Oxidant-NO dependent gene regulation in dogs with type I diabetes: impact on cardiac function and metabolism

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>The mechanisms responsible for the cardiovascular mortality in type I diabetes (DM) have not been defined completely. We have shown in conscious dogs with DM that: <it>1</it>) baseline coronary blood flow (CBF) was significantly decreased, <it>2</it>) endothelium-dependent (ACh) coronary vasodilation was impaired, and <it>3</it>) reflex cholinergic NO-dependent coronary vasodilation was selectively depressed. The most likely mechanism responsible for the depressed reflex cholinergic NO-dependent coronary vasodilation was the decreased bioactivity of NO from the vascular endothelium. The goal of this study was to investigate changes in cardiac gene expression in a canine model of alloxan-induced type 1 diabetes.</p> <p>Methods</p> <p>Mongrel dogs were chronically instrumented and the dogs were divided into two groups: one normal and the other diabetic. In the diabetic group, the dogs were injected with alloxan monohydrate (40-60 mg/kg iv) over 1 min. The global changes in cardiac gene expression in dogs with alloxan-induced diabetes were studied using Affymetrix Canine Array. Cardiac RNA was extracted from the control and DM (n = 4).</p> <p>Results</p> <p>The array data revealed that 797 genes were differentially expressed (P < 0.01; fold change of at least ±2). 150 genes were expressed at significantly greater levels in diabetic dogs and 647 were significantly reduced. There was no change in eNOS mRNA. There was up regulation of some components of the NADPH oxidase subunits (gp91 by 2.2 fold, P < 0.03), and down-regulation of SOD1 (3 fold, P < 0.001) and decrease (4 - 40 fold) in a large number of genes encoding mitochondrial enzymes. In addition, there was down-regulation of Ca²⁺cycling genes (ryanodine receptor; SERCA2 Calcium ATPase), structural proteins (actin alpha). Of particular interests are genes involved in glutathione metabolism (glutathione peroxidase 1, glutathione reductase and glutathione S-transferase), which were markedly down regulated.</p> <p>Conclusion</p> <p>our findings suggest that type I diabetes might have a direct effect on the heart by impairing NO bioavailability through oxidative stress and perhaps lipid peroxidases.</p

Problems of multi-species organisms: endosymbionts to holobionts

The organism is one of the fundamental concepts of biology and has been at the center of many discussions about biological individuality, yet what exactly it is can be confusing. The definition that we find generally useful is that an organism is a unit in which all the subunits have evolved to be highly cooperative, with very little conflict. We focus on how often organisms evolve from two or more formerly independent organisms. Two canonical transitions of this type—replicators clustered in cells and endosymbiotic organelles within host cells—demonstrate the reality of this kind of evolutionary transition and suggest conditions that can favor it. These conditions include co-transmission of the partners across generations and rules that strongly regulate and limit conflict, such as a fair meiosis. Recently, much attention has been given to associations of animals with microbes involved in their nutrition. These range from tight endosymbiotic associations like those between aphids and Buchnera bacteria, to the complex communities in animal intestines. Here, starting with a reflection about identity through time (which we call “Theseus’s fish”), we consider the distinctions between these kinds of animal–bacteria interactions and describe the criteria by which a few can be considered jointly organismal but most cannot

Demanda para intervenção fonoaudiológica em uma unidade neonatal de um hospital-escola

