Expressão de S100, CD68 e moléculas de MHC classe II em lesões cervicais de alto e baixo grau induzidas por HPV

INTRODUÇÃO: Alguns tipos de papilomavirus humano (HPV) estão envolvidos em processos malignos no epitélio cervical, com 99% dos casos atribuídos à infecção por HPV oncogênico. O objetivo deste estudo foi detectar a proteína S100, CD68 e moléculas de MHC-II (complexo principal de histocompatibilidade classe II) em amostras de epitélio cervical uterino, de pacientes com lesões de alto e baixo grau induzidas pelo HPV. MÉTODOS: Cinquenta e oito amostras de pacientes positivos ou negativos, confirmados, para DNA de HPV de alto ou baixo risco oncogênico, e que tiveram diagnóstico histopatológico de neoplasia intraepithelial cervical (NIC) de graus I, II ou III ou foram negativas para lesão intraepithelial e malignidade (NILM), foram submetidas à reação de imunohistoquímica (IHQ) para proteína S100, CD68 e MHC-II (HLA-DR cadeia alfa). RESULTADOS: A presença da molécula MHC-II predominou em amostras exibindo alterações histopatológicas (p < 0,05). A detecção de S100+ foi mais numerosa em amostras com carcinoma (NIC III) (75%). A presença dessa proteína correlacionou-se significantemente (p < 0,05) com achados histopatológicos e a carga viral. CONCLUSÕES: Pequena expressão CD68+ foi observada, uma possível explicação seria que em nosso estudo as observações foram feitas em campo microscópicos aleatórios e não em áreas específicas. Os achados como a presença de S100 e a expressão de MHC-II, em amostras com alterações histológicas, podem sugerir que o sistema imune falha em controlar a replicação do HPV nas fases iniciais da infecção. Maiores estudos, com mais dados prospectivos, são necessários para confirmar esses resultados.ABSTRACT - INTRODUCTION: Some human papillomavirus (HPV) types are involved in malignant processes in the cervical epithelium, with 99% of cases attributed to oncogenic HPV infection. This study aimed to detect S100, CD68, and major histocompatibility complex class II (MHC-II) molecules in cervical uterine epithelial samples in patients with high- and low-grade lesions induced by HPV. METHODS: Fifty-eight samples from patients who were confirmed positive or negative for high-risk oncogenic HPV DNA, had histopathological diagnosis of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) of grades I, II, or III, or were negative for intraepithelial lesion or malignancy were subjected to immunohistochemistry reaction to S100 protein, CD68, and MHC-II (HLA-DR alpha chain). RESULTS: The presence of MHC-II predominated in samples exhibiting histopathological alterations (p < 0.05). S100 detection was more numerous in carcinoma samples (CIN III) (75%). Presence of this protein correlated significantly (p < 0.05) with histopathological findings and viral load. CONCLUSIONS: A small expression of CD68 was observed, which may be explained by the observation in our study having been made on random microscopic fields and not on specific areas. The findings, such as the presence of S100 protein and MHC-II expression in samples with histological alterations, could suggest that the immune system fails to control HPV replication at the early stages of infection. Further studies with larger prospective data are necessary to confirm this result

CD4 and CD8 T lymphocytes and NK cells in the stroma of the uterine cervix of women infected with human papillomavirus

