Certamen de fin de carrera: año de 1879 a 1880

Plan de labores de explotación de un filón de plomo que buza 67º cuya potencia es de 3 a 4 metros y cuya masa está formada de galena argentífera con ganga abundante de barita, cuarzo, hierro espástico y blonda. Preparación mecánica de los minerales y proyecto de una fábrica para un beneficio metalúrgico.Las maderas escasean en la localidad pero abundan los combustibles minerales

Caso clínico: Síndrome Cornelia de Lange Mutación SMC1A

Los desórdenes causados por mutaciones en los genes codificantes de las subunidades y de las proteínas reguladoras del complejo de cohesinas, son llamados colectivamente cohesinopatías. La más conocida es el Síndrome de Cornelia de Lange (SCdL), la cual es un desorden multisistémico del desarrollo caracterizado por dismorfia facial, malformaciones en las extremidades, alteraciones cognitivas y del crecimiento. Mutaciones en cinco genes, subunidades codificantes del complejo de cohesinas (SMC1A, SMC3, RAD21) y sus reguladores (NIPBL, HDAC8), son responsables de aproximadamente el 70% de los casos de SCdL. Aquí, se describe un varón con dismorfia facial, sinofridia, retraso en el crecimiento, discapacidad intelectual, marcada ERGE y comunicación interauricular. El estudio se centra en el gen SMC1A, su diagnóstico clínico y el procedimiento para su diagnóstico molecular. En este sentido, se realiza una comparación clínica entre nuestro paciente y los previamente reportados con mutaciones SMC1A y NIPBL a fin de establecer el fenotipo característico de este gen, que facilite su diagnóstico clínico y molecular

Mutagénesis dirigida y ensayo enzimático de la mutación R501P en el gen HMGCS2

Introducción: la deficiencia de HMG-CoA sintasa mitocondrial humana es un error congénito del metabolismo que muestra un patrón de herencia autosómico recesivo. Tiene muy baja prevalencia. Está producida por mutaciones en homocigosis o heterocigosis compuesta del gen HMGCS2. Fue descrita por primera vez en 1997. La enzima mHS tiene un rol importante en la cetogénesis, ya que es la encargada de catalizar la condensación del acetil-CoA y el acetoacetil-CoA para formar HMG-CoA en las mitocondrias de los hepatocitos. Su clínica es muy inespecífica y se caracteriza por crisis agudas de hipoglucemia con hipocetonemia. Los síntomas más frecuentes son náuseas, vómitos, irritabilidad y letargia. Sin tratamiento, puede progresar a encefalopatía, coma y muerte. Material y métodos: en este trabajo se ha utilizado un método de mutagénesis dirigida y ensayo enzimático “in vitro” para medir la actividad de la variante alélica R501P, reportada por primera vez. Para llevarlo a cabo, se han empleado células de Escherichia coli usando el vector de expresión pMAL-c2X-mHS. Posteriormente, el efecto de cada mutación en la estructura de la proteína ha sido analizado con un modelo bioinformático en 3D. Además, se ha comparado su actividad con la de la proteína wild-type (WT) y con la variante R501Q, previamente reportada y de localización análoga en la proteína. Resultados: todas las proteínas recombinantes se han conseguido obtener solubles en disolución. La proteína WT ha alcanzado una concentración de 0,298μg/μl y una actividad enzimática de 0,910 U/mg, mientras que las variantes R501P y R501Q han presentado una concentración de 0,241μg/μl y 0,304μg/μl respectivamente y una ausencia total de actividad. Las predicciones bioinformáticas se correlacionan con estos resultados: el efecto producido en ambas mutaciones es la distorsión de una zona de la proteína próxima a la superficie de dimerización, impidiendo así su actividad catalítica. Discusión: por tercera vez se ha comprobado la buena reproductibilidad del método de expresión, purificación y ensayo enzimático de la enzima mHS humana. Debido a la inespecificidad del diagnóstico clínico y bioquímico, el estudio molecular y la caracterización funcional de las mutaciones “in vitro” emerge como el método de elección para el diagnóstico de certeza de estos pacientes

