Design, Synthesis, and Biological Evaluation of Novel Hypoxia Inducible Factor-1 alpha (HIF-1α) Inhibitors Targeting Angiogenesis

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 : 약학과, 2015. 2. 서영거.Deguelin은 여러 암세포 주와 형질변환세포에서 항암효과 및 혈관신생억제효과를 보인다. 본 실험실의 선행 연구를 통해 Deguelin은 ATP가 Hsp90에 결합하는 것을 방해하여 HIF-1α의 안정화를 막고 분해를 야기한다고 알려졌다. 산소가 정상적으로 공급되는 조건에서 HIF-1α는 유비퀴틴화되어 빠르게 분해된다. 하지만 저산소 조건일 때는 HIF-1α가 Hsp90에 의해서 안정화되기 때문에 분해되지 않고 축적되며, Hsp90의 도움을 받아 핵 내로 이동한 HIF-1α는 세포의 생존에 필요한 목적 유전자의 전사에 관여한다. 그 중 VEGF의 전사는 혈관신생에 매우 중요하게 작용하는데, 이는 암과 망막혈관질환의 주요 원인이 된다. 본 실험실에서는 선행 연구를 통해 Deguelin으로부터 다양한 유도체를 합성한 바 있으며, 그 중 뛰어난 HIF-1α 저해 효과와 혈관신생 억제 효과를 보이는 선도화합물인 SH1242을 도출해 내었다. 본 연구에서는 선도화합물 SH1242의 구조를 기반으로 하여 새로운 HIF-1α 저해제를 설계, 합성 및 생리활성을 평가하여 더 향상된 활성과 개선된 물리화학적 성질을 가진 신약후보물질을 도출하고자 하였다. 이를 위하여 과학적인 분자 설계를 바탕으로 SH1242을 두 부분으로 나누어 chromene을 포함하는 제 3세대 화합물과 chromene을 절단한 제 4세대 화합물을 합성하였다. 그 중 일부 화합물이 HIF-1α에 대한 웨스톤 전기영동분석(western blot analysis)과 relative luciferase assay에서 천연물 Deguelin, 선도화합물 SH1242과 비교했을 때 더 뛰어난 활성을 나타내었다. 이들 유도체가 혈관신생과 관련된 망막 질환에 적용될 수 있을 것이라 기대하며, 더 나아가 제 3세대, 제 4세대 화합물의 구조 수식을 통해 얻어진 정보를 조합하여 더욱 개선된 활성과 물리화학적 성질을 가지는 유도체를 도출할 수 있을 것이다.I. Introduction 1. Angiogenesis 1.1. Tumor hypoxia 1.2. Hypoxia inducible factor-1α and heat shock protein 90 1.3. Angiogenesis-related retinal diseases 2. Previous study (Deguelin and its analogue SH1242) II. Results and Discussion 1. Molecular design for novel HIF-1α inhibitors 2. Synthesis of novel HIF-1α inhibitors 2.1. Synthesis of dimetoxybenzene ring and benzylic position-modified analogues 2.2. Synthesis of terminal chromene-truncated analogues 3. Biological evaluations of novel HIF-1α inhibitors 3.1. Western blot analysis 3.2. Relative luciferase activity III. Conclusion IV. Experimental V. References VI. 국문초록Maste

Enhanced gefitinib sensitivity via the inhibition of polo-like kinase 1/FoxM1 signaling and autophagy

