김치에서 분리한 EPS 생성 Leuconostoc garlicum을 이용한 요구르트 제조

학위논문 (석사) -- 서울대학교 대학원 : 국제농업기술대학원 국제농업기술학과, 2021. 2. 정동화.Exopolysaccharides (EPS) produced by lactic acid bacteria (LAB) are used to modify the rheological, physical, and sensory properties of fermented milk. Leuconostoc garlicum KCCM 43211 isolated from Kimchi is known as highly viscous EPS producing LAB. However, the effects of EPS produced by L. garlicum KCCM 43211 in fermented milk and its structural characteristics have not been studied. The overall objective of this study was to determine the influence of EPS produced L. garlicum KCCM 43211 on rheological properties of fermented milk and investigate the physicochemical characteristics of EPS (Chapter 2). After that, we studied the effects of pre-fermentation with L. garlicum KCCM 43211 on yogurt properties during the storage at 4 °C for 28 days due to the potential application of L. garlicum KCCM 43211 for yogurt production (Chapter 3). L. garlicum KCCM 43211 were grown in raw milk and homogenized milk for 48 h at 25 °C with 100 rpm shaking in the presence or absence of sucrose. Cell growth, pH variations, EPS production and rheological properties were measured during 48 h fermentation. The results showed that viable cell count reached to 108 - 109 CFU/mL and a decrease in pH followed by an increase in bacteria was observed during fermentation for all four fermented milks. EPS production was not observed in fermented milks without sucrose. With 10% sucrose, L. garlicum KCCM 43211 produced 22.91 to 27.29 g/kg medium of EPS. Viscosity was also no changes without sucrose, meanwhile, increased 1.08 to 3.22 cP and 1.29 to 2.93 cP in raw-milk fermented milk and homogenized-milk fermented milk, respectively. EPS production and the rheological analysis showed that EPS increases the viscosity in fermented milk. To investigate the physicochemical properties of EPS, EPS was isolated from fermented milk made with raw milk 10% sucrose and purified. EPS produced by L. garlicum KCCM 43211 was identified as linear α-(1→6) dextran with 2.9 × 106 Da of molecular weight. In the chapter 3, The effect of EPS on the storage stability of yogurt was investigated at raw-milk yogurt and homogenized-milk yogurt. For pre-fermentation, L. garlicum KCCM 43211 was inoculated on raw milk and homogenized milk containing 10% sucrose and incubated for 12 h at 25 °C with shaking. After 12 h, yogurt samples were prepared by yogurt starter culture. Viable cell changes, pH variations, total solids, color differences, water holding capacity (WHC), EPS concentration, and rheological properties are studied during 28 days of refrigerated storage for all four yogurt samples. Viable cell counts decreased and pH also decreased from 4.59 – 4.60 to 4.20 – 4.30. Total solids content showed no significant difference for all samples during storage. In addition, the presence of EPS did not affect the color. The WHC results showed that homogenization treatment could be an effective factor to develop the water-holding ability of the gel network, which prevents syneresis during storage. There was slight decrease (0.4 - 0.5 g/kg medium) of EPS concentration in both yogurts (pre+main), which indicated no degradation of EPS during long cold storage. Results from flow curve showed pseudoplastic (shear thinning) behavior for four yogurt samples. There was no significant difference of apparent viscosity by storage time. However, yogurts containing EPS showed an upward trend and smaller hysteresis loop after 14 days storage in temperature sweep measurement. The results show that the present EPS improve the viscosity of fermented milk in the preliminary stages of gelation (> pH 4.6), however, EPS effect could be screened in the strong gel network (< pH 4.6, homogenized-milk yogurt). Based on results obtained, EPS produced by L. garlicum KCCM 43211 could modulate physical and rheological properties of fermented milk with weak gel network.유산균이 생성하는 세포외다당류(EPS)는 발효유의 유변학적, 물리적, 관능적 특성을 조절하는데 사용된다. 김치에서 분리한 L. garlicum KCCM 43211은 높은 점도를 가지는 EPS를 생성한다고 알려져 있다. 하지만, 발효유 내에서 EPS의 효과와 EPS의 구조적 특징은 아직 연구된 바가 없다. 따라서, 본 연구의 목적은 L. garlicum 43211이 생성하는 EPS가 발효유의 유변학적 특징에 미치는 영향을 밝히고, 생성된 EPS의 물리화학적 특징을 연구하는 것이다(Chapter 2). 그다음, 요구르트 생성에 있어서 L. garlicum KCCM 43211의 잠재적 적용을 확인하기 위해 본 균주를 이용하여 전 발효를 거친 요구르트를 4 °C의 조건에서 28일 동안 저장하며 그 특징을 연구하였다(Chapter 3). 발효유를 제조하기 위해 자당의 유무에 따른 원유와 균질 우유에 L. garlicum KCCM 43211을 접종하여 25 °C, 100 rpm 진탕 조건에서 48시간 동안 발효시켰다. 48시간 발효 중 균의 성장, pH의 변화, EPS 생성 및 발효유의 유변학적 특성을 실험하였다. 생균수 측정 결과 모든 발효유에서 108에서 109 CFU/mL의 성장을 보였다. pH는 모든 발효유에서 발효 기간 동안 균주의 성장과 함께 감소한 것을 확인할 수 있었다. 자당을 함유하지 않은 발효유에서는 EPS의 생성을 관찰할 수 없었다. 