オーキシンによる植物遺伝子発現制御機構の解析

名古屋大学Nagoya University理学博士par(protoplast auxin-regulated)遺伝子は､タバコ葉肉細胞プロトプラストを､オーキシンを含む培地で培養したときにその発現量が増大する｡タバコ個体におけるpar遺伝子の発現をmRNAレベルで調べた結果､根で強く発現していること､さらに弱いながら種子でも発現していることがわかった｡par遺伝子の植物体での発現様式をより詳細に解明し､さらにその発現制御領域を特定する目的でpar遺伝子の5'上流域をタバコ染色体ライブラリーより単離し､転写開始点より-1679塩基までの配列を決定した｡その結果､cDNAと塩基配列が一致するpar1遺伝子に加え､cDNAの塩基配列と一部一敦しないpar遺伝子(129アミノ酸中4アミノ酸の置換)の5'上流領域も同時に単離された｡par1, par2両遺伝子の5'上流領域を比較したところ､転写開始点より-400塩基前後までは､高い相同性がみられた｡par1, par2両遺伝子の発現をより簡便に検出するために､両遺伝子の6アミノ酸残基以下を大腸菌由来のβ-グルクロニダーゼ(GUS)遺伝子におきかえたキメラ遺伝子を作製した｡このキメラ遺伝子を､Agrobacteriumを用い､タバコ染色体上へと導入し､形質転換植物体を得た｡par1-GUSキメラ遺伝子を導入した形質転換植物体からプロトプラストを調整し､人工オーキシンの2,4-ジクロロフェノキシ酢酸(2,4-D)に対する応答を検討したところ､培地中に2,4-Dを添加したプロトプラストの方が無添加で培養したプロトプラストより約4倍高いGUS活性値を示した｡また､形質転換体におけるGUS活性を測定したところ､葉､茎と比較して根で､高いGUS活性が検出された｡また､種子において比較的高いGUS活性がみられた｡以上の結果は､前述したRNAレベルでのpar遺伝子の発現とよく一致することから､転写開始位置より-1679塩基までにpar1遺伝子の発現を制御している配列が存在していると考えられる｡種子におけるGUS活性は､種子形成の後期になって検出されることがわかった｡発芽に伴うキメラ遺伝子の発現は､par1, par2両遺伝子とも発芽初期より根においてみられた｡発芽時に限らず､根におけるキメラ遺伝子の発現を組織レベルで観察すると､根毛と根端で特に強い発現が認められた｡par1遺伝子の5’上流領域を順に欠失させたキメラ遺伝子を導入した形質転換植物体を解析した結果､par1遺伝子は根および種子において､-138のSphI部位までに含まれる配列によってその発現の特異性は制御されており､-328のXbaIから-1679のEcoRI部位までの配列によって発現量が制御されていると考えられる｡すでに､カリフラワーモザイクウイルス35SRNAプロモーターが､タバコの根端で機能することが知られており､その発現制御には､TGA1aタンパク質が関与していることが報告されている｡今回､ゲル移動皮シフト法により､par1遺伝子の+53から-138までの領域にTGA1aタンパク質が､配列特異的に結合することが明らかになった｡したがって､TGA1aは､par1遺伝子の根端における発現の制御因子の一つであろうと推測される｡一方､プロトプラストの培地中に2,4-Dを添加しないで培養したものと､2,4-Dを添加して培養したものとにおけるキメラ遺伝子の発現量の差を比較した実験から､-138より下流に2,4-Dに応答する配列が存在していると考えられる｡par1-GUSキメラ遺伝子は､形質転換タバコから単離したプロトプラスト以外にも､芽生えの時期に､外部から添加した2,4-Dに応答し､その発現が増大することが明かとなった｡2,4-Dによる増大効率は､無添加時でも発現レベルが高い根では､2倍程度であったが､2,4-D無添加時に発現レベルが極めて低い子葉では､40倍以上も発現量が上昇した｡このように､子葉中のpar遺伝子は､外生のオーキシンに対して鋭敏に応答して発現することがわかった｡したがって子葉は､オーキシンによるpar遺伝子の発現制御機構を研究する優れた材料であると考えられる｡名古屋大学博士学位論文 学位の種類:理学博士 (課程) 学位授与年月日:平成3年12月25日doctoral thesi

