평균 79.8점으로 만족하는 수준임 (타 매체 64.6점) □ 연구개발성과의 활용계획 (기대효과) ○ 개발된 요소 기술을 이용하여 실시간 적조 탐지 및 예보 기반의 통합 시스템 시범 구축 운영 및 남해 연안역 구축에 활용 ○ 국립수산과학원 적조 종합상황실과의 연계를 통한 효율적인 적조 관리 및 실시간 정보 제공에 횔용 ○ 적조 이동 예측 정확도 향상을 위한 후속 R&D의 원천 기술 활용 ○ 해양생물 관련 ICT 기반 해양과학 기술, 웹기반 가시화 기술, 해양무인체 적용기술, 해양생태계 실시간 모니터링 기술 등에 요소기술 활용1. Final goal: Real-time service of red-tide information through construction and demonstration of red-tide detection and rediction system to minimize the damage by red-tide outbreak ○ Development of red-tide detection and prediction system in real-time ○ Field application of red-tide detection and prediction system in real-time ○ Demonstration and pilot operation of red-tide information and prediction service system in real-time ○ Utilization plan of follow-up using red-tide information and prediction system 2. Specific goal ○ Development of red-tide detection and prediction system in real-time - Prediction system using observation statistics of ocean environment and weather - Real-time detection using harmful red tide acoustic sensing system - Remote sensing (RS), GIS-based red tide information system - Multi-model ensemble red tide movement prediction system - Correction of red-tide prediction information in real-time using rapid detection technique ○ Field application of red-tide detection and prediction system in real-time - Case ocean sites : Tongyeong (1st year), Yeosu-Tongyeong (2nd year), Geoje-Yeosu-Tongyeong (3rd year) - Application : fish farming area and coastal oceans - Application system : ocean weather and environment detection system (in ocean) and prediction system (in land) - Prediction time within 3 days, detection interval within 1 hours ○ Demonstration and pilot operation of red-tide information and prediction service system in real-time - Used by : local government, research institute, and fishermen - Service methods : SMS, internet webpage, application of cell phone - Information supply : real-time detection data, 72-hour forecast information (every 1 hours) ○ Utilization plan of follow-up using red-tide information and prediction system - Plan of application and maintenance system - User satisfaction survey □ Results ○ Development of red-tide detection and prediction system in real-time - Research of red-tide occurrence prediction (72 hours) algorithm based on ocean environment and weather observation data and development of operation prediction system operation technology - Real-time detection system using harmful red-tide acoustic sensing system, application of field operation technology and data visualization - Development of GOCI satellite and hyperspectral characteristics technology for remote sensing of harmful organisms - Application of GIS-based red-tide information system to demonstration oceans (Tongyeong, Yeosu, Geoje) - Development and application of multi-model ensemble high-resolution current movement model (150 m grid) - Development and application of red-tide movement prediction technology using ocean current model and biological model (72 hours) - Correction of red-tide prediction information in real-time using rapid detection technique - Investigation and analysis of wide area and fixed point for comparative analysis of red-tide occurrence and movement prediction model results해양수산과학기술진흥