하지만, 10% 자당을 함유한 발효유에서는 22.91에서 27.29 g/kg medium의 EPS를 생성한 것을 확인할 수 있었다. 자당을 함유하지 않은 발효유에서는 점도의 변화 또한 관찰되지 않았으며, 자당을 함유한 원유 생성 발효유는 1.08 cP에서 3.22 cP, 균질 우유 생성 발효유는 1.29 cP에서 2.93 cP로 증가하였다. EPS의 생성과 점도 변화의 결과는 발효유 내에서 EPS가 점도 증가에 영향을 주는 것을 보였다. EPS의 물리화학적 특성을 확인하기 위하여, 10% 자당을 함유한 원유를 이용하여 만든 발효유에서 EPS를 추출 및 정제하였다. 분석을 통해 L. garlicum KCCM 43211이 생성하는 EPS는 선형의 α-(1→6) 결합을 가진 분자량이 2.9 × 106 Da인 덱스트란인 것을 확인하였다. Chapter 3에서는 원유와 균질 우유로 생성한 요구르트의 저장안정성에 미치는 효과를 연구하였다. 10% 자당을 함유한 원유 및 균질 우유에 요구르트 균주를 접종하여 생성된 요구르트를 대조군으로 사용하였다. EPS를 함유한 요구르트를 만들기 위해, L. garlicum KCCM 43211을 이용하여 12시간 동안 25 °C, 100 rpm 진탕 조건에서 발효하였으며, 그다음 요구르트 균주를 접종하여 요구르트를 생성하였다. 네 종류의 요구르트를 28일 동안 냉장 보관하며 생균수 변화, pH 변화, 총 고형분 함량, 색 변화, 보수력, EPS 함량 및 유변학적 특성을 관찰하였다. 28일 저장 기간 중 모든 요구르트 샘플에서 생균수는 감소하였으며, 젖산의 생성으로 pH도 초기 4.59 – 4.60에서 4.20 – 4.30 수준으로 감소하였다. 총 고형분 함량은 저장 기간 동안 모든 샘플에서 유의적인 차이를 보이지 않았다. EPS의 존재는 색에도 영향을 미치지 않았다. 보수율의 결과는 균질화 과정이 젤 네트워크 내에서 저장 기간 동안 이수(syneresis)를 방지하며 보수 능력을 증진하는데 효과적인 요인이 될 수 있음을 보여주었다. 또한, 두 종류의 EPS 함유 요구르트에서 EPS가 약간 감소함을 보였고, 이는 긴 시간 저온 저장 중 EPS의 분해가 없음을 나타내었다. 흐름곡선의 결과는 네 종류의 요구르트 모두 유사가소성 유체임을 보여주었다. 저장 기간 동안 겉보기 점도의 유의미한 변화는 보이지 않았지만, 온도 변화 시험(temperature sweep test)를 통해 EPS의 존재는 14일 저장 기간 이후 겉보기 점도 상승 및 더 작은 이력 루프 (hysteresis loop)를 보여주며 요구르트의 유변학적 특성에 긍정적인 영향을 주었음을 확인할 수 있었다. 결과적으로, EPS는 젤 생성의 초기 단계(> pH 4.6)에서 발효유의 점도를 향상시키지만, 강한 젤 네트워크(< pH 4.6, 균질 우유 생성 요구르트)에는 그 효과가 가려질 수 있다는 것을 확인하였다. 이러한 결과를 바탕으로 L. garlicum KCCM 43211이 생성하는 EPS는 약한 젤 네트워크를 가진 발효유 내에서 물리적, 유변학적 특징을 조절하는 데 도움을 줄 수 있을 것이라 생각된다.Contents Abstract i Contents iv List of Tables ix List of Figures x Chapter 1 Research background 1 1. Lactic acid bacteria 1 1.1. Leuconostoc spp. 4 1.2. Leuconostoc garlicum 4 2. Exopolysaccharide (EPS) 6 2.1. Definition 6 2.2. Classification and structure 7 3. Fermented milk 10 3.1. Definition and classification 10 3.2. Yogurt 12 3.3. Classification of yogurt 12 3.4. Yogurt manufacture 15 3.4.1. Ingredient preparation 15 3.4.2. Pre-fermentation treatments 16 3.4.3. Fermentation 19 3.5. Formation of gel network during yogurt fermentation 20 3.6. Factors influencing physical properties of yogurt 24 3.6.1. Total solids 24 3.6.2. Heat treatment 24 3.6.3. Homogenization 25 3.6.4. EPS production 26 4. Interactions between milk protein and EPS 27 4.1. Protein-polysaccharide interactions 27 4.1.1. Attractive interactions 29 4.1.2. Repulsive interactions 29 4.2. Milk protein-EPS interactions 30 5. Overall objectives 32 Chapter 2 Characterization of milk fermentation by exopolysaccharide–producing Leuconostoc garlicum KCCM 43211 isolated from Kimchi 34 1. Introduction 34 2. Materials and methods 36 2.1. Materials 36 2.2. Preparation of fermented milks 36 2.3. Particle size analysis 39 2.4. Color and pH measurements 39 2.5. Determination of viable cell count 39 2.6. Determination of flow behavior and apparent viscosity 40 2.7. Isolation and purification of EPS 40 2.8. Monosaccharide composition of EPS 41 2.9. Molar mass determination 41 2.10. Nuclear magnetic resonance (NMR) spectra 42 2.11. Statistical analysis 42 3. Results and discussion 43 3.1. Effect of homogenization on milk properties 43 3.2. Effects of homogenization and sucrose on fermentation 47 3.3. Effects of homogenization and sucrose on apparent viscosity and EPS production 48 3.4. Characteristics of EPS produced by L. garlicum KCCM 43211 54 3.4.1. Monosaccharide composition 54 3.4.2. Molar mass of EPS 54 3.4.3. Chemical structure of EPS 54 4. Conclusions 62 Chapter 3 Effects of pre-fermentation with exopolysaccharide-producing Leuconostoc garlicum KCCM 43211 on yogurt properties during cold storage 64 1. Introduction 64 2. Materials and methods 66 2.1. Materials 66 2.2. Preparation of yogurt 66 2.3. Determination of viable cell count 69 2.4. Total solid measurement 69 2.5. Color and pH measurements 69 2.6. Determination of water holding capacity (WHC) 70 2.7. Isolation of EPS 70 2.8. Rheological analysis 70 2.8.1. Strain sweep test 71 2.8.2. Determination of flow behavior and apparent viscosity 71 2.8.3. Frequency sweep test 71 2.8.4. Temperature sweep test 71 2.9. Statistical analysis 72 3. Results and discussion 73 3.1. Microbial growth in yogurts during storage 73 3.2. pH of yogurts during storage 73 3.3. Total solids of yogurts during storage 74 3.4. Color of yogurts during storage 74 3.5. Water holding capacity of yogurts during storage 74 3.6. EPS production during storage 75 3.7. Rheological properties of yogurts during storage 79 3.7.1. Flow behavior and apparent viscosity 79 3.7.2. Frequency sweep behavior 79 3.7.3. Temperature sweep behavior 80 4. Conclusions 87 References 88 Abstract in Korean 109Maste