INTRODUÇÃO: A resposta imune pode ser um elemento chave para a progressão ou remissão da infecção pelo papilomavírus humano (HPV) no estroma da cérvice uterina. Este estudo objetivou quantificar no estroma cervical a presença de linfócitos T CD4, CD8 e células NK, por imunohistoquímica, em lesões de alto e baixo grau em pacientes infectadas por HPV MÉTODOS: Utilizou-se 56 amostras de biópsia da estroma cervical, sendo 43 amostras positivas para DNA de HPV de alto risco oncogênico e com diagnóstico histopatológico de neoplasia intraepitelial cervical (NIC) de alto e baixo grau, ou negativa para lesão intraepitelial e malignidade (NILM), e 13 amostras de pacientes negativas para DNA de HPV com diagnóstico histopatológico NILM RESULTADOS: Maior quantidade de linfócitos T CD4 foi observada em amostras NIC II/III, carcinoma e NILM (p=0,04) e naquelas cuja carga viral esteve entre 10 e 1,000 RLU/PCB. O predomínio de linfócitos T CD8 ocorreu em maior proporção nas amostras NIC II/III (p=0,02) e em amostras com carga viral entre 100 e 1.000 RLU/PCB. As células NK prevaleceram nas amostras com lesões de baixo grau e com baixa carga viral CONCLUSÕES: Este estudo comprovou que nas fases iniciais da infecção, onde não há ainda alterações celulares de alto grau, não temos a presença de células que possam desencadear a fase efetora da resposta imune.ABSTRACT - INTRODUCTION: Immune response might be a key element regarding the progression or regression of human papillomavirus (HPV) infection in the stroma of the uterine cervix. This study aimed to quantify the presence of CD4 and CD8 T lymphocytes and NK cells in the cervical stroma, by means of immunohistochemistry, in high and low grade lesions in patients infected by HPV.METHODS: Fifty-six biopsy samples from the uterine cervix were used. Forty-three samples were positive for oncogenic high-risk HPV DNA and had a histopathological diagnosis of high and low-grade cervical intraepithelial neoplasia (CIN) or negative for intraepithelial lesion and malignancy (NILM); while the other 13 samples were negative for HPV DNA with a histopathological diagnosis of NILM RESULTS: Higher quantities of CD4 T lymphocytes were observed in CIN II/III, carcinoma and NILM samples (p = 0.04) and in those in which the viral load was between 10 and 1.000 RLU/PCB. CD8 T lymphocytes were predominant in CIN II/III samples (p = 0.02) and also in samples with viral loads between 100 and 1,000 RLU/PCB. NK cells predominated in samples with low-grade lesions and low viral load. CONCLUSIONS: This study proved that in the initial stages of the infection, in which no high-grade cell abnormalities have yet occurred, no cells that might trigger the effector phase of the immune response

Identificação “in situ” de células de langerhans, macrófagos e moléculas MHC de classe II em pacientes infectadas pelo papilomavírus humano, com lesões de alto e baixo grau, em Campo Grande, MS

