Secagem e resfriamento a vácuo de cogumelos comestíveis da espécie Pleurotus ostreatus DSM 1833

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico. Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Alimentos.Cogumelos do gênero Pleurotus são muito saborosos e são considerados uma boa opção de dieta devido ao seu elevado valor nutricional, sendo ricos em proteínas, fibras, carboidratos, vitaminas e minerais. Sendo constituídos por cerca de 90% de umidade, os cogumelos frescos são extremamente perecíveis, pois a água que compõe sua estrutura gera um ambiente favorável aos processos biológicos, bioquímicos e biofísicos que degradam alimentos. Sendo assim, os processos de desidratação e de resfriamento a vácuo dos cogumelos da espécie Pleurotus ostreatus DSM 1833 foram avaliados neste trabalho. Os cogumelos foram desidratados em estufa com circulação de ar nas temperaturas de 40, 50 e 60ºC, com umidade relativa do ar de 75%. Os parâmetros de reidratação foram avaliados utilizando-se um planejamento experimental fracionado 33-1, onde as variáveis estudadas foram a temperatura de secagem (40, 50 e 60ºC), a temperatura da água de reidratação (25, 55 e 85ºC) e o tempo de imersão na água (30, 75 e 120 minutos). As isotermas de sorção de umidade foram determinadas a 30, 40 e 50ºC. Foi avaliada a influência da taxa de redução de pressão no resfriamento a vácuo e a minimização da perda de massa no processo através da aspersão de água antes do resfriamento a vácuo. A melhor temperatura de secagem obtida foi de 40ºC, levando em consideração a melhor reidratação dos cogumelos desidratados nesta temperatura. A reidratação dos cogumelos desse gênero pode ser feita em água na temperatura ambiente por 30 minutos. Tanto o modelo de GAB quanto o modelo de BET representaram adequadamente os dados experimentais de sorção de umidade. A aspersão de água nos cogumelos antes do resfriamento diminuiu consideravelmente a perda de massa durante o processo. Assim, desenvolveu-se conhecimentos básicos para dois processos de conservação dos cogumelos do gênero Pleurotus

Síntese, caracterização e degradação de P(3HB) por cupriavidus necator, utilizando glicerol como substrato