[Part 1] The DAG-responsive C1 domain as a drug development target [Part 2] Structure–Activity Relationship Studies of a Potent TRPV1 Antagonist

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 약학대학 약학과, 2016. 2. 이지우.[Part 1] Diacylglycerol (DAG) is a lipid second messenger produced through hydrolysis of phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate. Increased levels of DAG are translated into cellular signaling via signaling proteins including protein kinase C (PKC), RasGRPs, chimaerin, and protein kinase D which have a C1 domain, which functions as a DAG recognition motif. Based on the significant biological roles of the proteins, the development of selective agents capable of discriminating between them would have great therapeutic significance. Previously, we have demonstrated that DAG-lactones, which are rigidified structures derived from endogenous DAG, function as DAG analogs to potently bind to the C1 domain. Owing to the different lipid requirements of each C1-domain containing protein, the sets of side chains (R1 and R2) function as chemical zip codes in controlling biological activity and protein selectivity by creating a unique microenvironment surrounding the binding site. The overarching theme of this work is design, synthesis, and biological evaluation of DAG-lactone analogs varying in their side chains that have provided inspiration for selective interaction of specific C1-domain proteins based on their known, potent binding affinities. Firstly, a series of DAG-lactones having linoleic acid derivatives were evaluated their selectivity for PKC epsilon under standard lipid conditions (100% phosphatidylserine) as well as in the presence of a nuclear membrane mimetic lipid mixture. We find that selectivity tended to be enhanced in the presence of the nuclear membrane mimetic lipid mixture and, for our lead compound, report a selectivity of 32-fold. Secondly, DAG lactones having α-arylidene (R2) side chain were synthesized and evaluated its selective binding to RasGRP3 as compared to PKC isozymes (PKCα and PKCε). From the preliminary results, the α-methylindolidene DAG-lactone scaffold was selected and modified to enhance the discrimination between PKCs and RasGRPs. This study clearly shows that seemingly small structural modifications in the hydrophobic regions of these DAG analogs strongly contributes to their specific membrane interaction. [Part 2] A series of 2-substituted 4-(trifluoromethyl)benzyl C-region analogues of 2-(3-fluoro-4-methylsulfonamidophenyl)propanamides were investigated for hTRPV1 antagonism. The analysis indicated that the phenyl C-region derivatives exhibited better antagonism than those of the corresponding pyridine surrogates for most of the series examined. Among the phenyl C-region derivatives, the two best compounds 43 and 44S antagonized capsaicin selectively relative to their antagonism of other activators and showed excellent potencies with Ki(CAP) = 0.3 nM. These two compounds blocked capsaicin-induced hypothermia, consistent with TRPV1 as their site of action, and they demonstrated promising analgesic activities in a neuropathic pain model. The docking study of 44S in our hTRPV1 homology model indicated that its binding mode was similar with that of its pyridine surrogate in the A- and B-regions but displayed a flipped configuration in the C-region.Part 1. The DAG-responsive C1 domain as a drug target 4 ABSTRACT 5 1. INTRODUCTION 7 1.1 Diacylglycerol Signaling and C1 domain 7 1.2 DAG lactone 9 1.3 DAG-responsive proteins and their potential as drug targets 10 2. AIMS OF THE STUDY 14 3. PROTEIN KINASE C 15 3.1 Improtance of selective activation 15 3.2 Protein Kinase C epsilon 15 3.3 Results and discussion 18 3.4 Conclusion 29 3.5 Experimental 30 4. RAS GUANYL RELEASING PROTEINS 53 4.1 Results and Discussion 54 4.2 Conclusion 61 4.3 Experimental 62 5. REFERENCES 79 6. ABSTRACT IN KOREAN 89 Part 2. Structure–Activity Relationship Studies of a Potent TRPV1 Antagonist 90 ABSTRACT 91 1. INTRODUCTION 92 1.1 Pain 92 1.2 TRPV1 94 2. AIMS OF THE STUDY 96 3. RESULTS AND DISCUSSION 97 3.1 Previous research 97 3.2 Chemistry 99 3.3 In vitro activity 99 3.4 In vitro activity 108 3.5 Molecular Modleing 109 4. CONCLUSION 111 5. EXPERIMENTAL 112 6. REFERENCES 138 7. ABSTRACT IN KOREAN 141Docto

