Fast Detection Of Paracetamol On A Gold Nanoparticle-chitosan Substrate By Sers

A fast method for detecting pharmaceutical drugs, such as paracetamol, by surface-enhanced Raman spectroscopy (SERS) using a gold nanoparticle substrate was studied. Gold nanoparticles were synthesized using chitosan (AuNP-chitosan) as a reductant and capping agent and subsequently deposited on glass slides as a thin film. The SERS performance of AuNP-chitosan films was evaluated using methylene blue (MB, 10-6 mol L-1) as a SERS probe molecule. The method is based on drop-drying an analyte solution (paracetamol, 10-3 mol L-1) onto a substrate surface and subsequently analyzing by Raman spectroscopy. The spectra were obtained in 10 seconds with two accumulations and exhibit a high signal-to-noise ratio. This preliminary study supports the AuNP-chitosan substrate as a SERS sensor, for a convenient analytical method for detection of paracetamol and other pharmaceutical drug molecules. © the Partner Organisations 2014.61135643568Halling-Sorensen, B., Nielsen, N., Lansky, P.F., Ingersley, F., Hansen, L., Lutzhoft, H.C., Jorgensen, S.E., (1998) Chemosphere, 36, p. 357Daughton, C.G., Ternes, T.A., (1999) Environ. Health Perspect., 107, p. 907Klimova, K., Leitner, J., (2012) Thermochim. Acta, 550, p. 59Parojcic, J., Karljikovic-Rajic, K., Duric, Z., Jovanovic, M., Ibric, S., (2003) Biopharm. Drug Dispos., 24, p. 309Holm, J.V., Rugge, K., Bjerg, P.L., Christensen, T.H., (1995) Environ. Sci. Technol., 29, p. 1415Ternes, T.A., (1998) Water Res., 32, p. 3245Reddersen, K., Heberer, T., Dunnbier, U., (2002) Chemosphere, 49, p. 539Zwiener, C., Glauner, T., Frimmel, F.H., (2000) High Resolut. Chromatogr., 23, p. 474Buser, H.R., Poiger, T., Muller, M.D., (1999) Environ. Sci. Technol., 33, p. 2529Chen, L.-X., Li, D.-W., Qu, L.-L., Li, Y.-T., Long, Y.-T., (2013) Anal. Methods, 5, p. 6579Péron, O., Rinnert, E., Toury, T., Chapelle, M.L., Compere, C., (2011) Analyst, 136, p. 1018Alvarez-Puebla, R.A., Liz-Marzan, L.M., (2012) Angew. Chem., Int. Ed., 51, p. 11214Fleischmann, M., Hendra, P.J., McQuillan, A.J., (1974) Chem. Phys. Lett., 26, p. 63Le Ru, E.C., Etchegoin, P.G., (2009) Principles of Surface-enhanced Raman Spectroscopy, , Elsevier, AmsterdamAroca, R., (2006) Surface-enhanced Vibrational Spectroscopy, , John Wiley & Sons, Southern GateZhang, Y., Liu, S., Wang, L., Qin, X., Tian, J., Lu, W., Chang, G., Sun, X., (2012) RSC Adv., 2, p. 538Moula, G., Aroca, R.F., (2011) Anal. Chem., 83, p. 284Yu, W.W., White, I.M., (2012) Analyst, 137, p. 1168Zhai, W.L., Li, D.W., Qu, L.L., Fossey, J.S., Long, Y.T., (2012) Nanoscale, 4, p. 37Alsawafta, M., Badilescu, S., Packirisamy, M., Truong, V.V., (2011) React. Kinet., Mech. Catal., 104, p. 437Esumi, K., Takei, N., Yoshimura, T., (2003) Colloids Surf., B, 32, p. 117Potara, M., Maniu, D., Astilean, S., (2009) Nanotechnology, 20, p. 315602Santos, E.B., Sigoli, F.A., Mazali, I.O., (2013) Vib. Spectrosc., 68, p. 246Wang, Y.Q., Liang, W.S., Geng, C.Y., (2009) Nanoscale Res. Lett., 4, p. 684Vieira, E.F.S., Cestari, A.R., Santos, E.B., Dias, F.S., (2005) J. Colloid Interface Sci., 289, p. 42Cheng, Y.-C., Yu, C.-C., Lo, T.-Y., Liu, Y.-C., (2012) Mater. Res. Bull., 47, p. 1107Nhung, T.T., Bu, Y., Lee, S.-W., (2013) J. Cryst. Growth, 373, p. 132Xiao, G.N., Man, S.Q., (2007) Chem. Phys. Lett., 447, p. 305Ruan, C.M., Wang, W., Gu, B.H., (2007) J. Raman Spectrosc., 38, p. 568Peng, Y., Niu, Z., Huang, W., Chen, S., Li, Z., (2005) J. Phys. Chem. B, 109, p. 10880Elbagerma, M.A., Azimi, G., Edwards, H.G.M., Alajtal, A.I., Scowen, I.J., (2010) Spectrochim. Acta, Part A, 75, p. 1403Chazallon, B., Celik, Y., Focsa, C., Guinet, Y., (2006) Vib. Spectrosc., 42, p. 206Nanubolu, J.B., Burley, J.C., (2012) Mol. Pharmaceutics, 9, p. 154