Patología cardiaca en el síndrome Cornelia de Lange

El síndrome Cornelia de Lange es un trastorno congénito del desarrollo con una incidencia que oscila entre 1:10.000 a 1:30.000 nacidos vivos. De herencia autosómica dominante o ligada al cromosoma X, es esporádico en la mayoría de los casos. En la actualidad se conocen cinco genes causales del síndrome que codifican proteínas del complejo de cohesinas: NIPBL, SMC1A, SMC3, HDAC8 y RAD21. La clínica se caracteriza por: aspecto craneofacial distintivo, discapacidad intelectual, retraso de crecimiento y del desarrollo, malformaciones de las extremidades superiores, hirsutismo generalizado y afectación multisistémica. Aunque estos pacientes presentan una alta incidencia de malformaciones cardíacas no se considera esta patología como un criterio diagnóstico principal. En este trabajo se estudia por primera vez una población española de 148 pacientes con SCdL de los que 51 presentan patología cardíaca (34.46%). Las malformaciones congénitas más frecuentes son la estenosis pulmonar y los defectos septales, con una incidencia del 27.05% y 47.05% respectivamente. Estas cifras coinciden, con pequeñas diferencias, con los estudios de Selicorni en población italiana y Chatfield en población americana. Sin embargo, se observa por primera vez que el gen que más se asocia con cardiopatía congénita no es el NIPBL sino el HDAC8, aunque la baja casuística recogida recomienda aumentar el tamaño de la muestra. Además, a pesar de ser considerados como defectos menores, el foramen oval permeable y/o el ductus arterioso persistente cerrado espontáneamente, son alteraciones cardíacas muy prevalentes en estos pacientes

DIAGNÓSTICO DEL SÍNDROME CORNELIA DE LANGE MEDIANTE ALGORITMOS DE RECONOCIMIENTO FACIAL

El fenotipo característico o clásico del síndrome de Cornelia de Lange (SCdL) está asociado con un patrón facial reconocible. Sin embargo, la heterogeneidad en los genes causales y la presencia de síndromes superpuestos han hecho que cada vez sea más difícil diagnosticarlo sólo por las características clínicas.La tecnología DeepGestalt basada en el aprendizaje profundo, una esfera de la inteligencia artificial, y su aplicación Face2Gene, está teniendo un impacto creciente en el diagnóstico y el manejo de las enfermedades genéticas mediante el análisis de las características de los individuos afectados.En este trabajo examinamos la destreza de este programa en el diagnóstico del SCdL. Para ello, se ha utilizado una cohorte de 14 individuos remitidos al laboratorio de Genética Clínica y Genómica Funcional para el análisis molecular del SCdL. Se ha comparado: el puntaje clínico según los criterios de Kline, los resultados del análisis facial con la aplicación Face2Gene y los resultados genéticos obtenidos. La sensibilidad de la aplicación fue del 100%, para el SCdL y los casos del síndrome de KBG hallados.El uso del reconocimiento facial, no solo se ha visto que es fiable, sino que puede facilitar considerablemente el diagnóstico y abrir más campos de investigación.<br /

Primer estudio del sistema nervioso somático y autónomo en un paciente con Síndrome de Cornelia de Lange.