A study on fashion design by application of the botanical pattern From the roofing tile of unified Shilla Focused on cut work machine embroidery

A modern society is gradually becoming integrated and also globalized. With regard to this, The hybrid of culture, art and the lifestyle draws the attention to the traditional originality. Nowadays, regional characteristics and culture based on specific nationality gets higher reputation. This is backed up by that people gives higher scores on ethnic stuffs (Like ZENs). Therefore as Korean designer, many of our contemporaries would agree to the idea of making use of Korean traditional color in the modern garment design . In the era of united kingdom of Shilla, due to international trade with Dang dynasty which was famous of its splendid art, stylish pattern was dominant trend all over the peninsula. What we mostly have in our mind when we think of typical Korean fine art, would be ‘Beauty of the left blank’ which leads to the elegance. However with only glimpse of relics of shilla fine arts, it is no doubt flashness is the key to understand art of shilla. In the later stage, enthusiasm in the fine arts grew stronger, mostly in the aristocrat society, that many kinds of glamorous works of arts ,including stony building, emerged as leading style in this time. Unfortunately, many of them have been destroyed in the war between Japan and Chosun in Imjin year. What we can see here in this time are mostly the copies or restored pieces. This essay focuses on the botanical pattern laid in the roofing tile. We will further deal with one of the techniques used in cut&amp;amp;#8208;work machine embedding. The essay eventually concludes that embroidery was the typical showy style of Shilla. As a result of this study, the following findings have been obtained : first, Studies went on with researches through history, characters, and tried patterns on tiles and developing situations and the roofing tiles in property and their carved patterns have been studied. Second, a certain botanical patterns on behalf of the pattern have been subclassified intd different characteristics. Third, there are different specified into fashion designs applied to the cut&amp;amp;#8208;work machine embroidery pattern in terms of the country and there is a specific technique of its expression including its form. The botanical pattern carved on the roofing tiles during the united kingdom of Shilla. While the silk is selected sense of the kingdom’s brilliant. I have come to a conclusion as follows: First, the roofing tile of Korea has resulted in a possibility of the development and expression of modern clothing on the basis of the tradition by making a way of brilliant culture. Second, the cut&amp;amp;#8208;work machine embroidery is suitale technique expressing the roofing tiles of formative. Third, the pattern of roofing tile can have an effect on a selection of a new technique, and on a reformulation and recreation of modern clothing design. A more effortto apply botanically patterns can bring us into a preat effect on keeping our clothing field ahead pf the international competition. Thus, an incessant interest and a systematic study of our tradition can lead us into the development of various techniques and of taking precedence over the world in al clothing field.;세계화, 단일화되고 있는 현대사회에 있어서 전통과 문화는 새로운 예술의 창조적 기반으로 평가되고 있다. 그리고 복식 디자인은 생활의 향상과 더불어 인간의 욕구 충족과 필요성에 의해 보다 실용적이고 세련된 감각의 독창성을 갖는 디자인을 추구하게 되었다. 이에 본 연구는 통일신라시대의 와당을 중심으로 문양을 분석하여 이를 복식에 적용시켜 다양한 디자인 개발의 가능성을 제시하고 디자인 표현 모티브의 영역을 확대하는데 그 목적이 있다. 본 연구의 내용은 이론적 배경으로서 통일신라시대의 와당의 역사와 특징, 종류에 대하여 살펴보았으며 작품제작의 토대로서 통일신라시대의 와당의 식물문 문양을 분석하고 와당의 식물문과 컷워크 자수기법이 현대 복식에 어떻게 도입되어 표현되고 있는가를 살펴보았으며 이를 작품에 적용하였다. 본 연구의 방법은 이론적 고찰을 위한 문헌자료와 사진 참고자료를 수집하여 정리&amp;amp;#4510;분석하였고 이를 토대로 작품을 제작하였다. 작품제작은 통일신라시대의 와당의 식물문양을 중심으로 이를 컷워크 자수기법을 통하여 현대 여성 복식을 응용하여 실물 작품 8점을 제작하였다. 본 연구의 결과는 다음과 같다. 첫째, 통일신라시대 와당의 식물 문양을 복식에 적용함으로써 새로운 디자인 및 소재 개발의 모티브로서의 활용 가능성을 제시하였다. 둘째, 통일신라시대의 와당의 문양을 컷워크 자수기법을 응용하여 새롭게 반복, 재배여, 확대, 변형함으로써 이 문양이 단순히 건축적 요소가 아니라 복식에 있어서도 표현이 가능한 모티브임을 인식할 수 있었다. 셋째, 컷워크 기법을 활용하여 통일신라시대의 와당의 양각효과를 입체적으로 표현할 수 있었다. 넷째, 통일신라시대의 와당의 문양을 컷워크를 통한 투명과 반투명의 효과와 자수의 재질감 등을 통하여 고부가가치를 부여할 수 있는 다양한 소재 개발 가능성을 제시할 수 있었다.논문개요 = viii 1. 서론 = 1 1.1 연구의 목적 = 1 1.2 연구의 방법 및 내용 = 2 2. 와당의 이론적 고찰 = 3 2.1 와당의 역사와 특징 = 3 2.2 통일신라 와당에 나타난 문양의 종류 = 7 2.3 통일신라 와당에 나타난 식물문의 조형적 특성 = 12 2.4 통일신라 와당문양을 응용한 현대복식 디자인 = 15 3. 컷 워크 자수에 관한 고찰 = 21 3.1 기계 자수의 정의 및 특징 = 21 3.2 컷워크 자수 제작기법 = 24 3.3 컷워크 자수를 응용한 현대복식디자인 = 28 4. 작품제작 = 31 4.1 작품제작 의도 및 방법 = 31 4.2 작품 및 해설 = 34 5. 결론 및 제언 = 82 참고문헌 = 84 ABSTRACT = 8