Atividade antibacteriana de óleos essenciais de plantas frente a linhagens de Staphylococcus aureus e Escherichia coli isoladas de casos clínicos humanos

A ação antibacteriana in vitro de óleos essenciais de seis plantas foi verificada por meio da Concentração Inibitória Mínima (CIM=%v/v) pela diluição dos óleos em meio de cultura Mueller Hinton Agar, frente a linhagens de Staphylococcus aureus (n=16) e Escherichia coli (n=16) isoladas de casos clínicos humanos, além de 1 amostra padrão ATCC para cada espécie (Sa ATCC 25923 e Ec ATCC 25922), e determinação de curvas de sobrevivência em concentrações equivalentes a CIM90% dos respectivos óleos. O óleo essencial de canela foi o mais eficiente, com valores de CIM90% de 0,047 e 0,09 para S. aureus e E. coli respectivamente, enquanto gengibre (0,09), cravo da índia (0,095) e capim cidreira (0,1) apresentaram eficiências semelhantes para S. aureus. Frente a E. coli, os óleos de gengibre (0,52) e capim cidreira (0,55) foram equivalentes quanto à eficiência. De acordo com as curvas de sobrevivência, foi possível verificar também que os valores de CIM90% obtidos podem ser tanto bactericidas ou bacteriostáticas de acordo com a bactéria testada. Em conclusão, verificou-se que os óleos essenciais testados foram efetivos no controle do desenvolvimento bacteriano, sendo o potencial antimicrobiano diferente em função da espécie bacteriana testada, sendo que a bactéria Gram positiva (S. aureus) mostrou-se mais susceptível aos óleos testados que a Gram negativa (E. coli).The in vitro antibacterial activity of essential oils from six plants was verified through minimal inhibitory concentration (MIC=%v/v), determined by diluting the oils in culture medium Mueller Hinton Agar, against Staphylococcus aureus (n=16) and Escherichia coli (n=16) strains isolated from human clinical specimens, besides one standard ATCC strain for each species (Sa 25923 and Ec 25922). Time-kill curves were also determined at concentrations equivalent to MIC90% for the respective oils. Cinnamon oil was the most efficient, with MIC90% values of 0.047 and 0.09 against S. aureus and E. coli, respectively, whereas ginger (0.09), cloves (0.095) and lemon grass (0.1) showed similar activities against S. aureus. Ginger (0.52) and lemon grass (0.55) oils were equivalent in efficiency against E. coli strains. According to the time-kill curves, the obtained MIC90% values could indicate either bactericidal or bacteriostatic effects depending on the tested bacterium. Thus, the studied essential oils were effective to control bacterial development, the antimicrobial potential differed with the tested bacterial species, and Gram-positive bacteria (S. aureus) strains were more susceptible to the tested oils than Gram-negative ones (E. coli)

Atividade antibacteriana de Óleos Essenciais sobre Streptococcus mutans e Staphylococcus aureus

The aim of this study is to evaluate the in vitro antimicrobial activity of essential oils of Ocimum basilicum (basil), Thymus vulgaris (thyme) and Cinnamomum cassia (Chinese cinnamon) against strains of Streptococcus mutans (ATCC 25175) and Staphylococcus aureus (ATCC 25923). The antibacterial activity of the essential oils was determined by Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bactericidal Concentration (MBC). The MIC was obtained by the microdilution technique using 96-well microplates, in which we inserted: 100µL of Brain Heart Infusion broth at double concentration, 100µL of the dilution of the essential oils and 10µL of bacterial suspension (1.5 x 10(6) organisms / mL). The products were diluted from the initial concentration of 8% up to 0.0625%. The MIC corresponded to the last dilution in which there was no presence of bacteria or turbidity in the culture medium. The MBC was obtained by seeding, in Mueller-Hinton agar, 10µL aliquots of dilutions corresponding to the MIC and the two immediately preceding ones (2MIC and 4MIC). The plates were incubated at 37°C in a bacteriological incubator for 24 hours. The tests were performed in triplicate, and 2% Chlorhexidine Digluconate was the control product. For S. aureus, the MIC and MBC of the essential oils of C. cassia, O. basilicum and T. vulgaris were 0.0625%, 0.0625% and 4%, respectively. For S. mutans, the MIC and MBC of the essential oils of C. cassia and T. vulgaris were 0.125% and 0.25%, respectively. The MIC of O. basilicum against S. mutans was 4% and the essential oil showed no bactericidal action. Chlorhexidine Digluconate presented antibacterial activity against all organisms. The evaluated essential oils presented antibacterial activity against the strains of S. mutans and S. aureus, and we highlight the essential oils from C. cassia and T. vulgaris with the lowest MIC and MBC.Este trabalho objetivou avaliar a ação antimicrobiana in vitro dos óleos essenciais de Ocimum basilicum (Manjericão Exótico), Thymus vulgaris (Tomilho Branco), e de Cinnamomum cassia (Canela da China) sobre cepas bacterianas de Streptococcus mutans (ATCC 25175) e Staphylococcus aureus (ATCC 25923). A atividade antibacteriana dos óleos essenciais foi determinada pela Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Bactericida Mínima (CBM) através da técnica de microdiluição e do esgotamento. Para a CIM, foram utilizadas placas de 96 poços e inseriu-se 100µL de caldo BHI, 100µL da diluição dos óleos essenciais no primeiro poço e 10µL da suspensão bacteriana (1,5x10(6) microrganismos/mL). Realizou-se a diluição seriada partindo-se da concentração inicial de 8% até 0,0625%. A CIM correspondeu à última diluição na qual não foi verificada a presença de bactérias. Para obter a CBM, realizou-se a semeadura em Ágar Miller-Hinton das diluições correspondentes a CIM, 2CIM e 4CIM. As placas foram incubadas a 37º C em estufa bacteriológica por 24 horas. Os testes foram realizados em triplicata tendo a clorexidina como controle positivo. Para S. aureus (ATCC 25923) a CIM e CBM dos óleos essenciais de C. cassia, O. basilicum e T. vulgaris foram 0,0625%, 4% e 0,0625%, respectivamente. Para S. mutans a CIM e a CBM dos óleos essenciais de C. cassia e T. vulgaris foram 0,125% e 0,25%, respectivamente. Já a CIM do O. basilicum foi 4% e não apresentou ação bactericida. Conclui-se que os óleos essenciais avaliados apresentaram ação antibacteriana frente a cepas de S. mutans e S. aureus, sendo que os menores valores de CIM e de CBM foram provenientes dos óleos de C. cassia e T. vulgaris.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Universidade Federal da ParaíbaUniversidade Estadual Paulista Faculdade de Odontologia de Araraquara Departamento de Dentística RestauradoraUniversidade Federal da Paraíba Departamento de Clínica e Odontologia SocialUniversidade Estadual Paulista Faculdade de Odontologia de Araraquara Departamento de Dentística Restaurador