El Síndrome Cornelia de Lange (SCdL) es un trastorno del desarrollo de afectación multisistémica, caracterizado por un amplio espectro de hallazgos físicos, cognitivos y de comportamiento. Se calcula una incidencia anual de 1/10.000 a 1/30.000 nacidos vivos, no hallándose diferencias entre sexos ni grupos étnicos. Este síndrome se engloba dentro de las enfermedades catalogadas como cohesinopatías, siendo las mutaciones en el gen NIPBL la primera causa del síndrome (70-75% de los casos). Su fenotipo oscila de leve a muy grave. El objetivo general del trabajo ha sido valorar el estado funcional del sistema nervioso periférico y autónomo en un paciente con SCdL. Previamente, se identificó que padecía una mutación intrónica (c. 5329-15A>G) en el gen NIPBL que daba lugar a la pérdida del exón 28. Era además, un caso familiar en el que estaban también afectados la madre, el hermano y el abuelo materno, aunque todos ellos con un fenotipo leve. Los estudios mediante electroneurografía motora y sensitiva no han detectado alteraciones del sistema nervioso somático a nivel distal, ni proximal, por lo que no se evidencia disfunción de la fibra gruesa mielínica motora y/o sensitiva. Sin embargo, el estudio del sistema nervioso autónomo mediante la prueba cuantitativa del reflejo axonal sudomotor, muestra una alteración a nivel de las glándulas sudoríparas, que abre la posibilidad de disfunción de la fibra fina amielínica autonómica. De todos modos, estas alteraciones podrían ser explicadas por diversas causas tales como la presencia de lesiones posganglionares, la oclusión del conducto de la glándula sudorípara e incluso el daño o ausencia de la propia glándula. Por lo que nuevos estudios deberán ser realizados<br /

Envejecimiento en el Síndrome de Cornelia de Lange

El Síndrome de Cornelia de Lange (SCdL) es un trastorno multisistémico incluido dentro del grupo de cohesinopatías que cursa principalmente con discapacidad intelectual, rasgos faciales característicos, anomalías en extremidades superiores y crecimiento atípico. Los principales genes alterados, conocidos hasta el momento, en esta enfermedad son NIPBL, SMC3, RAD21, SMC1A, HDAC8, BRD4, ANKRD11, MAU2. Debido a las características fenotípicas, a las comorbilidades asociadas y a la esperanza de vida reducida, se cree que este síndrome puede estar asociado a un envejecimiento precoz. Por ello, el objetivo de este trabajo es valorar la posible existencia de un deterioro prematuro bioquímico en el SCdL. Para ello, se ha realizado un estudio retrospectivo de 24 valores bioquímicos en una cohorte española de 24 individuos con SCdL (9 hombres y 15 mujeres) de edades comprendidas entre 2 y 37 años. Las analíticas fueron realizadas en el Hospital Clínico Universitario Lozano Blesa durante el XIII Congreso Nacional del Síndrome de Cornelia de Lange en el 2018. Los 24 parámetros analizados se han clasificado en 8 categorías: eje adrenal, metabolismo lipídico, función cardiaca, metabolismo glucídico, eje tiroideo, eje de crecimiento, función renal y metabolismo mineral óseo. Se ha realizado una regresión lineal para estudiar cambios relacionados con la edad, y comparado los datos con los valores de normalidad en población sana de diferentes cohortes, tanto en edad pediátrica como en la edad adulta y senectud. Además, se han utilizado las bases de datos Pubmed, OMIM y HPO para realizar una detallada revisión bibliográfica del deterioro asociado a la edad que sufren estos parámetros en condiciones fisiológicas. Con todo ello, se observa que los individuos con SCdL presentan un deterioro prematuro en el metabolismo glucídico y mineral óseo. Por lo tanto, con este trabajo se pone de manifiesto la importancia de realizar un seguimiento clínico con la evaluación del índice HOMA-IR y el metabolismo fosfocálcico en los individuos con SCdL.<br /

Primera caracterización funcional de una mutación en un tracto de polipirimidinas del gen NIPBL en un paciente con Síndrome Cornelia de Lange

El Síndrome Cornelia de Lange es un desorden multisistémico caracterizado por rasgos faciales distintivos, retraso mental y de crecimiento, malformaciones en las extremidades, sobre todo superiores, y reflujo gastroesofágico, entre otras afecciones. En la mayoría de los casos, los pacientes presentan mutaciones de novo del gen NIPBL, que es un elemento regulador del complejo de cohesinas. El paciente estudiado en este trabajo presentaba la deleción c.6344del (-13)_(-8) en el intrón 36 del gen NIPBL. Para confirmar dicha mutación se ha realizado un análisis a nivel de DNA, detectando la ausencia de 6 nucleótidos en dicho intrón. Además, mediante RT-PCR del RNA se ha comprobado que está mutación del intrón 36 se asocia a un tránscrito aberrante con pérdida del exón 37, que probablemente codifica una proteína truncada no funcional. Por medio de la construcción de minigenes ha sido posible estudiar la localización de la mutación c.6344del(-13)_(-8), y demostrar que la eliminación de la secuencia de polipirimidinas del intrón 36 o la sustitución de la misma por una región de purinas provocaba la pérdida del exón 37. Todo ello sugiere que la mutación podría estar afectando al tracto rico en pirimidinas del intrón 36. Esta es la primera vez que se describe una mutación de splicing del gen NIPBL que afecta a la secuencia rica en polipirimidinas