학위논문 (박사)-- 서울대학교 대학원 : 약학대학 약학과, 2019. 2. 강건욱.Epithermal Growth Factor Receptor-Tyrosine Kinase Inhibitor (EGFR-TKI)s have varied benefits such as higher potency and efficacy, relatively low cytotoxicity, and availability to oral administration compared to cytotoxic reagents. However, some of patients who received EGFR-TKIs remain on disease progression or relapse after archiving remission. Therefore, scrutiny of the mechanism and treatment for overcoming chemotherapy resistance is necessary. This dissertation deliberated on the elucidation of EGFR-TKIs resistance and the suggestion for amelioration of EGFR-TKIs sensitivity in non-small-cell lung cancer (NSCLC) and breast cancer. First of all, 4 NSCLC cell lines were cultured with gradually increasing concentration of either gefitinib or erlotinib supplements for 6 months. These cell lines acquired the resistance against either gefitinib or erlotinib in cell proliferation, and increased expressions of proteins which coordinate epithelial-mesenchymal transition (EMT) and cancer stemness phenotype. Gefitinib- resistant HCC827 (HCC827-GR) cells were shown to increase in cell migration, 3D spheroid formation, and tumor formation in nude mice compared to HCC827 parental cells. Moreover, both polo-like kinase (PLK) 1 and FoxM1 expression, which are essential for maintenance of cancer stemness, were increased. Genetic deletion of FoxM1 using siRNA transfection reduced cell proliferation, transwell migration, and 3D spheroid formation in HCC827-GR cells, while FoxM1 overexpression obtained gefitinib resistance in wild type HCC827 cells. BI2536 (a PLK1 specific inhibitor) reduced cell proliferation, 3D spheroid formation, and transwell migration in HCC827-GR cells. In HCC827-GR xenograft model, intraperitoneal injection of 10-30 mg/kg BI2536 twice a week suppressed both tumor growth and FoxM1 expression from immunohistochemistry compared to vehicle injection. G protein-coupled receptor 119 (GPR119) is responsible to secretion of incretin from small intestine and insulin from pancreas, but its role in cancer biology has not been investigated. Above all, GPR119 mRNA expression was detected in 8 breast cancer cell lines and protein expression was evaluated in 19 human breast tissues of 49 investigated samples. Gefitinib/GPR119 ligand treatment reduced both cell proliferation and in vivo tumor formation compared to gefitinib single treatment in MCF-7 cells. Besides, apoptosis markers, such as annexin-V positive cells or cleaved caspase-3/7 and PARP, were increased by Gefitinib/GPR119 compared to gefitinib alone. Furthermore, both LC3B II expression and autophagosome formation which are markers of functional autophagy induction were increased by gefitinib, but the cotreatment with GPR119 ligand inhibited autophagy in MCF-7 cells. This autophagy inhibition of GPR119 ligand was not observed in GPR119 knockout MCF-7 cells. Moreover, MBX-2982 (a GPR119 ligand) reduced total ATP amount and OXPHOS, but raised glycolysis in MCF-7 cells. Lactate which is a final product of glycolysis was accumulated in both cell lysate and medium incubated with MBX-2982, 20 mM　of lactate decreased LC3B II expression and facilitated cleaved caspase-3/7 activity in MCF-7 cells. In conclusion, long-term treatment of EGFR-TKIs promoted EMT/cancer stemness and resulted in the resistance, hence an approach via PLK1/FoxM1 signaling inhibition could dismiss the acquired EGFR-TKI resistance in NSCLC. Whereas, autophagy is facilitated against gefitinib, thus lactate produced by GPR119 ligand-stimulated glycolysis could enhance gefitinib sensitivity.EGFR 인산화효소억제제 (tyrosine kinase inhibitor, TKI)는 기존의 세포독성항암제에 비해 항암 효능이 뛰어나고 독성이 현저히 적으며 경구투여가 가능하다는 장점이 있다. 