ATIVIDADE ANTIFÚNGICA DO EXTRATO ETANÓLICO DAS CASCAS DE Maytenus guianensis KLOTZSCH EX REISSEK SOBRE Candida albicans

The present work aimed the evaluation of antifungal activity of the ethanolic extract of the barks of Maytenus guianensis against Candida albicans in vitro. Collected barks were properly dried and grinded, being subjected to Sohxlet extraction with ethanol p.a, after dillution with DMSO (2%). For the evaluation of biological activity against the fungus, agar well diffusion technique was used in the concentration of 1mg.mL-1, which was previously defined by the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) technique performed. Candida albicans yeasts were cultured in BDA medium during 24 hours with turbidity absorbance. For negative control, only the BDA medium was used; Positive control was performed with the emulsifier chemical Kasumin®. The design was totally randomized, with three replicas per treatment. The evaluation consisted in assessing inhibition halos of fungal growth, each 24 hours, during five days. After 120 hours, the ethanolic extract from the barks of M. guianensis presented results of growth inhibition halos of 1,52 mm against C. albicans, demonstrating a larger inhibitory spectrum, if compared to negative control (inhibition halos of 2,11 mm). The results highlight the antimicrobial potential of M. guianensis, which may be promising for drug development research.Keywords: Celastraceae; triterpenes; phytochemistry.O presente trabalho teve como objetivo avaliar a atividade fungicida do extrato etanólico das cascas de Maytenus guianensis sobre Candida albicans in vitro. As cascas coletadas foram devidamente secas e trituradas, sendo submetidas à extração em aparelho de Soxhlet com etanol p.a., sendo posteriormente diluídas com DMSO a 2% e para avaliar o potencial biológico sobre o fungo, utilizou-se à técnica de difusão em ágar em poços na concentração de 1mg.mL-1, concentração esta já definida pela técnica de Menor Concentração Inibitória (MIC) realizada. Leveduras de C. albicans foram cultivadas em meio BDA durante 24 horas com a absorbância de turvação. Para o controle negativo, utilizou-se somente o meio BDA; controle positivo foi realizado com emulsificante Kasumin®. O delineamento foi inteiramente casualizado, com três repetições por tratamento. A avaliação consistiu em verificar os halos de inibição de crescimento fúngico, a cada 24 horas, durante cinco dias. Observou-se, que após 120 horas, o extrato etanólico das cascas de M. guianensis apresentou resultados dos halos de inibição sobre C. albicans, na qual os halos de inibição de crescimento foram de 1,52 mm do extrato etanólico, demonstrando maior espectro inibitório, se comparado com o controle negativo que foi de 2,87 mm, enquanto que no controle positivo o halo de inibição foi de 2,11 mm. Os resultados sinalizam o potencial antimicrobiano dessa planta, podendo ser promissoras para estudos de desenvolvimento de novos fármacos.Palavras-chave: Celastraceae, triterpenos, fitoquímica

In Vitro Antiplasmodial Activity of Flower Extracts from combretum leprosum mart (mofumbo)

Malaria is the cause of hundreds of deaths per year , besides putting billions of people at risk of developing disease. When it comes to its therapy, the drugs used currently are losing its efficacy due to increase inn the frequency of resistant strains of the parasite, highlight the importance for the serach of new classes of molecules prsentign antiplasmodial activity. In the present work, the antiplasmodial activities of five extracts from the flowers of Comretum leprosum are described. The method employed for obtaingine the extracts was silica gel column chromatography, and the techniques used for the analysis of antiplasmodial activity and citotoxicity were ELISA and MTT respectively, were a selectivitu index was calculated after the obtainign of these two values. The extract presenting the highest antiplasmodial activity was the chloroform extract, however, this extrac also presented the higther cytotoxicity and therefore the extract presenting the best overall activity was the hexane extract. The study deminstrated the plant Combretum leprosum has active substances against P. falciparum and therefore is a potential to be expored in funther pharmacological studies

IN VITRO OF TRIPANOCID ACTIVITY OF NATURALS AMIDES AND THEIR RESPECTIVE SYNTHETIC ANALOGS

O presente estudo descreve a atividade tripanocida in vitro e atividade hemolítica das amidas naturais piplartine e piperine e de seus respectivos análogos sintéticos. A avaliação in vitro da atividade tripanocida foi realizado com formas amastigotas e tripomastigotas de T. cruzi. O Trypanosoma cruzi (cepa de Tulahuen) expressando o gene da β-galactosidase de Escherichia coli foi cultivado em uma monocamada de fibroblastos L929 de camundongo. As substâncias foram diluídos a partir da solução estoque no momento do ensaio, o Benzonidazol no seu IC50 (1 µg/mL = 3,81 µM) foi usado como controle positivo. Os resultados foram expressos como a percentagem de inibição do crescimento. Os compostos ativos foram  testados in vitro para determinação da toxicidade celular em células L-929 não infectadas utilizando o corante alamarBlue®. Para o ensaio de hemólise as substâncias foram diluídas em concentrações de 200 a 1.56 μM, utilizando como controle positivo saponinas e hemácias saudáveis como controle negativo.  Os compostos 1b, 1m, 14f, 18a e 18b foram ativos para a atividade tripanocida, com destaque para o análogo 1m, recomendado para o ensaio in vivo. Em relação a atividade hemolítica os compostos 1a e 18a apresentaram uma pequena taxa hemolítica na maior concentração (200 µM). Os análogos da piplartine (1m e 14f) e o análogo da piperine (18b) foram menos hemolíticos na maior concentração. Assim, todos os compostos são de interesse para futuras investigações