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro Tecnológico, Programa de Pós-Graduação em Engenharia Química, Florianópolis, 2012O poli(3-hidroxibutirato) - P(3HB), é um poliéster natural e biodegradável, produzido por cultura bacteriana, sendo considerado um atrativo substituto para os polímeros petroquímicos. O glicerol, por sua vez, que teve sua disponibilidade no mercado ampliada em decorrência da política nacional de estímulo à adição de biodiesel nos combustíveis fósseis, pode ser utilizado para diversas finalidades. Dentre elas, destaca-se seu uso como fonte de carbono no cultivo de micro-organismos. Diante da disponibilidade de glicerol, objetivou-se neste trabalho utilizá-lo como fonte de carbono adicional na produção de P(3HB). Foram realizados ensaios preliminares nos quais foi avaliada a possibilidade do uso do glicerol proveniente da produção do biodiesel na biossíntese do P(3HB). Em seguida, foram realizados ensaios planejados por meio de um delineamento composto central rotacional (DCCR) 23 com 3 pontos centrais no qual foram avaliadas a influência da temperatura e das concentrações de açúcar invertido e glicerol no crescimento de Cupriavidus necator, bem como na produção e acúmulo do polímero pela célula, ensaio este que foi em seguida validado em triplicata avaliando sua cinética. A melhor condição validada teve sua escala ampliada para biorreator de 2 L, também com avaliação cinética e extração dos filmes para a sua caracterização físico-química, térmica e mecânica. E, finalmente, foram realizados os ensaios de biodegradação em solo e exposição em câmara de envelhecimento acelerado, com avaliação do material degradado. Nos ensaios preliminares constatou-se que o glicerol bruto poderia ser utilizado como fonte de carbono adicional ao meio de cultivo de C. necator. Os resultados do DCCR revelaram que o aumento da temperatura levou a um incremento na produção e no acúmulo de P(3HB) e que, quando foram utilizados 15 g L-1 de glicerol, chegou-se a resultados de acúmulo 15 % superiores, porém não considerados como estatisticamente significativos. O modelo obtido no DCCR foi validado para todas as condições para o acúmulo percentual de P(3HB) e para a produção de polímero diferiu em 3 % do valor experimental obtido para a condição a 38 °C, 15 g L-1 de açúcar invertido e 15 g L-1 de glicerol, para as demais condições testadas o modelo foi validado. Em biorreator, foram realizados cinco ensaios, sendo que para os ensaios com adição de glicerol bruto como substrado ou cosubstrato não houve crescimento ou produção de P(3HB) viável para extração. Na caracterização dos polímeros sintetizados em biorreator com e sem adição de glicerol puro, verificou-se que o uso do glicerol não modificou as propriedades dos filmes, mas foi possível afirmar que os polímeros obtidos e extraídos nesse trabalho eram mesmo o P(3HB). Em solo, as amostra degradaram em 35 dias, enquanto na exposição dos filmes à câmara de envelhecimento acelerado notou-se maior estabilidade das amostras o que permitiria a aplicação do polímero no ambiente, sem que ele se degradasse Abstract: Poly(3-hydroxybutyrate) - P(3HB) is a natural, biodegradable polyester, produced by bacterial fermentation, and considered an attractive replacement for petrochemical polymers. Glycerol had expanded its availability in the market due to the national policy of encouraging the addition of biodiesel in fossil fuels, the glycerol can be used for several purposes. Among them, its use as a carbon source for the cultivation of microorganisms has been highlighted. Through the availability of glycerol, this study aimed to use it as an additional carbon source on the production of P(3HB). First of all, preliminary tests were conducted to evaluate the possibility of the use of glycerol from the biodiesel production in the biosynthesis of P(3HB). Then, tests were conducted planned by a central composite rotatable design (CCRD) 23 with three central points in order to evaluate the influence of the temperature and the concentrations of inverted sugar and glycerol on Cupriavidus necator growth, as well as the production and accumulation of the polymer into the cell. The experiments were made in triplicate and the kinetics were evaluated. The best condition of the process had their range expanded to 2 L bioreactor. The kinetic were evaluated and the films obtained had its physical-chemical, thermal and mechanical properties evaluated. Finally, biodegradation in soil assays were performed and exposure chamber accelerated aging was performed, with evaluation of the degraded material. In preliminary tests it was found that crude glycerol could be used as an additional carbon source to the culture medium of C. necator. The results of the CCRD revealed that the increase of the temperature led to an increase in the production and accumulation of P(3HB) and when 15 g L-1 of glycerol were added to the medium, an accumulation of 15% was reached, but not considered as statistically significant. The model obtained in CCRD was validated for all conditions for the accumulation percentage of P (3HB) and the polymer production differed in 3 % of the value obtained for the experimental condition at 38 °C, 15 g L-1 of inverted sugar and 15 g L-1 of glycerol, for the other conditions tested the model was validated. Five tests were performed in bioreactor, and no growth or production of P (3HB) viable for extraction was identified for assays with crude glycerol as substrate or co-substrate. In the characterization of the polymers synthesized in bioreactor with and without addition of pure glycerol, it was found that the use of glycerol did not modify the film properties, but it was possible to say that the polymers extracted were P(3HB). In soil, the samples degraded in 35 days, while the films that was exposed at the accelerated aging chamber presented greater stability of the samples which would allow the application of the polymer in the environment without degradation

P590The NO-donor SNAP exerts cardioprotection against ischemia/reperfusion injury in human embryonic stem cell-derived cardiomyocytes

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Transcriptional co-activators YAP1-TAZ of Hippo signalling in doxorubicin-induced cardiomyopathy

Aims Hippo signalling is an evolutionarily conserved pathway that controls organ size by regulating apoptosis, cell proliferation, and stem cell self-renewal. Recently, the pathway has been shown to exert powerful growth regulatory activity in cardiomyocytes. However, the functional role of this stress-related and cell death-related pathway in the human heart and cardiomyocytes is not known. In this study, we investigated the role of the transcriptional co-activators of Hippo signalling, YAP and TAZ, in human-induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes (hiPSC-CMs) in response to cardiotoxic agents and investigated the effects of modulating the pathway on cardiomyocyte function and survival. Methods and results RNA-sequencing analysis of human heart samples with doxorubicin-induced end-stage heart failure and healthy controls showed that YAP and ERBB2 (HER2) as upstream regulators of differentially expressed genes correlated with doxorubicin treatment. Thus, we tested the effects of doxorubicin on hiPSC-CMs in vitro. Using an automated high-content screen of 96 clinically relevant antineoplastic and cardiotherapeutic drugs, we showed that doxorubicin induced the highest activation of YAP/TAZ nuclear translocation in both hiPSC-CMs and control MCF7 breast cancer cells. The overexpression of YAP rescued doxorubicin-induced cell loss in hiPSC-CMs by inhibiting apoptosis and inducing proliferation. In contrast, silencing of YAP and TAZ by siRNAs resulted in elevated mitochondrial membrane potential loss in response to doxorubicin. hiPSC-CM calcium transients did not change in response to YAP/TAZ silencing. Conclusions Our results suggest that Hippo signalling is involved in clinical anthracycline-induced cardiomyopathy. Modelling with hiPSC-CMs in vitro showed similar responses to doxorubicin as adult cardiomyocytes and revealed a potential cardioprotective effect of YAP in doxorubicin-induced cardiotoxicity