OBJETIVO: caracterizar a demanda e intervenção fonoaudiológicas realizadas em recém-nascidos e lactentes que apresentaram alterações no processo de alimentação por via oral, na Unidade Neonatal de um hospital-escola de caráter público. MÉTODOS: trata-se de um estudo retrospectivo, descritivo e de corte transversal. Foi realizada a coleta de dados por meio de consulta a todos os prontuários fonoaudiológicos de recém-nascidos e lactentes internados no período entre março de 2008 e fevereiro de 2010, que receberam ao menos uma avaliação/intervenção fonoaudiológica. RESULTADOS: foram atendidos nesse período 205 recém-nascidos e lactentes internados. Destes sujeitos, 104 atenderam aos critérios de inclusão na pesquisa. A população predominante foi do sexo masculino, composta de recém-nascidos pré-termo, adequados para idade gestacional, baixo peso ao nascimento, em média com 36 semanas de idade gestacional, com diagnósticos mais frequentes de distúrbio respiratório, síndrome ictérica e/ou distúrbio cardiovascular. Dentre os motivos de encaminhamento para avaliação fonoaudiológica predominaram: alteração no comportamento motor oral, avaliação da prontidão para alimentação por via oral e dificuldades no uso do copo. As avaliações foram solicitadas, em sua maioria, por médicos residentes quando os recém-nascidos estavam, em média, com 28 dias de vida. Verificou-se ampliação dos critérios de encaminhamento da equipe para avaliação fonoaudiológica, quando comparados aos critérios descritos na literatura. CONCLUSÕES: esse trabalho permitiu caracterizar a população, a demanda e a intervenção fonoaudiológicas em uma unidade neonatal. Verificou-se que a maioria dos recém-nascidos e lactentes ainda recebe alimentação por via oral sem avaliação fonoaudiológica prévia, o que pode gerar situações de risco para uma alimentação segura e eficiente

Stable internal reference genes for normalization of real-time RT-PCR in tobacco (Nicotiana tabacum) during development and abiotic stress

Real-time RT-PCR is a powerful technique for the measurement of gene expression, but its accuracy depends on the stability of the internal reference gene(s) used for data normalization. Tobacco (Nicotiana tabacum) is an important model in studies of plant gene expression, but stable reference genes have not been well-studied in the tobacco system. We address this problem by analysing the expression stability of eight potential tobacco reference genes. Primers targeting each gene (18S rRNA, EF-1α, Ntubc2, α- and β-tubulin, PP2A, L25 and actin) were developed and optimized. The expression of each gene was then measured by real-time PCR in a diverse set of 22 tobacco cDNA samples derived from developmentally distinct tissues and from plants exposed to several abiotic stresses. L25 and EF-1α demonstrated the highest expression stability, followed by Ntubc2. Measurement of L25 and EF-1α was sufficient for accurate normalization in either the developmental or stress-treated samples, but Ntubc2 was also required when considering the entire sample set. Analysis of a tobacco circadian gene (NTCP-23) verified these reference genes in an additional context, and all techniques were optimized to enable a high-throughput approach. These results provide a foundation for the more accurate and widespread use of real-time RT-PCR in tobacco.Gregor W. Schmidt and Sven K. Delane

Assistência integral ao recém-nascido prematuro: implicações das práticas e da política pública

RESUMO Objetivo: compreender a forma como ocorre a assistência ao recém-nascido prematuro, conforme preconiza a política pública de saúde Método Canguru, a partir da percepção dos profissionais envolvidos na assistência. Métodos: trata-se de um estudo descritivo de delineamento qualitativo. Foram realizadas entrevistas com profissionais da área da saúde, sobre a assistência à saúde de bebês prematuros. Participaram da pesquisa dezoito profissionais da saúde. Destes, três eram assistentes sociais, quatro enfermeiras, dois fonoaudiólogos, dois nutricionistas, dois psicólogos, quatro técnicos de enfermagem e um médico. Todos os entrevistados eram do sexo feminino. As entrevistas foram encerradas a partir da saturação das respostas, pois não houve mais elementos significativos. A realização das entrevistas ocorreu na Secretaria Municipal de Saúde, no Consórcio Intermunicipal de Saúde e no Hospital Santa Casa, todas as instituições de um município do estado do Paraná. A técnica utilizada para análise dos dados, mediante Análise do Conteúdo, foi a Análise Temática. Resultados: foram elencados dois núcleos temáticos para a discussão: A fragmentação do cuidado ao prematuro e as famílias; Contradições entre as práticas profissionais e a política pública instituída. Considera-se não haver acompanhamento efetivo para os prematuros e questiona-se a continuidade nos atendimentos, para uma assistência integral. Observa-se que os profissionais desconhecem o que a política pública preconiza, e valorizam a atenção e cuidado hospitalar. Conclusão: os desajustes são claros em todos os serviços de saúde, e então, não há o cumprimento da política