A infecção persistente por alguns tipos de HPV no trato genital feminino pode causar neoplasia intra-epitelial cervical (NIC) e carcinoma. Sabe-se que, pequenas quantidades de partículas virais são expostas ao sistema imunológico no inicio da infecção. Investigação "in situ" da resposta imune por Imunohistoquímica pode explicar eventos importantes para resolução da infecção viral. A pesquisa teve por objetivo detectar a presença de células e moléculas da resposta imune em amostras histológicas de colo uterino de pacientes infectadas com o HPV. Foram incluídas 58 amostras de biópsia de colo uterino, sendo, 34 positivas para HPV DNA de alto risco oncogênico e com diagnóstico de NIC I, II, III e 14 negativas para HPV DNA e com diagnóstico histopatológico negativo para lesão intra-epitelial e malignidade (NILM), sendo o restante positivas pelo teste de captura híbrida e com diagnóstico histopatológico NILM. A imunohistoquímica foi realizada com anticorpos monoclonais anti-S100, anti-CD68, anti-HLA-DR e sistema de detecção de LSAB+Sys HRP (Dako), as lâminas foram observadas em aumento de 100X e 400X. A análise por imunohistoquímica mostrou que quanto mais severa a lesão maior a presença de células Langerhans (p=0,001) e de moléculas do Complexo de Histocompatibilidade Principal de classe II (MHC II) (p=0,021). Com relação aos macrófagos, não se observou correlação estatística entre a presença destas células e os achados histopatológicos. A correlação entre os diferentes níveis de carga viral e a presença simultânea de células de Langerhans, macrófagos e MHC II foi significante (p=0,022). Houve escassa quantidade de células de Langerhans e macrófagos, bem como da expressão de MHC II, nas amostras NILM, mesmo no grupo que, apesar de não possuir alterações celulares, era positivo para DNA HPV. Os resultados mostraram que nas amostras positivas para o DNA de HPV, mas que não apresentam alterações histopatológicas (NILM) ou apenas eram portadoras de lesão de baixo grau, e nas amostras com baixa carga viral, não estavam ocorrendo os sinais adequados para o início da ativação da resposta imune.ABSTRACT - Persistent infection of female genital tract by some HPV types takes to cervical intraepithelial neoplasia (CIN) and carcinoma. In begin of infection small amounts of viral particles are exposed to the immune system. Immunohistochemystry investigation about “in situ” immune response can explain important events to resolved viral infection. The research aimed to detect immune cells presence in uterine cervix histologycal samples from HPV infected patients. We inlcuded in this study 58 uterine cervix biopsy samples from 34 positive patients to oncogenic high risk HPVDNA and with CIN I, II, III diagnostic, and 14 negative samples to HPVDNA and with histopathological diagnostic of negative to intraepithelial lesion and malignancy (NILM), the remaining samples were positive by hybrid capture and with NILM diagnostic. The immunohistochemystry were made with monoclonal antibodies anti-S100, anti-CD68, anti-HLA-DR and detection system LSAB+Sys HRP (Dako). The sections were observed in 100X and 400X. Analysis by Immunohistochemistry showed that how severe the injury as greater Langerhans cells (p=0.001) and major histocompatibility complex class II molecules (MHC II) (p=0.021) presence. About macrophages, there wasn’t statistical correlation among cells presence and histopathologic findings. The correlation between the different levels of viral load and the simultaneous presence of Langerhans cells, macrophages and MHC II was significant (p=0.022). There was a small quantity of Langerhans cells and macrophages and expression of MHC II in NILM samples; even within the group despite having no cellular changes were positive for HPV DNA. The results showed that in the samples positive for HPV DNA, but have no histopathological changes (NILM) or only low-grade lesion, and samples with low viral load isn’t going the adequate stimulus to the beginning of activation immune response

Linfócitos CD4, CD8 e células NK no estroma da cérvice uterina de mulheres infectadas pelo papilomavírus humano

INTRODUÇÃO: A resposta imune pode ser um elemento chave para a progressão ou remissão da infecção pelo papilomavírus humano (HPV) no estroma da cérvice uterina. Este estudo objetivou quantificar no estroma cervical a presença de linfócitos T CD4, CD8 e células NK, por imunohistoquímica, em lesões de alto e baixo grau em pacientes infectadas por HPV MÉTODOS: Utilizou-se 56 amostras de biópsia da estroma cervical, sendo 43 amostras positivas para DNA de HPV de alto risco oncogênico e com diagnóstico histopatológico de neoplasia intraepitelial cervical (NIC) de alto e baixo grau, ou negativa para lesão intraepitelial e malignidade (NILM), e 13 amostras de pacientes negativas para DNA de HPV com diagnóstico histopatológico NILM RESULTADOS: Maior quantidade de linfócitos T CD4 foi observada em amostras NIC II/III, carcinoma e NILM (p=0,04) e naquelas cuja carga viral esteve entre 10 e 1,000 RLU/PCB. O predomínio de linfócitos T CD8 ocorreu em maior proporção nas amostras NIC II/III (p=0,02) e em amostras com carga viral entre 100 e 1.000 RLU/PCB. As células NK prevaleceram nas amostras com lesões de baixo grau e com baixa carga viral CONCLUSÕES: Este estudo comprovou que nas fases iniciais da infecção, onde não há ainda alterações celulares de alto grau, não temos a presença de células que possam desencadear a fase efetora da resposta imune