Avaliação da atividade antiplasmodial e leishmanicida in vitro compostos de cascas e flores de Combretum leprosum

Dissertação apresentada ao Programa de Pós - Graduação em Biologia Experimental - PGBIOEXP da Universidade Federal de Rondônia, para obtenção do título de Mestre em Biologia Experimental. Orientador: Prof. Dr. Valdir Alves Facundo.Malária e leishmaniose sã doenças negligenciadas responsáveis por milhões de mortes por ano, para as quais há medicamentos disponíveis, porém a resistência às drogas pelos parasitos impõe obstáculos na eliminação destas doenças. Fontes alternativas, como plantas medicinais, se constituem em boas candidatas para a prospecção de novas substâncias com potencial antiplasmoidal e leishmanicida e por isso é necessário pesquisá-las. Com o objetivo de investigar a atividade biológica da espécie vegetal Combretum leprosum, o fracionamento dos extratos das cascas e das flores foi realizado em coluna cromatográfica de sílica gel, e a análise das frações foi feita por Cromatografia em Camada Delgada (CCD). Dois extratos, seis eluatos, quatro frações semi purificadas e três compostos purificados foram obtidos. Uma triagem química foi realizada para os dois extratos brutos. Três derivados de um composto purificado foram obtidos e testados contra P. falciparum. Os testes antiplasmodiais foram realizados com hemácias humanas infectadas com cepa W2 de P. falciparum, e avaliados pela técnica fluorimétrica SYBR Green. Testes de hemólise foram realizados para três compostos para verificar uma possível ação hemolítica. Testes antileishmaniais in vitro foram realizados com promastigotas de Leishmania amazonensis, L. infantum chagasi e L. braziliensis, nos quais a técnica utilizada para avaliar a viabilidade desde foi o ensaio de resazurina. Testes de citotoxidade foram realizados em células VERO, HepG2 e J774 e a viabilidade celular avaliada pelo método MTT. A triagem fitoquímica indicou que o extrato CLEBF (Combretum leprosum Extrato Bruto das Flores) possui triterpenos, glicosídeos, taninos e flavonoides, enquanto o extrato CLEBC (C. leprosum Extrato Bruto das Cascas) mostrou ter triterpenos, saponinas, taninos e glicosídeos em sua composição de acordo com os testes feitos. Os resultados encontrados mostraram que cinco compostos das flores e três compostos das cascas se mostraram ativos contra P. falciparum, onde nenhum dos compostos testados se mostrou hemolítico. Para Leishmania spp., apenas três compostos foram ativos. Nenhum composto foi seletivo para qualquer uma das espécies de Leishmania ensaiada. Para P. falciparum, seis compostos foram considerados seletivos. Os experimentos com o triterpeno natural e seus derivados ensaiados contra P. falciparum mostraram que o composto diacetilado não diferiu significativamente do composto natural em termos de atividade biológica, enquanto os compostos diacetilado oxidado e triacetilado tiveram suas atividades biológicas diminuídas contra P. falciparum. Conclui-se que nas cascas e flores de C. leprosum há substâncias ativas contra P. falciparum e Leishmania spp., e novos testes everão ser realizados in silico e in vivo para melhor entender a ação desta planta contra estes parasitos

Acute genotoxicity analysis in vivo of the aqueous extract of Maytenus guyanensis Amazonian chichuá

AbstractThe species Maytenus guyanensis Klotzsch ex Reissek, Celastraceae, present a wide variety of possible pharmacological activities and its roots and stems are used by popular medicine in the western Amazon rainforest. Few studies have demonstrated the genotoxic safety of the popular use of this species, and owing to this, the present study aimed to perform an analysis of the acute genotoxicity in vivo of the aqueous extract of M. guyanensis. Male and female mice from Mus musculus species, of weights ranging from 20 to 40g, organized in eight groups with different treatments were used. The aqueous extracts of the bark of M. guyanensis were administered orally by gavage with 0.1ml of the test substance per 10g of the animal, followed by performance of comet assay in peripheral blood, PCE/NCE correlation and occurrence of micronuclei in the bone marrow. It was found that the aqueous extract of M. guyanensis, with ten times higher concentration than those used in ethnopharmacology, did not present genotoxic effect and, moreover, it has antigenotoxic action in mice treated acutely. Further studies regarding bioaccumulation and chronic effects of this species are suggested, in order to improve the understanding of its mechanism of action, ensuring the efficacy and safety of its utilization and developing phytotherapics and drugs

Styrylpyrone, isolated from an Amazon plant, induces cell cycle arrest and autophagy in <i>Leishmania amazonensis</i>

The search for bioactive compounds against diseases is imperative and the richness of the Amazon provides a large source to be explored. Current therapies for the treatment of parasitic infections have severe side effects and low efficacy, which makes the development of an effective chemotherapy extremely important. In this study, we describe the isolation of styrylpyrone 4-methoxy-6-(11,12-methylenedioxy-trans-styryl)-2-pyrone (SP), from the Amazonian tree species, Aniba panurensis, the in vitro activity against Leishmania amazonensis promastigotes, and its in silico pharmacokinetics properties. The results showed morphological and ultrastructural alterations, cell cycle impairment, increased reactive oxygen species production, accumulation of lipid bodies and formation of autophagic vacuoles in SP-treated parasites. In silico studies revealed that the compound has a high drug-score, which is encouraging for further investigation. Our results indicate that SP is a promising drug candidate, which induces alterations in L. amazonensis leading to parasite death through cell cycle arrest and autophagy. </p