이러한 장점에도 불구하고, 일부 환자는 EGFR 인산화효소억제제에 반응하지 않거나, 암의 관해 후 재발하는 경우도 빈번하다. 그러므로, 항암제 내성기전을 연구하고 내성기전을 제어하는 약물을 발굴하여 항암제 감수성을 증가시키는 연구가 필요하다. 본 학위논문에서는, EGFR 인산화효소억제제 내성 폐암 및 유방암에서 내성기전을 탐구하고 치료방안을 제시하였다. 먼저, EGFR 표적항암제인 제피티닙 혹은 엘로티닙을 6개월동안 처리하여 배양한 비소세포성 폐암세포주를 구축하였다. 이들 세포주에서 세포성장을 측정하였을 때 제피티닙 혹은 엘로티닙 내성이 발현하였으며 동시에 상피간엽전환과 암줄기세포 활성에 관여하는 인자의 발현이 증가하였다. 제피티닙 내성 폐암세포주(HCC827-GR)에서 세포이동능이 증가하였으며 3차원 spheroid형성능과 누드마우스에서 암형성능이 증가하였다. 뿐만 아니라, HCC827정상 폐암세포주와 비교하였을 때, HCC827-GR세포에서 암줄기세포 활성 유지에 필수적인 효소와 전사인자인 polo-like kinase(PLK) 1 과 FoxM1의 발현이 증가하였다. FoxM1을 유전적으로 결손시킨 HCC928-GR세포는 암세포성장, 이동능, 및 암형성능이 대조군 대비 감소하였다. 반면, FoxM1을 과발현시킨 HCC827 정상 폐암세포주에서는 대조군 대비 제피티닙 감수성이 감소하였다. PLK1 선택적 억제제인 BI2536을 처리하였을 때, HCC827-GR세포의 세포성장과 이동능이 둔화되었으며 자사세포사멸이 나타났다. HCC829-GR이종이식 누드마우스에 주 2회 10-30 mg/kg BI2536을 복강투여 하였을 때, 종양의 부피가 유의적으로 감소하였으며, 암조직 절편 면역염색에서 FoxM1발현이 감소하였다. G protein–coupled receptor 119 (GPR119)는 소장에서 incretin분비 및 췌장에서 인슐린분비에 관여한다고 알려져 있지만, 암에서 기능은 알려진 바 없다. 유방암세포 8종에서 GPR119 유전자 발현을 관찰하였고, 인간 유방암 절편 면역염색에서49 샘플 중 19개 샘플에서 GPR119 발현을 관찰하였다. 유방암세포주에서, 제피티닙 단독처리에 비해 제피티닙/GPR119 리간드를 동시처리 하였을 때, 상가적인 암세포성장억제 효과가 나타났으며, 암세포자가 사멸 지표인 annexin V 전환, cleaved caspase-3/7 및 PARP가 관찰되었다. 한편, 제피티닙을 처리한 MCF-7세포에서 자식작용 활성지표인 LC3B II 발현 및 오토파고좀 생성이 증가하였다. 반면, 제피티닙 단독처리에 비해 제피티닙/GPR119 리간드를 동시처리 하였을 때, LC3B II 발현 및 형광표지 오토파고좀 생성이 감소하였다. GPR119 결손 MCF–7 세포주에서 MBX–2982의 자식작용 억제효과는 나타나지 않았다. 나아가, MBX–2982를 처리한 MCF–7 세포에서 총 ATP 감소 및 산화적인산화감소/해당증가를 관찰하였다. GPR119 리간드를 처리한 MCF-7 세포분획 및 배양배지에서 해당대사의 최종산물인 젖산의 축적이 관찰되었으며, 20 mM 농도의 젖산은 제피티닙에 의해 촉진된 LC3B II 발현을 감소시키고cleaved caspase-3/7 활성을 증가시켰다. 결론적으로, EGFR 인산화효소 억제제에 장기간 노출된 폐암세포는 상피간엽전환을 유도하고 암줄기세포기능이 활성화하여 암세포성장, 전이를 촉진한다. 이러한 항암제 획득내성은 암줄기세포 기능유지에 필수적인 PLK1/FoxM1 신호를 억제하여 치료할 수 있다. 또한, 유방암세포는 EGFR 신호가 억제될 때 자식작용을 유도하여 암세포의 생존을 유지한다. 반면, GPR119리간드는 해당대사를 촉진하여 젖산을 과다생성하고 축적된 젖산은 자식작용을 억제하여 제피티닙 감수성을 증가시킨다.목 차 국문초록 i 목차 iv List of Tables vii List of Figures viii List of Abbreviations ix I. 서론 1 II. 시약 및 실험방법 1. 시약 및 항체 6 2. 세포배양 6 3. 세포증식, 3D spheroid 증식 관찰 및 Caspase–3/7 활성 관찰 6 4. EGFR 유전자 돌연변이 분석 7 5. 단백질샘플 및 발현분석 8 6. mRNA 추출 및 발현분석 9 7. 세포이동능(cell migration) 평가 9 8. 유세포분석(flow cytometry) 9 9. 동물실험 10 10. FoxM1 과발현 및 결손 세포주 확립 11 11. Gene Expression Omnibus 및 Kaplan-Meier Plotter 11 12. Immunohistochemistry 12 13. 유방암조직분석 12 14. 주사전자현미경법(Transmission electron microscopy) 12 15. ATG7 siRNA 도입 13 16. 오토파고좀(autophagosome) 형광분석 13 17. GPR119 결손세포주 확립 13 18. cAMP 전사활성평가 14 19. 1H–핵자기공명 분석 14 20. 세포대사분석기 14 21. 통계분석 15 III. 결과 1) 비소세포폐암 세포주에서 제피티닙 내성발현 및 EGFR 수용체 동정 16 2) 제피티닙 내성 폐암 세포주에서 상피간엽전환 유도확인 20 3) 제피티닙 내성 폐암 세포주에서 암줄기세포 활성증가 22 4) 제피티닙 내성 폐암 세포주에서 PLK1 및 FoxM1 발현증가 및 암줄기세포 활성유지에 필수적인 FoxM1의 기능 26 5) 암줄기세포 활성유지에 필수적인 FoxM1의 기능 30 6) 유방암에서 GRP119수용체 발현 33 7) 유방암세포에서 GPR119리간드의 제피티닙 감수성 증가효과 37 8) 유방암세포에서 자식작용 촉진 및 제피티닙 내성발현 41 9) GPR119리간드의 자식작용 억제효과 44 10) GPR119리간드와 자식작용 대표조절신호 48 11) GPR119리간드가 암세포대사에 미치는 영향 53 12) GPR119리간드에 의해 증가한 젖산과 자식작용억제효과 58 13) GPR119리간드와 미토콘드리아 기능감소 62 14) 기존 젖산수용체와 무관한 GPR119리간드의 자식작용 억제효과 64 IV. 고찰 67 V. 참고문헌 73 VI. Abstract 86Docto