Pharmacokinetics of acetaminophen and its metabolites in normal and pseudo germ-free rats

The gut microflora affects host’s physiological activities including absorption, distribution, metabolism and excretion of the drugs and other xenobiotics. To see how the gut microflora affects the drug metabolism, acetaminophen (APAP) was administered orally and its pharmacokinetics was compared in normal and pseudo germ-free rats. For this study, we developed a simple and effective LC-MS/MS method for the quantification of APAP and its 6 major metabolites. The analytes were separated through a C18 reverse phase column and quantitatively measured within 16 min run by LC-MS/MS. Validation parameters such as accuracy, precision, recovery, matrix effect and stability were found to be within acceptance criteria (within 15% in all QCs and within 20% in LLOQ), indicating that the assay is applicable to measure the concentrations in the range studied. As a result, we developed and validated LC-MS/MS assay method for the determination of APAP and its 6 metabolites in rat plasma samples using both positive and negative detection modes. Pharmacokinetic studies of APAP in pseudo germ-free and control rats were performed after the single oral administration of APAP at a dose of 200 mg/kg. Pseudo germ-free rats were prepared by oral administration of antibiotic cocktails (neomycin, streptomycin, bacitracin) twice a day at a dose of 200 mg/kg each for five days. Water was orally administered to control rats instead of antibiotics. Plasma was collected following the time schedules and analyzed using the validated LC-MS/MS method. The pharmacokinetic parameters of APAP and its metabolites were estimated by non-compartment model on WinNonlin?? program. The area under the plasma concentration-time curve (AUC) values of APAP and acetaminophen glutathione (APAP-Glth) in the pseudo germ-free group were significantly higher than the control group (p&amp;lt;0.05). To estimate the metabolic change, the AUCmetabolites/AUCAPAP was calculated. As a result, the AUCAPAP-Sul/AUCAPAP was significantly decreased in pseudo germ-free group as compared with the control group (p&amp;lt;0.01). The results indicated that the pharmacokinetics of APAP and its 6 metabolites could be altered by the presence or absence of gut microflora. And gut microflora may play important role in the metabolism of xenobiotics. It has been known that the liver is a major organ for the metabolism of most of drugs, but now the role of gut microflora in drug metabolism should be considered as well.;장내 미생물은 약물이나 다른 생체 이물의 흡수, 분포, 대사, 배설과 같은 숙주의 생리학적 활성에 영향을 미친다. 장내 미생물이 약물의 대사에 어떠한 영향을 미치는지를 알아보기 위해서, 아세트아미노펜(APAP)을 정상 대조군과 pseudo germ-free군에 경구로 투여하였고, 그것의 약물동태학적 특성을 비교하였다. 이를 위해 본 연구에서는 APAP과 이 약물의 6가지 대사체를 정량분석할 수 있는 간단하고 효과적인 LC-MS/MS 분석방법을 확립하였다. 분석물질들은 C18 역상 컬럼을 통해 분리하였고, LC-MS/MS를 이용하여 16분간 정량적으로 측정하였다. 정확도, 정밀도, 직선성, 특이성, 감도와 같은 밸리데이션 파라미터들은 모두 기준(모든 QCs에서 15% 이하, LLOQ에서 20% 이하)에 만족하였고, 이는 본 연구에서 확립된 정량법이 연구범위 내에서 측정되는 모든 농도에 적용될 수 있음을 의미하였다. 따라서, 본 연구에서는 흰쥐 혈장 내의 APAP과 6가지 대사체를 positive와 negative 검출모드를 이용하여 측정할 수 있는 LC-MS/MS 정량방법이 개발 및 검증되었다. APAP을 200 mg/kg 의 용량으로 pseudo germ-free군과 정상 대조군에 단 회 경구 투여한 후에 약물의 체내 동태를 검토하였다. Pseudo germ-free 쥐는 항생제 칵테일(네오마이신, 스트렙토마이신, 바시트라신)을 각 200 mg/kg 용량으로 5일간 하루에 두 번씩 경구 투여함으로써 준비하였다. 정상대조군은 항생제 칵테일 대신에 물을 동일한 방법으로 투여하였다. 약동학 실험을 진행하면서 정해진 시간 간격에 따라 혈액을 취하였고, 이 중 혈장성분을 분리하여 앞에서 검증된 LC-MS/MS 방법을 이용하여 분석하였다. APAP 및 그 대사체의 약물동태학적 파라미터들은 WinNonlin?? 프로그램의 non-compartment model을 이용하여 추정하였다. Pseudo germ-free 군에서 APAP 및 이의 글루타치온 포합체(APAP-Glth)의 AUC 값이 정상 대조군에 비해 유의적으로 높았다 (p&amp;lt;0.05). 대사의 변화를 추정하기 위해서 AUC대사체/AUCAPAP 를 계산한 결과, pseudo germ-free 군에서 AUCAPAP-Sulfate/AUCAPAP 이 정상 대조군에 비해 유의성 있게 낮은 수치를 보였다 (p&amp;lt;0.01). 이러한 결과들은 APAP 및 이의 6가지 대사체들의 약물동태학적 특성이 장내 미생물의 존재여부에 따라 달라질 수 있다는 것을 말하고 있다. 본 연구를 통해 장내 미생물이 약물과 같은 생체 이물의 대사에 중요한 역할을 하고 있음을 확인할 수 있었다. 따라서, 현재까지는 간이 대부분의 약물의 대사를 담당하는 기관으로 알려져 있으나, 앞으로는 약물의 대사에 있어서 장내 미생물 또한 중요한 역할을 할 수 있음이 인지되어야 할 것으로 사료된다.I. INTRODUCTION 1 1. Gut microflora 1 1.1 Types 1 1.2 Functions 2 2. Acetaminophen 3 2.1 Mechanism of action 3 2.2 Adverse effects 4 2.3 Metabolism 5 3. Objectives of the thesis 8 II. MATERIALS AND METHODS 10 1. Materials 10 2. Instruments 11 3. Analytical method 12 3.1 Liquid chromatography and mass spectrometric conditions 12 3.2 Preparation of calibration standards and quality control samples 14 3.3 Sample preparation procedure 14 4. Analytical method validation 16 4.1 Linearity 16 4.2 Precision and accuracy 16 4.3 Recovery and matrix effect 16 4.4 Stability 17 5. Animal experiments 18 5.1 Preparation of pseudo germ-free rats and control rats 18 5.2 Preparation of surgery 18 5.3 Collection of plasma samples 19 5.4 Enzyme activity assay for gut microflora 19 5.5 Serum biochemistry 20 6. Pharmacokinetic analysis 21 III. RESULTS 22 1. Analytical method validation 22 1.1 Sample preparation 22 1.2 Chromatography 22 1.3 Linearity 25 1.4 Extraction recovery and matrix effect 25 1.5 Limit of quantification 25 1.6 Accuracy and precision 25 1.7 Stability 26 2. Preparation of pseudo germ-free rats 33 3. Pharmacokinetics analysis 36 IV. DISCUSSION 46 V. CONCLUSIONS 50 REFERENCES 51 국문초록 62 감사의 글 6