Deciphering neuronal deficit and protein profile changes in human brain organoids from patients with creatine transporter deficiency

Creatine transporter deficiency (CTD) is an X-linked disease caused by mutations in the SLC6A8 gene. The impaired creatine uptake in the brain results in intellectual disability, behavioral disorders, language delay, and seizures. In this work, we generated human brain organoids from induced pluripotent stem cells of healthy subjects and CTD patients. Brain organoids from CTD donors had reduced creatine uptake compared with those from healthy donors. The expression of neural progenitor cell markers SOX2 and PAX6 was reduced in CTD-derived organoids, while GSK3β, a key regulator of neurogenesis, was up-regulated. Shotgun proteomics combined with integrative bioinformatic and statistical analysis identified changes in the abundance of proteins associated with intellectual disability, epilepsy, and autism. Re-establishment of the expression of a functional SLC6A8 in CTD-derived organoids restored creatine uptake and normalized the expression of SOX2, GSK3β, and other key proteins associated with clinical features of CTD patients. Our brain organoid model opens new avenues for further characterizing the CTD pathophysiology and supports the concept that reinstating creatine levels in patients with CTD could result in therapeutic efficacy

Características maternas e o impacto da prematuridade no recém nascido

O parto prematuro caracteriza-se pela ocorrência do nascimento entre 20 e 37 semanas de gestação, havendo uma repercussão clínica alarmante para o recém nascido e para a gestante. O objetivo do estudo foi avaliar o impacto da prematuridade relacionados ao recém nascido e às características maternas observadas em pacientes de baixo risco atendidos em uma maternidade pública da cidade de Joinville, Santa Catarina. Sendo um estudo caso-controle cuja população foi randomizada entre puérperas primigestas atendidas na Maternidade Darcy Vargas, no período de março de 2018 a fevereiro de 2019 contabilizando uma amostra total de 722 puérperas. Dessa forma, os fatores relacionados com o desfecho de prematuridade foram uso de drogas pela gestante e a diminuição de frequência de consultas pré-natais. Em relação aos fatores neonatais analisados que foram relacionados com a prematuridade: menor capurro, menores índices de apgar, baixo peso ao nascer, internação neonatal foram características que diferenciam os prematuros dos recém-nascidos a termo

Application of response surface methodology and central composite rotatable design (CCDR) for modelling the influence of agro-industrial waste in lactic acid biosynthesis

Lactic acid (LA) is one of the most important organic acids, with a wide range of industrial and biotechnological applications and can be produced by chemical synthesis and microbial culture. However, the biotech pathway is generally preferred because it provides an optically pure product. In this context, the purpose of this work was to evaluate LA biosynthesis by Lactobacillus amylovorus using molasses as carbon source (CS) and corn steep liquor as nitrogen source (NS) in a central composite rotatable design (CCRD) varying the concentration CS and NS, as well as to validate the model. The method for microbial culture followed an experimental design of the CCRD type, conducted without agitation, at 37ºC in Erlenmeyer flask, with pH in spontaneous evolution. The results showed that, using molasses and corn steep liquor as alternative sources, LA production ranged from 2.8 to 4.6 g/L, respectively, with the most favourable condition being 40.0 g of molasses and 250 g of corn steep liquor. It was possible, from the experimental design, to ascertain the selection of the best conditions for the microbial culture, demonstrating the feasibility of replacing CS and NS by agro-industrial waste, thus reducing the cost of producing LA

Optimization of Total Flavonoid Compound Extraction from Gynura medica Leaf Using Response Surface Methodology and Chemical Composition Analysis

Optimization of total flavonoid compound (TFC) extraction from Gynura medica leaf was investigated using response surface methodology (RSM) in this paper. The conditions investigated were 30–60% (v/v) ethanol concentration (X1), 85–95 °C extraction temperature (X2) and 30–50 (v/w) liquid-to-solid ratio (X3). Statistical analysis of the experiments indicated that temperature and liquid-to-solid ratio significantly affected TFC extraction (p < 0.01). The Box-Behnken experiment design showed that polynomial regression models were in good agreement with the experimental results, with the coefficients of determination of 0.9325 for TFC yield. The optimal conditions for maximum TFC yield were 55% ethanol, 92 °C and 50 (v/w) liquid-to-solid ratio with a 30 min extraction time. Extracts from these conditions showed a moderate antioxidant value of 54.78 μmol quercetin/g dry material (DM), 137.3 μmol trolox/g DM for 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) and 108.21 μmol quercetin/g DM, 242.31 μmol trolox/g DM for 2,2-azino-bis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS+), respectively. HPLC-DAD-MS analysis showed that kaempferol-3-O-glucoside was the principal flavonoid compound in Gynura medica leaf