The Effect of Learner's Characteristics and Organizational Environmental Characteristics on the Effectiveness of Enterprise e-Learning

Nowadays, the enterprises invest in bringing up the professionals through the educational training for the purpose of a strategy for being survived within a change of the rapid environment and competition. In particular, as e-Learning has a variety of advantages, it tends to be quantitatively increased in the educational training of the enterprise. Thus, the study on effectiveness of which is actively implemented. The purpose of this study is to suggest the practical data to the trainees for raising the achievement of the enterprise education training after investigating the learner's cognition toward what the learner's characteristics and organizational environmental characteristics have an effect on the effectiveness of the enterprise e-Learning. The questions of this study are as followings. 1. What factors of the learner's characteristics can predicts the effectiveness (satisfaction, achievement) of the enterprise e-Learning? 1-1. What factors of the learner's characteristics (self-efficacy, career plan) can predict the satisfaction? 1-2. What factors of the learner's characteristics (self-efficacy, career plan) can predict the achievement? 2. What factors of the learner's characteristics can predicts the effectiveness (satisfaction, achievement) of the enterprise e-Learning? 2-1. What factors of the learner's organizational environmental characteristics (support of the manager, support of the co-worker, continuous learning culture) can predict the satisfaction? 2-2. What factors of the learner's organizational environmental characteristics (support of the manager, support of the co-worker, continuous learning culture) can predict the achievement? For this study, the survey was conducted to the learners who are taking the course of ‘[TRIZ] Creative problem solving skill’ among e-Learning courses being provided from S company. Total 167 questionnaires were finally analyzed. For the statistical analysis of the collected question data, SPSS 12.0 for Windows program was used. Multiple regression was implemented according to the questions of the study. The results of this study are as followings. First, as a result of implementing multiple regression, self-efficacy (β = .28, p < .001) was the meaningful factor for explaining the satisfaction. Second, as a result of implementing multiple regression, career plan was the meaningful factor for explaining the satisfaction(β = .29, p < .001) and the achievement(β = .26, p < .01). Third, as a result of implementing multiple regression, the support of the manager had an effect on the satisfaction(β = .26, p < .05). Fourth, as a result of implementing multiple regression, the continuous learning culture had an effect on the achievement(β = .22, p < .05) On the basis of these results, the following conclusion and viewpoint are produced. First, self-efficacy of the learner's characteristics is the factor of predicting the satisfaction out of the effectiveness of e-Learning. Accordingly, the trainees of enterprise education training should seek a solution for raising the learner's self-efficacy about the practice of educational training. Second, it is exposed that career plan of the personal characteristics is the factor of predicting the satisfaction and the achievement out of the effectiveness of e-Learning. It implies that it is to raise the effectiveness of the educational progress to embody the curriculum which is suitable for work characteristics and direction in responsible department of the enterprise education training and provide it to trainees. Third, in this study, it is exposed that the support of the manager and co-worker that is the characteristics of organizational environment is the factor of predicting the satisfaction. Also, it is exposed that the continuous learning culture and that is the characteristics of organizational environment is the factor of predicting achievement. The characteristics of organizational environment are likely to be the factor of the educational program through discussion about the previous study. Accordingly, the enterprise should endeavor to make the organizational culture as like the environment where highly appraising the change and innovation and attaching great importance to the education for an organization, encouraging the education, and maintaining the environment with a support and discussion. The limits of this study are as followings. First, the factors that have an effect on the effectiveness of the enterprise e-Learning in this study should be deemed and selected as the significant factors of the enterprise e-Learning effectiveness, however, all possible factors in this process cannot be included. Second, in this study, the satisfaction and achievement were measured for the effectiveness of e-Learning, however, it is needed to be aware of along with the learner's reaction, appraisal of the practical work application and its causes.;오늘날 기업들은 급속한 환경의 변화와 경쟁 속에서 생존하기 위한 전략으로, 교육훈련을 통한 전문인력양성에 투자를 하고 있다. 특히 이러닝은 여러 가지 장점으로 인해 기업의 교육훈련에서 양적인 증가 추세를 보이고 있으며, 이에 따라 그 효과성에 대한 연구들이 활발히 이루어지고 있다. 본 연구에서는 학습자의 개인특성 및 조직환경특성이 기업 이러닝의 효과성에 어떤 영향을 미치는지 파악해봄으로써 기업 교육훈련 실무자에게 교육훈련 성과를 높일 수 있는 실증자료를 제시해보고자 하였다. 본 연구의 연구문제는 다음과 같다. 1. 학습자의 개인특성(자기효능감, 경력계획) 중 기업 이러닝의 효과성(만족도, 성취도)을 예측하는 요인은 무엇인가? 2. 학습자의 조직환경특성(상사의 지원, 동료의 지원, 지속적 학습문화) 중 기업 이러닝의 효과성(만족도, 성취도)을 예측하는 요인은 무엇인가? 본 연구의 결과를 정리하면 다음과 같다. 첫째, 학습자의 개인특성 변인인 자기효능감은 만족도를 예측하는 유의미한 요인으로 밝혀졌다(β = .28, p < .001). 둘째, 학습자의 개인특성 변인인 경력계획은 만족도(β = .29, p < .001)와 성취도(β = .26, p < .01)를 예측하는 유의미한 요인으로 밝혀졌다. 셋째, 학습자의 조직환경특성 변인인 상사의 지원은 만족도를 예측하는 유의미한 요인으로 나타났다(β = .26, p < .05). 넷째, 학습자의 조직환경특성 변인인 지속적 학습문화가 성취도를 예측하는 유의미한 요인으로 나타났다(β = .22, p < .05). 이상의 연구결과를 토대로 다음과 같은 결론 및 시사점을 도출하였다. 첫째, 연구결과 자기효능감이 이러닝의 효과성 중 만족도에 영향을 주는 것으로 나타났다. 따라서 기업의 교육훈련 실무자는 교육훈련 실시에 대해 학습자들의 자기효능감(교육과정의 목표들을 충분히 달성해 낼 수 있다는 확신)을 높이는 방안을 강구해야 할 것이다. 둘째, 연구결과 경력계획은 이러닝의 효과성 중 만족도와 성취도에 모두 영향을 주는 것으로 밝혀졌다. 따라서 교육프로그램을 개발하기 전에 학습자들의 교육에 대한 요구조사(needs assessment)를 실시하고 이를 통해 학습자들의 직무와 경력에 맞는 교육프로그램을 개발해야 할 것이다. 또한 조직원의 경력계획에 대한 자료를 확보하여 관리하는 것이 도움이 될 것이다. 셋째, 본 연구에서는 학습자의 조직환경특성인 상사의 지원은 만족도에 영향을 주며, 지속적 학습문화 요인은 성취도에 영향을 주는 것으로 나타났다. 따라서 기업은 변화와 혁신을 높이 평가하고 교육을 중요시 하는 분위기, 교육에 대해 격려, 지원해주고 논의하는 분위기를 유지하는 것과 같은 조직풍토가 전제되도록 노력해야 할 것이다.Ⅰ. 서론 = 1 A. 연구의 필요성 및 목적 = 1 B. 연구문제 = 3 C. 용어의 정의 = 4 Ⅱ. 이론적 배경 = 9 A.이러닝의 기본개념 및 현황 = 9 1. 이러닝의 개념 = 9 2. 이러닝의 현황 = 10 3. 이러닝의 장점 = 12 B. 기업 교육프로그램의 효과성 = 13 1. 기업 교육프로그램의 효과성 평가모형 = 14 2. 기업 이러닝의 효과성 구성요소 = 17 C. 기업 교육프로그램의 효과성에 영향을 주는 요인 = 20 1. 기업 교육프로그램의 효과성 영향요인에 대한 논의 = 20 2. 기업 이러닝의 효과성에 영향을 주는 요인 = 28 D. 관련 선행연구 = 35 1. 학습자의 개인특성과 교육프로그램의 효과성 관련 연구 = 36 2. 학습자의 조직환경특성과 교육프로그램의 효과성 관련 연구 = 38 Ⅲ. 연구방법 = 41 A. 연구대상 = 41 B. 연구도구 = 43 C. 연구절차 = 49 D. 자료분석 방법 = 50 Ⅳ. 연구결과 = 52 A. 기술통계 결과 = 52 B. 상관분석 결과 = 54 C. 다중회귀분석 결과 = 56 Ⅴ. 결론 및 제언 = 62 A. 결론 및 논의 = 62 B. 연구의 제한점 및 제언 = 67 C. 연구의 시사점 = 69 참고문헌 = 71 부록 = 80 ABSTRACT = 8