정신장애인을 돌보는 노부모의 보호부담과 전문적 서비스 욕구에 관한 연구

정신장애인의 재활에 있어서 가족의 역할이 매우 크며, 대부분 정신장애인의 상당수가 성인이므로 그러한 보호부담은 주로 노부모에게 주어지고 있다. 이들 노부모들은 노년기에 접어들게 됨으로 인하여 노년기의 발달과정상의 이슈들로 인하여 일반 가족들이 경험하는 보호부담이나 전문적 서비스욕구와는 구별되는 특성들을 가지고 있지만, 보호부담과 관련한 기존의 연구들에서는 이들의 특징적인 발달단계를 고려한 연구가 드물었다. 이러한 문제의 인식 하에 본 연구에서는 정신장애인의 노부모라는 특성에 초점을 맞추어 정신장애인으로부터 받는 도움의 정도, 정신장애인과의 관계의 질, 평생계획 여부 등에 따른 노년기에 있는 정신장애인의 보호자가 경험하는 보호부담의 수준을 파악하고, 그들이 원하는 전문적 서비스 욕구는 어떠한지를 알아보고자 하였다. 이러한 연구결과를 토대로 하여 정신장애인을 돌보고 있는 노년기 보호자들을 위한 현실에 맞는 사회사업적 접근 및 방향을 제시하고 또한 이들을 위한 프로그램을 개발하는데 기초 자료로 제시하는데 목적을 두었다. 본 연구의 구체적인 의의는 다음과 같다. 첫째, 사회사업 영역 및 정신과 영역에서 지금까지 많은 연구자들이 가족부담에 관심을 가져 왔지만 부모의 노년기라는 특정시기의 특수한 욕구와 전문적 서비스 욕구에 대하여 중점적으로 연구한 적은 드물었으나, 본 연구에서는 이 시기의 대상자들을 고찰하였다. 둘째, 기존의 보호부담과 관련한 연구들에서의 부모가 정신장애인을 돌보는 것으로 인한 부정적인 결과에만 관심을 가져왔지만, 본 연구에서는 정신장애인의 부모에 대한 기여라는 부분을 보며 긍정적인 부분도 있음을 고찰하였다. 연구결과는 다음과 같다. 첫째, 본 연구에 참여한 정신장애인을 돌보고 있는 노부모들의 부담감 수준은 &amp;apos;약간 그렇다&amp;apos; 이상의 부담정도를 경험하고 있는 것으로 나타났으며, 객관적 부담감에 비하여 주관적 부담감의 수준이 더욱 높은 것으로 나타났다. 둘째, 본 연구에 참여한 정신장애인을 돌보고 있는 노부모들은 전문적 서비스의 욕구는 &amp;apos;약간 원한다&amp;apos; 와 &amp;apos;매우 원한다&amp;apos;의 중간 정도로 나타났다. 셋째, 교대자가 있는 경우가 객관적 부담감, 주관적 부담감, 총부담감이 낮았으나 전문적 서비스 욕구는 유의미한 차이가 없었다. 넷째, 의논상대가 비장애 자녀인 경우가 객관적 부담이 낮았다. 다섯째, 정신장애인의 유병기간이 5년 미만인 집단보다 5-15년인 집단의 객관적 부담감, 총부담감이 낮고, 다시 15년 이상의 부모의 객관적 부담감, 총부담감이 높았다. 여섯째, 정신장애인부터 받는 도움의 정도가 많은 경우 주관적 부담감, 총부담감이 낮았다. 여섯째, 부모와 정신장애인간의 관계가 만족스러운 경우 객관적 부담감, 주관적 부담감, 총부담감이 낮았다. 일곱 번째, 정신장애인의 평생계획이 있는 경우 주관적 부담감, 총부담감이 낮았다. 마지막으로, 평생계획의 종류로 형제들과 함께 사는 것으로 계획한 경우 객관적 부담과 전문적 서비스 욕구가 낮았다. 이와 같은 결론을 바탕으로 다음의 제언을 하고자 한다. 첫째, 정신장애인을 돌보는 노부모에 대한 적절한 상담 서비스가 필요하다. 둘째, 정신장애인과 그 부모, 그리고 정신장애인과 비장애 형제 간의 가족관계 개선을 위한 가족치료 혹은 상담 서비스가 필요하다. 셋째, 부모의 사후를 대비한 정신장애인의 평생계획이 필요하다. 마지막으로, 정신장애인이 지역사회 내에서 장기간 거주할 수 있는 소규모의 그룹홈이나 양질의 사회복지시설 등의 주거시설이 제공되어야 할 것이다;Since most of mentally disabled persons are grown up, the care burden for rehabilitation goes to their elderly parents. This kind of care burden is distinguished issues from the care burden and professionalservice demand that general family experience, as elderly parents in the family become senescent. However, there&amp;apos;s not many research concerning this kind of distinguished development stage in other research regarding care burden. Under this recognition, this research focuses on the fact that the person who takes care of mentally disabled is their elderly parents, and try to figure out the level of care burden they experience and the professional service they need. Consequently, this research proposes realistic approach based on social welfare, and presents basic material for developing program for the elderly parents who take care of grown up mentally disabled child. he major findings of the study were as follows: First, the level