Mutaciones de splicing y fenotipo asociado en dos pacientes con Síndrome Cornelia de Lange

El Síndrome Cornelia de Lange (SCdL) es un trastorno congénito del desarrollo con gran variabilidad fenotípica. Hasta la fecha se han descrito cinco genes asociados con este síndrome, SMC1A, SMC3 y RAD21 son componentes estructurales del complejo de cohesinas, mientras que NIPBL y HDAC8 son reguladores del mismo. Se estima que aproximadamente el 80% de los pacientes con SCdL presentan mutaciones en NIPBL. En este trabajo, se presentan dos nuevas mutaciones de splicing en el gen NIPBL. Están localizadas en posiciones no canónicas y son las mutaciones intrónicas más profundas descritas hasta el momento. El paciente 1 posee la mutación c.5329-15A>G en el intrón 27 que provoca la pérdida del exón 28 y que mantiene la pauta de lectura. La adenina que resulta mutada podría ser el nucleótido clave en la secuencia del punto de ramificación. El paciente 2 presenta una deleción de seis nucleótidos en el intrón 36, c.6344del(-13)_(-8), que da lugar a pérdida del exón 37 y que rompe la pauta de lectura. Esta mutación podría afectar al tracto de polipirimidinas. En el paciente 1 los resultados de la qPCR han mostrado una expresión de mRNA similar al observado en el control. Sin embargo, en el paciente 2 hay casi un 30% de reducción de la expresión de NIPBL debido probablemente a la activación de mecanismos de degradación de tránscritos aberrantes (NMD, nonsense mediated decay). Estos resultados apoyarían la idea de que una disminución en los niveles de mRNA por un tránscrito que rompe la pauta de lectura o codifica una proteína truncada, da lugar a un fenotipo más severo que cuando hay mutaciones/transcritos que mantienen la pauta de lectura y que no afectan a los niveles de mRNA

Bases genéticas y evolución clínica de un paciente con delección 16p11.2, fenotipo Cornelia y Síndrome de Klinefelter.

Se describe, por primera vez, la evolución clínica durante nueve años de un paciente con síndrome de microdelección 16p11.2 (delección de alrededor de 600kb que afecta a 26 genes) y síndrome de Klinefelter, que debuta perinatalmente cumpliendo los criterios clínicos del Síndrome Cornelia de Lange (SCdL), para, poco a poco, ir dejando atrás este fenotipo, e ir adquiriendo algunas de las manifestaciones típicas de la microdeleción 16p11.2. Aunque la genética de la microdelección 16p11.2 es bien conocida, la clínica es extremadamente variable, siendo difícil llegar al diagnóstico por el fenotipo. El paciente presentado sirve para describir un nuevo grupo de manifestaciones del síndrome que semejan a las halladas en el SCdL. El conocimiento de la estructura, función y patología de las proteínas codificadas por lo genes deleccionados, se ha visto ampliado enormemente en los últimos años, gracias a la disponibilidad de información de bases de datos como NCBI, OMIM, Genecards, Uniprot, Bgee, Hive Biochemistry y DisGeNET. Todo ello, permite empezar a establecer relaciones de causalidad entre genotipo y fenotipo cada vez más ajustadas. En este trabajo se sugiere la posible implicación de los genes TBX6 y PPP4C en la génesis del fenotipo, sobre todo facial, del síndrome de la microdelección 16p11.2. Sus funciones probadas en el desarrollo de la forma corporal y sus conexiones funcionales con los genes causales más importantes del SCdL (NIPBL y HDAC8) refuerzan esta hipótesis.<br /