F-18 플루디옥시글루코즈 양전자방출단층촬영기를 이용한 피질기저핵변성 환자 군에서의 국소적 뇌 포도당 대사의 평가

Dept. of Medicine/석사Backgrounds and Objectives: The corticobasal degeneration (CBD) is a neurodegenerative disease showing the progressive asymmetric extrapyramidal motor deficits, apraxia and cortical sensory loss. The asymmetric fronto-parietal cortical and subcortical hypometabolism was demonstrated in the previous F-18 deoxyglucose positron emission tomography (FDG PET) scan studies. We investigated the hypometabolic pattern of Korean CBD patients using quantitative FDG PET and voxel based comparison method. Methods: Twelve patients with CBD and 16 age-matched controls were included in this study. Quantitative brain FDG PET and magnetic resonance imaging (MRI) scan studies were performed simultaneously in all subjects. For better spatial normalization of PET image, individual MR image was used for the normalization template. Using the group comparison model in the Statistical Parametric Mapping 2 (SPM) software, we compared the local glucose metabolism between the CBD patients and normal controls. Results: The global glucose metabolic activity of the CBD patients was significantly lower than that of controls. In SPM analysis, the CBD patients showed significantly decreased glucose metabolism in the fronto-parieto-temporal cortices, thalamus and caudate nucleus. The contralateral hemisphere to the more affected side showed decreased glucose metabolism in much wider fronto-parieto-temporal cortices. Conclusions: Quantitative FDG PET analysis showed asymmetric fronto-parieto-temporal hypometabolism in patients with CBD and is useful method in diagnosing the CBD.ope

난소암 세포주에서 cisplatin에 의한 세포사멸에 SIRT2가 미치는 영향 규명 연구

학위논문 (석사)-- 서울대학교 대학원 농업생명과학대학 농생명공학부, 2017. 8. 송용상.여성 암 중 가장 예후가 좋지 않은 암으로 알려진 난소암의 재발 및 전이에 주요한 원인으로서 cisplatin과 같은 백금계열 항암제의 저항성에 대한 문제가 지속적으로 인식되고 있다. 따라서 환자의 치료 예후를 개선하기 위해 항암제 저항성의 메커니즘을 이해하는 것이 중요하다. Class III 히스톤 탈아세틸화 효소 중 하나인 SIRT2는 히스톤 외에도 여러 기질과 결합하여 산화 스트레스 반응을 포함한 세포 내 다양한 기능 조절에 관여한다. 그러나 최근 암 세포의 유형과 상황에 따라 SIRT2가 종양 억제자 또는 종양 촉진자의 두 가지 기능을 가진다는 것이 보고되었다. 본 연구에서는 난소암 세포주인 A2780/S와 cisplatin 내성 세포주인 A2780/CP를 이용하여 난소암 세포주에서 cisplatin에 의한 세포 사멸 기전에 SIRT2가 어떠한 역할을 하는 지 규명하고자 하였다. Cisplatin 처리 시, A2780/CP 세포주에 비해 A2780/S 세포주에서 활성산소종 (Reactive oxygen species, ROS)의 생성이 현저히 증가하였고, 이를 매개로 세포사멸이 유도되었다. 이 때, A2780/S 세포주에서 cisplatin에 의해 과잉 유도된 활성산소종이 SIRT2의 발현을 크게 증가시키는 것을 확인하였다. 산화 스트레스에 의한 SIRT2 활성과 cisplatin 감수성의 관계를 확인하고자 난소암 세포주에 직접 과산화수소를 처리하였다. 그 결과, A2780/S 세포주와 달리 A2780/CP 세포주에서는 SIRT2 발현에 유의한 변화가 관찰되지 않았다. 그러나 SIRT2 유전자를 A2780/CP 세포주에 과발현시켰을 때, cisplatin에 의한 세포사멸이 효과적으로 증진되는 것을 확인하였다. 이러한 연구 결과는 SIRT2와 그의 하위 경로를 표적하는 것이 난소암의 cisplatin 저항성을 극복할 수 있는 새로운 치료 전략이 될 수 있음을 제시한다.Resistance to platinum-based chemotherapeutic agents such as cisplatin is one of the most leading causes for progression and recurrence of ovarian cancer. The regulation of intracellular reactive oxygen species (ROS) levels has been associated with cisplatin resistance of ovarian cancer. SIRT2, a member of class III NAD+-dependent histone deacetylases (HDACs), plays a critical role in cellular response to oxidative stress. Recently, several studies have reported that SIRT2 may serve as a tumor suppressor or a tumor promoter depending on the cell type and context. However, its specific function in response to cisplatin in ovarian cancer remains to be defined. In this study, we investigated the role of SIRT2 in response to cisplatin in ovarian cancer cells. For this purpose, genetically matched cisplatin-sensitive and cisplatin-resistant ovarian cancer cell lines were used in our experiments. Cisplatin markedly increased ROS generation in cisplatin-sensitive ovarian cancer cells compared to cisplatin-resistant ovarian cancer cells. Interestingly, we found that cisplatin upregulated the expression level of SIRT2 in cisplatin-sensitive ovarian cancer cells, but not in cisplatin-resistant ovarian cancer cells. Furthermore, the expression levels of SIRT2 and its downstream target in cisplatin-sensitive ovarian cancer cells were associated with cisplatin-induced ROS overproduction. We further demonstrated that overexpression of SIRT2 improved the response of cisplatin-resistant ovarian cancer cells to cisplatin. These findings suggest that targeting SIRT2 and its downstream pathway could be novel therapeutic strategies to overcome cisplatin resistance in ovarian cancer.Introduction 1 Materials and Methods 4 Results 9 Discussion 23 References 27 Abstract in Korean 34Maste