of the burden the elderly parents of mentally disabled persons have, participated in this research, is higher than &amp;apos;a little yes&amp;apos;. And the level of subjective care burden is higher than the objective care burden. Second, the level of professional service that elderly parents need is between &amp;apos;a little needed&amp;apos; and &amp;apos;definitely needed&amp;apos;. Third, in the case of having a shift, objective care burden, subjective care burden and total care burden are all low. Fourth, in the case of having not disabled children for counseling, the objective care burden is low. Fifth, the group whose childrenare having disorder less than 5 years showed low objective and total care burden compared to those who are having disorder more than 5 years to less than 15 years. Again, the group whose children are having disorder more than 15 years showed high objective care burden and total care burden. Sixth, in the case of elderly parents are assisted by mentally disabled child, the subjective care burden and total care burden are reveled low. Seventh, in the case of elderly parents have good relationship with their disabled child, the objective care burden, subjective care burden, total care burden are low. Finally, in the case of mentally disabled people has their permanency planning, subjective care Burden and total care burden are turned out low, and in the case of their permanency planning is living with siblings, the objective care burden and professionalservice demand are reveled low. Therefore, based upon this result, following implication can be drawn out. First, the proper counseling service is needed for elderly parents who take care of mentally disabled person. Second, the family therapy or counseling is needed to improve family relationship between mentally disabled persons and their parents, and mentally disabled persons and their not disabled siblings. Third, the permanency planning for mentally disabled persons is needed to prepare after their parents&amp;apos; death. Finally, the group home or qualified social welfare facility should be provided for mentally disabled persons so they can stay in community for a long term.Ⅰ. 서론 = 1 1. 문제제기 = 1 2. 연구의 목적 = 5 Ⅱ. 이론적 배경 및 문헌고찰 = 6 1. 정신장애인 가족의 부담 = 6 2. 정신장애인 가족이 필요로 하는 전문적 도움 = 10 3. 정신장애인의 부모의 보호부담과 전문적 서비스 욕구 = 12 Ⅲ. 연구방법 = 16 1. 연구대상 및 자료수집 = 16 1) 연구대상 및 표집방법 = 16 2) 자료수집 = 16 2. 측정 = 17 1) 보호부담 척도 (Care Burden Scale) = 17 2) 전문적 서비스 욕구 = 18 3) 응답자 및 정신장애인의 일반적 특성에 관한 질문 = 18 3. 연구분석방법 = 20 Ⅳ. 연구결과 분석 = 21 1. 연구대상자의 일반적 특성 = 21 2. 부담과 전문적 서비스 욕구의 정도 = 27 3. 일반적 특성에 따른 부담과 전문적 도움의 욕구에 대한 차이 = 35 Ⅴ. 연구의 논의 및 제언 = 48 1. 연구결과에 대한 논의 = 48 2. 연구의 사회사업적 함의 = 52 3. 연구의 제한점 및 제언 = 53 참고문헌 = 56 부록 : 설문지 = 61 ABSTRACT = 7