携帯限定層の動向 : 2013年全国20代郵送調査の分析結果から〔報告〕

「携帯限定層」が増えてきて、彼らの意識傾向が全体と比べてどのように異なるかを理解することが必要となってきている。「携帯限定層」は特に若者に多い。最近の郵送調査では20代後半の45％が「固定電話を持たない」と答えている。過去の郵送調査の結果を調べると、年を経るごとに、「携帯限定層」は30代にも広がっていることが分かった。これまでのところ全年代の調査では「携帯限定層」の影響は少ないとされるが、今後も広がっていくことを考えると、無視できなくなるだろう。本稿では、2013年11～12月に実施した全国20代郵送調査の結果を分析し、そこでわかった20代の「携帯限定層」の特徴について述べる。 The cell-phone-only (CPO) population is growing. Therefore, surveyors are required to assess differences between their opinions of this trend and the overall average. The young CPO population is quite large. According to a recent mail survey, 45 percent of individuals in their late twenties responded that they did not have a landline phone. The results from previous mail surveys indicated that the CPO population comprising of people in their thirties has grown over the years. To date, the results have suggested that the impact of the CPO population has not been overly significant. However, as the CPO population continues to increase, it is unlikely that its influence can be ignored for long. In this study, we analyze the nationwide mail survey targeting people in their twenties that was conducted between November to December 2013. We then revealed the characteristics of the CPO population whose ages fell under the twenties range.１．はじめに ２．定義 ３．携帯限定層の推移 ４．20代調査と全年代調査の結果 　４－１．年代、年齢別 　４－２．内閣支持率と政党支持率 　４－３．フェイス項目別 ５．20代携帯限定層の意識分析 　５－１．内閣支持率と政党支持率 　５－２．投票行動（前回参院選） 　５－３．政治・社会関心度 　５－４．目標設定の高さ ６．まとめ ７．おわりにtextapplication/pdfdepartmental bulletin pape

A study about the difficulties of child care in parents who participated at parent-child class

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Physical Exercise Improves Cognitive Function in Older Adults with Stage 3-4 Chronic Kidney Disease: A Randomized Controlled Trial

application/pdfAmerican Journal of Nephrology. 2021, 52 (12)journal articl

Upper Bound on the Decay τ→μγ from the Belle Detector

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EXTENSION THEOREM AND ITS APPLICATION TO THE FRENET FORMULAS OF CURVES

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Minichromosomes and intermediate chromosomes are resistant to etoposide-mediated cleavage

<p><b>Copyright information:</b></p><p>Taken from "Repetitive DNA is associated with centromeric domains in but not "</p><p>http://genomebiology.com/2007/8/3/R37</p><p>Genome Biology 2007;8(3):R37-R37.</p><p>Published online 12 Mar 2007</p><p>PMCID:PMC1868937.</p><p></p> (a) Procyclics (927 strain) were treated with 500 μM etoposide for 3 h and chromosomal DNA separated by CHEFE. Southern blots were hybridized with the 177 bp repeat probe or α-tubulin. (b) Bloodstream form (427 strain) were treated with 25 μM etoposide for 1 h and chromosomal DNA analyzed as above. Blots were hybridized with the intermediate chromosome-specific probe T3. In strain 427, chromosome 1 is larger than in strain 927, as is the major cleavage product identified with the α-tubulin probe. Lane N, non-treated parasites; lane E, etoposide-treated

Alignment of repeat array consensus sequences on each chromosome, determined by the program Tandem Repeats Finder 39

<p><b>Copyright information:</b></p><p>Taken from "Repetitive DNA is associated with centromeric domains in but not "</p><p>http://genomebiology.com/2007/8/3/R37</p><p>Genome Biology 2007;8(3):R37-R37.</p><p>Published online 12 Mar 2007</p><p>PMCID:PMC1868937.</p><p></p> The nucleotides marked in bold correspond to two copies of the array (approximately 30 bp) in chromosomes 1, 2, 6 and 7

Etoposide-mediated Topo-II cleavage sites (red circles) on (strain 927) chromosomes 1-8

<p><b>Copyright information:</b></p><p>Taken from "Repetitive DNA is associated with centromeric domains in but not "</p><p>http://genomebiology.com/2007/8/3/R37</p><p>Genome Biology 2007;8(3):R37-R37.</p><p>Published online 12 Mar 2007</p><p>PMCID:PMC1868937.</p><p></p> The locations of the probes (Tb1-17) are identified by black bars. Details on the AT-rich arrays are given in Figure 7 and Table 1 and the experimental results are shown in Additional data file 4

Miniaturized Cell Fluorescence Imaging Device Equipped with Multielectrode Array

In this study, a fabrication method for a system composed of a fluorescence imaging module and a multielectrode array (MEA) chamber is described. It is important to measure both fluorescence intensity and electrical activity to obtain a better understanding of a physiological activity, such as spikes or action potentials, of cells. However, observing these physiological traits long-term with cultured cells is difficult using a conventional microscope. In this study, we developed a small fluorescence imaging device with an MEA that can be used in a conventional CO2 incubator. The fluorescence imaging module was composed of a CMOS image sensor, a fiber-optic plate (FOP), a blue LED, and optical filters. The FOP enabled the device to be miniaturized through lensless fluorescence imaging. The MEA chamber was fabricated with micro gold electrodes deposited on the FOP. By using the FOP for the bottom of the chamber, we measured both the fluorescence signal and electrophysiology signal in the same experiment. The performance of the device was evaluated with neuronal blastoma cells. Our device enabled us to observe fluorescence images and MEA signals.journal articl