Family experiences and unmet needs with DOA(death on arrival) in emergency department

간호학과/석사본 연구는 DOA(death on arrival [DOA]) 환자 가족을 대상으로 DOA 환자 가족의 경험과 의료진에 대한 요구도를 조사하여 응급실 실무에 적용하여 의료진들의 DOA 환자 가족에 대한 이해도를 높이고 DOA환자 가족을 돕기 위한 목적으로 수행되었다.본 연구는 조사연구로서 DOA 환자 가족 60명을 대상으로 실시되었다. 연구도구는 문헌고찰을 통해 도출된 문항을 선택하여 전문가 12인으로부터 내용타당도를 검증받은 설문지로 DOA 환자 가족의 신체적 경험, 정신적 경험, 사회적 경험과 의료진에 대한 정보요구, 정서적 요구, 참여요구를 측정하였다. 2013년 8월 5일부터 2013년 12월 7일까지 자료 수집을 하였으며 PASW SPSS 18.0을 이용하여 DOA 환자 가족의 일반적 특성, DOA 환자 가족의 경험, 의료진에 대한 요구도, 일반적 특성에 대한 DOA환자 가족의 경험과 요구도를 분석하였다. 자료분석방법으로 일반적 특성은 평균과 실수를 이용하여 구했으며 DOA 환자 가족의 경험과 의료진에 대한 요구도는 평균과 표준편차를 이용하였으며 일반적 특성에 따른 DOA 환자 가족의 경험과 요구도는 t-test와 ANOVA, Scheffe 사후검정을 이용하여 결과를 분석 하였으며 연구결과는 다음과 같다.1. DOA 환자 가족의 일반적 특성으로 성별, 연령, 결혼상태, 종교, 고인과의 관계, 응급실 체류시간, 고인의 사망을 알게 된 경위, 고인의 사망원인, 고인에 대한 사망예측 여부, 고인의 사망에 대한 준비상태를 조사하였다. 결혼상태는 미혼, 기혼, 사별로 나누어 보았으며 고인과의 관계는 촌수를 중심으로 무촌, 1촌, 2촌이상으로 나누었다. 고인의 사망을 알게 된 경위로는 직접적으로 고인과 함께 온 경우와, 간접적으로 고인의 사망 소식을 의료진으로부터 접한 경우와 가족 및 지인으로부터 사망소식을 접한 경우로 나누어 보았다. 고인의 사망원인으로는 사고와 질병이 있었으며 본 연구에서 자연사와 만성질환은 제외하였으며 본 연구에서 말하는 질병은 사망 후 의사로부터 사망선고를 받은 진단명을 말한다.2. DOA 환자 가족의 전반적인 응급실 경험은 4점 만점에 평균 2.70점이었으며 그렇다 3점에 가까운 평균점수를 나타내는 것으로 보아 DOA 환자 가족은 정신적, 신체적, 사회적 경험의 정도가 없는 것 보다 있는 것으로 해석할 수 있다. 각 항목별 평균점수는 4점 만점에 정신적 경험 2.89점 신체적 경험 2.63점, 사회적 경험 2.61점이었으며 DOA 환자 가족은 정신적 경험의 정도가 가장 높았으며, 사회적 경험의 정도가 가장 낮았다.3. DOA 환자 가족의 의료진에 대한 요구도는 4점만점에 평균 3.09점이었으며 그렇다와 매우 그렇다 사이의 점수를 나타내는 것으로 보아 정보요구, 참여요구, 정서적요구의 정도가 전반적으로 있었던 것으로 해석할 수 있다. 각 영역의 평균점수는 4점만점에 정보요구 3.33점, 참여요구 3.05점, 정서적 요구 2.80점이었으며 정보요구의 정도가 가장 높았으며 정서적 요구의 정도가 가장 낮았다.4. 일반적 특성에 따른 DOA 환자 가족의 경험에서 결혼상태(F=7.206), 고인과의 관계(F=3.797), 고인의 사망원인(t=-2.375), 고인의 사망 예측여부 항목(F=7.527)에서 유의한 차이를 보였고(p<.05), 성별, 연령, 종교, 응급실 체류시간, 고인의 사망을 알게 된 경위, 고인의 사망에 대한 준비상태, 고인의 사망 후 경과기간에서는 유의한 차이가 없었다.5. 일반적 특성에 따른 DOA 환자 가족의 의료진에 대한 요구도에서 성별(t=-2.091), 결혼상태(F=5.270), 고인과의 관계(F=3.299)에서 유의한 차이를 보였고(p<.05), 연령, 종교, 응급실 체류시간, 고인의 사망을 알게 된 경위, 고인의 사망원인, 고인의 사망 예측여부, 고인의 사망에 대한 준비상태, 고인의 사망 후 경과기간에서는 유의한 차이가 없었다.이상의 연구결과로 DOA 환자의 가족은 경험에서 정서적 경험의 정도가 가장 높았으며, 의료진에 대한 요구도에서 정보요구의 정도가 가장 높았던 것을 알 수 있었다. 또한 일반적 특성에 따른 DOA 환자 가족의 경험에서 결혼상태, 고인과의 관계, 고인의 사망원인, 고인의 사망예측여부 항목이 유의한 차이를 보였으며, 의료진에 대한 요구도에서는 성별, 결혼상태, 고인과의 관계 항목이 유의한 차이를 보였다. 따라서 본 연구는 DOA 환자 가족의 경험과 의료진에 대한 요구도를 이해하는데 도움이 될 것이며, 추후 이들을 돕기 위한 교육프로그램 개발 및 간호중재 개발이 필요하리라 사료된다.ope