탄산칼슘 나노 구조체의 형태 제어에 관한 연구

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 화학생물공학부, 2011.2. 차국헌.Maste

Analysis of GyÖrgy Ligeti's <Lontano> (1967)

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 음악과, 2011.2. 이돈응.Maste

Design, Synthesis, and SAR of TRPV1 antagonist having indazole A-region

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 약학과, 2012. 2. 이지우.Transient receptor potential vanilloid 1 (TRPV1)은 비선택적 양이온 채널로, 주로 말초신경의 유해 수용체와 중추신경계에 분포하며 신경손상에 의한 만성통증에 중요한 역할을 하고 있다. TRPV1은 외인성 인자(vanilloid, capsaicin, resiniferatoxin 등) 와 내인성 인자 (arachidonic acid metabolite, anandamide 등) 그리고 열과 pH와 같은 물리, 화학적 자극에 의해 활성화 되며 통증의 전달과 조절에 주된 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 이 수용체에 대한 선택적인 길항제의 개발은 현용 진통제들이 가지는 한계를 극복할 수 있는 중요한 역할을 할 것으로 기대되고 있으며, 현재 여러 연구 기관에서 활발히 연구 되어 지고 있다. 다국적 제약회사인 Abbott사의 ABT-102 〔 1-(5-tert-Butyl-indan-1 -yl)-3-(1H-indazol-4-yl)-urea 〕의 개발과정에서 indazole구조의 화합물이 화학적, 약리학적 측면에서 기존의 화합물보다 좋은 활성을 보이는 것이 보고 되었다. 이에 본 연구실에서는 ABT-102를 선도 물질로 하여 A-region으로 다양하게 치환된 indazole 유도체를 가지고, B-region으로 acetamide, propanamide, 그리고 urea를 갖는 다수의 화합물을 합성하여, 선도 물질보다 강력한 길항효과를 갖는 화합물을 찾아내는 연구를 수행하였다.The vanilloid receptor TRPV1 is a homotetrameric, nonselective cation channel expressed on periperal sensory neurons and in the central nervous system abundantly expressed in nociceptors. It is activated by a wide variety of exogenous and endogenous physical such as capsaisin, aicd, and heat. TRPV1 is considered as a highly validated pain taget considering great effects of agonist and antagonist; TRPV1 agonists cause desensitization of TRPV1 channels which relieves pain behaviors in preclinical species, and antagonists relieve pain behaviors in rodent models of inflammation, osteoarthritis, and cancer. Blokade of TRPV1 activation by selective antagonists is under investigation in an attempt to identify novel agents for pain treatment. The design and synthesis of a series of novel TRPV1 antagonists with a variety of different indazole derivatives are described, and the evaluation of the Structure-activity relationships of a number of these compounds is reported.Maste

통화정책 충격이 환율에 미치는 영향 -시변 구조적 VAR을 통한 분석-

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 경제학부, 2017. 2. 김소영.본고에서는 미국의 긴축적 통화정책 충격이 미/영 환율에 미치는 영향이 Dornbusch(1976)의 오버슈팅(Overshooting)과 일치하는지를 분석하고자 하였다. 이를 위해 Primiceri(2005)의 확률적 변동성이 있는 시변 구조적 VAR(Time-varying structural VAR with stochastic volatility)을 통해 추정하였다. 특히, 통화정책 기조(Monetary policy stance)의 변화가 있는 시기와 이 외의 시기에 통화정책 충격에 대한 환율의 반응이 다른지를 분석하고자 하였다. 제로금리제약을 정확히 반영하기 위해 Wu and Xia(2016)의 잠재 정책금리(Shadow policy rate)를 함께 고려하였다. 이처럼 본고에서는 Volcker 시기와 세계금융위기 이후 제로금리제약의 시행과 같은 통화정책 기조의 변화가 있는 시기에 환율의 반응을 보고자 하였다. 본고의 분석 결과 확률적 변동성이 있는 시변 구조적 VAR의 경우 통화정책 기조의 변화와 무관하게 오버슈팅과 일치하는 모습을 보였으나, 변화가 있는 경우에 절상 폭이 이외의 경우보다 크게 나타났다. 이를 통해 통화정책 충격에 대해 외환시장이 상품시장보다 빠르게 조정되어 오버슈팅이 나타나며, 통화정책 기조의 변화가 있는 경우 예기치 못한 통화정책 충격에 대해 환율이 장기적 수준이 비해 크게 반응한 후 점진적인 시장의 조정 과정을 반영함을 의미한다. 나아가 방법론의 정확성을 확인하기 위해 확률적 변동성이 없는 시변 구조적 VAR과 베이지안 구조적 VAR(Bayesian structural VAR)을 비교하였다. 이를 통해 본고에서 적용한 확률적 변동성이 있는 시변 구조적 VAR이 통화정책 기조의 구조적 변화를 반영하여 통화정책 충격을 정확히 식별할 수 있다는 것을 밝혔다. 이에 따라 확률적 변동성이 있는 시변 구조적 VAR을 통해 환율의 반응에 대한 정밀한 분석을 할 수 있음을 시사한다.제1장.서론 1 제2장.선행연구 4 1.오버슈팅 4 2.지연된 오버슈팅 7 제3장.분석방법 및 분석결과 10 1.분석방법 10 2.분석자료 16 3.분석결과 19 제4장.결론 27 부록 29 1.추정 알고리즘 29 2.분석자료 출처 및 설명 35 3.강건성 검정 38 참고문헌 43Maste