Multi-Characteristic Evaluation of Freeway LOS Using Grey Systems Theory

학위논문 (석사)-- 서울대학교 환경대학원 : 환경계획학과, 2013. 2. 이영인.고속도로 이용자의 꾸준한 증가에도 불구하고 이용자가 고속도로를 어떻게 생각하는지, 그리고 그 생각을 반영하여 고속도로의 운영에 도움을 줄 수 있는 현실적인 고속도로 평가방법론은 찾기 힘든 실정이다. 때문에 본 연구에서는 이런 한계점을 보완할 수 있는 다양한 평가지표를 도입한 새로운 방법론을 구축하여 복합적인 특성을 가진 고속도로 각각의 구간에 대한 상세한 평가가 가능하도록 제안하였다. 고속도로의 다양한 측면에 대한 서비스수준 평가를 가능하게 하기 위해서 다양한 지표의 통합적인 고려가 가능하면서도 자료의 제약이 없고, 계산이 간단하면서도 그 결과에 타당성을 가지는 회색체계이론을 적용하였다. 또한 고속도로에 영향을 미칠 것으로 판단되는 다양한 평가지표를 결정하고 전문가 설문조사를 통해서 각 지표별 가중치를 산정하였다. 회색체계이론과 결정된 평가지표를 이용하여 최종적으로 새로운 방법론을 구축하였으며, 이는 교통류조건에 속하는 지표만을 이용한 기본방법론과 전체 11가지 지표를 모두 고려하는 종합방법론으로 구분된다. 새로운 방법론을 평가하기 위해 기존 고속도로 평가방법론인 한국도로용량편람과 함께 총 238개의 고속도로 구간에 방법론을 적용해 비교분석하였다. 분석결과 각 방법론 사이에 차이가 발생하였는데 이는 다양한 평가지표의 도입에 의한 것이라고 판단된다. 새로운 평가방법론은 여러 가지 지표를 복합적으로 고려하기 때문에 실제 도로의 상태를 평가함에 있어서 종합방법론에 의한 결과가 설명력이 더 높은 것으로 평가되었다. 같은 교통흐름을 가지는 구간이라도 이용자는 고속도로의 다양한 측면을 함께 고려하여 평가한다. 때문에 고속도로를 평가할 시에 기존 방법론인 한국도로용량편람으로 기본적인 교통수준 평가를 진행하고, 종합방법론으로 복합적이고 상세한 평가를 한다면 고속도로 서비스수준을 복합적으로 고려할 수 있게 되어 보다 효율적인 유지보수와 사후관리가 가능할 것이다.Despite increasing freeway users constantly, it is difficult to find a realistic freeway evaluation method reflecting requirements of users. Therefore this paper proposes a new method with a variety of indexes to solve many problems in existing methods and does detailed evaluations of freeway. Grey Systems Theory applies to a new method to facilitate multi-characteristic evaluations of freeway Level of Service, because it has many great benefits : no limit of data, simple calculation, validity of results. After selecting indexes with influence over freeway, the weighted value of each index is calculated through a expert questionnaire. Lastly a new method constructed using the grey systems theory and the indexes. A new method is divided into two small methods, a standard method with transportation indexes and a comprehensive method with all. A new method and KHCM method are used in evaluations of 238 freeway sections and a comparative analysis to assess of validity of a new method. There are differences between three methods : standard, comprehensive and KHCM method, because of influence of indexes. Consequently a new method is more persuasive than existing method because it considers many factors of freeway complexly. Even if some freeway sections have same traffic flow quality, evaluations of users may be different because they consider several factors as well as transportation factors. Accordingly it will enable more efficient maintenance and follow-up management to use a new method as a compositive tool with existing methods, when estimators evaluate LOS of freeways.목 차 Ⅰ. 서론 1. 연구의 배경 및 목적 1 2. 연구의 범위 및 구성 3 Ⅱ. 관련 이론 및 선행연구 고찰 1. 관련이론 4 1) 회색체계이론 4 2) 고속도로 평가방법론 8 2. 선행연구 고찰 10 1) 회색체계이론 연구 10 2) 고속도로 평가방법론 연구 13 3) 선행연구와의 차이점 16 Ⅲ. 고속도로 다면평가방법론 구축 1. 고속도로 다면평가방법론 개요 17 2. 다면평가방법론 구축 20 1) 다면평가지표 선정 20 2) 회색등급 결정 29 3) 중심점 삼각함수를 이용한 회색평가 31 Ⅳ. 다면평가 방법론의 적용 및 결과분석 1. 방법론의 적용 39 1) 개요 39 2) 적용 대상의 범위 및 자료수집 40 3) 방법론 적용 44 2. 결과분석 47 1) 다면평가방법론 결과 단일 분석 47 2) 다면평가방법론과 KHCM 결과 비교분석 56 Ⅴ. 결론 및 향후 연구과제 1. 결론 62 2. 향후 연구과제 64 참 고 문 헌 65 Abstract 68Maste

동종 제대혈 유래 다능성 줄기세포를 이용한 개의 척수손상 치료 연구

Thesis(doctor`s)--서울대학교 대학원 :수의학과,2006.Docto

A Study of the Causal Relationship between Job Characteristics and the Job Satisfaction of Social Welfare Officials: Controlling Effects of Way of Life

본 연구는 임지혜의 석사학위논문을 발전시킨 것임.본 연구는 사회복지전담공무원의 직무특성이 직무만족에 미치는 영향을 조사하고, 사회복지전담공무원의 삶의 양식이 직무특성과 직무만족의 영향관계에서 통제효과를 지니는지를 분석하는 데 목적을 두었다. 이 연구목적을 달성하기 위해 서울과 경기지역의 사회복지전담공무원을 대상으로 설문조사를 실시하였고, 계량적 분석을 통해서 다음과 같은 결과를 얻었다. 첫째, 직무특성의 하위요인 중 기술다양성과 과업정체성이 높을수록 직무만족에 부정적인 영향을 미치며, 과업중요성과 자율성이 높을수록 직무만족에 긍정적인 영향을 미치는 것으로 나타났다. 둘째, 같은 업무를 수행하는 사회복지전담공무원이라 하더라도 개인별로 서로 다른 삶의 양식을 지니는 것으로 나타났는데, 다수 사회복지전담공무원의 삶의 양식은 평등주의였고, 다음으로 개인주의가 일정 부분을 구성하고 있었으며, 소수의 계층주의와 운명주의가 존재하였다. 셋째, 삶의 양식중에서 평등주의가 직무만족에 가장 긍정적인 영향을 미치는 것으로 나타났다. 넷째, 삶의 양식별로 직무특성이 직무만족에 미치는 영향관계에 차이가 있었다. 평등주의자들의 경우 과업중요성이 직무만족에 유의미한 영향을 미쳤으며, 개인주의자들의 경우 자율성이 직무만족에 유의미한 영향을 미쳤다. 이러한 연구결과는 사회복지전담공무원에 대한 이해의 수준을 높여주며, 그들의 직무만족 제고방안을 모색함에 있어 시사하는 바가 큰 것으로 판단된다. This study aimed to examine to what extent the job characteristics of social welfare officials would influence their job satisfaction, and to analyze whether their way of life would have a controlling effects on the relationship between job characteristics and job satisfaction. In order to achieve these purposes, this study conducted a survey of social welfare officials in Seoul and Gyeonggi Province. The results of the quantitative analysis are as follows. First, among the job characteristics of social welfare officials, 'skill variety' and 'task identity' showed negative effects while 'task significance' and 'autonomy' showed positive effects on job satisfaction. Second, the main way of life of social welfare officials was egalitarianism. Individualism appeared as the second most common type of way of life among the officials. However, hierarchy and fatalism were only minor ways of life. Third, egalitarianism most positively affected the job satisfaction of social welfare officials. Fourth, the type of way of life made a difference in the pattern of influence of job characteristics on job satisfaction. In the case of egalitarians, 'task significance' showed a meaningful causal relationship with job satisfaction. However, 'autonomy' showed a meaningful causal relationship with job satisfaction for individualists. These findings could contribute to the understanding of social welfare officials, and to the development of measures for enhancing their job satisfaction

Toxicological assessment of potential extrahepatic carcinogenicity for oral nucleoside/nucleotide analogues in patients with chronic hepatitis B

Background and Aims: Evidence on the carcinogenicity of oral nucleos(t)ide analogues (NAs) is still inconclusive lacking tenofovir disoproxil fumarate (TDF) data in patients with chronic hepatitis B (CHB). We aimed to provide confirmatory results for the relevant issue using a large set of CHB patients with data on all major NA drugs. Methods: The study population consists of 10,331 patients with CHB receiving primary NA treatment longer than 6 months and 24,836 untreated controls followed at least during the period based on the International Council of Harmonization guidelines. Using an inverse-probability-of-treatment-weighted (IPTW) method, cumulative incidence of extrahepatic cancers was compared between treated and untreated patients and across the cyclopentane (entecavir), L-nucleoside (clevudine, lamivudine, and telvibudine), and acyclic phosphonate categories of NAs (adefovir, besifovir, and tenvofir). Analyses of individual cancers as sub-endpoints were additionally performed. Results: During averages of 4.1 ± 3.1 years and 6.8 ± 5.5 years in the respective pairs, extrahepatic cancers occurred in 208 treated and 1,014 untreated patients. Cumulative incidence of overall extrahepatic malignancies did not differ between the two groups in the IPTW cohort (HR 1.002, 95% CI [0.859-1.169], p=0.977). Similar statistical trends were observed in analyses across the three NA chemical subsets and untreated set. Per-cancer analyses indicated that NA treatment was significantly associated with increased risks of colorectal/anal cancers and lymphoma (IPTW-adjusted HRs [95% CI], 1.538 [1.175-2.013]; and 1.784 [1.196-2.662]). Inversely, breast cancer and prostate cancer were less prevalent in the NA-treated group, compared to the counterpart (IPTW-adjusted HRs [95% CI], 0.669 [0.462-0.967]; and 0.521 [0.329-0.825]). Conclusions: We found that long NA treatment had carcinogenic risks for colorectal/anal and lymphoid tissues in CHB patients, although it did not affect most of extrahepatic organs. Protective effects of NAs on breast and prostate cancers should be further confirmed.Docto