Atividade antifúngica de óleos essenciais frente a amostras clínicas de Candida albicans isoladas de pacientes HIV positivos

Objetivou-se avaliar a atividade antifúngica dos óleos essenciais de Ocimum basilicum L. (manjericão), Cymbopogon martinii L. (palmarosa), Thymus vulgaris L. (tomilho) e Cinnamomum cassia Blume (canela da china) sobre cepas de Candida albicans isoladas de pacientes HIV positivos e cepa padrão (ATCC 76845). Quinze amostras clínicas de C. albicans (C1-C15) foram repicadas em ágar Sabouraud Dextrose, para confecção de suspensões em solução salina estéril (0,9%) contendo 1,5 x 10(6) UFC mL-1. As emulsões dos óleos essenciais foram preparadas em água destilada estéril e tween 80, com concentrações variando entre 1024 µg mL-1 e 4 µg mL-1. A ação antifúngica foi determinada por meio da Concentração Inibitória Mínima (CIM) utilizando-se a técnica da microdiluição. Foram utilizados como controles positivos a nistatina e o miconazol (50 µg mL-1). Os testes foram realizados em triplicata, sendo a CIM, a menor concentração capaz de inibir o crescimento das leveduras, observada por método visual de acordo com a turvação do meio de cultura. Para C. albicans (ATCC 76845), a CIM do óleo essencial de C. cassia foi 64 µg mL-1, enquanto para óleo de C. martinii foi 1024 µg mL-1. Para as cepas clínicas, verificou-se que a CIM de C. cassia para 80% das cepas foi 64 µg mL-1, sendo a variação dos valores da CIM entre 128 µg mL-1 e 64 µg mL-1. Observou-se que para 66,6% das amostras clínicas, a CIM de C. martinii foi 612 µg mL-1. Constatou-se que a nistatina não apresentou atividade frente às cepas clínicas (C1-C15), enquanto a atividade antifúngica do miconazol foi verificada em 100% das amostras. Não se constatou atividade antimicrobiana dos óleos essenciais de O. basilicum e T. vulgaris, nas concentrações avaliadas. Concluiu-se que os óleos essenciais de C. cassia e C. martinii, em diferentes concentrações, apresentam atividade antifúngica sobre cepas de C. albicans isoladas de pacientes HIV positivos e cepa padrão (ATCC 76845). Entretanto não foi observada inibição antimicrobiana para os óleos de O. basilicum e T. vulgaris.The aim of this study was to evaluate the antifungal activity of essential oils from Ocimum basilicum L. (basil), Cymbopogon martinii L. (palmarosa), Thymus vulgaris L. (thyme) and Cinnamomum cassia Blume (Chinese cinnamon) against Candida albicans strains isolated from HIV-positive patients and the standard strain (ATCC 76845). Fifteen clinical samples of C. albicans (C1-C15) were subcultured in Sabouraud Dextrose agar to prepare suspensions in sterile saline solution (0.9%) containing 1.5 x 10(6) CFU mL-1. The emulsions of essential oils were prepared in sterile distilled water and Tween 80, with concentrations ranging between 1024 µg mL-1 and 4 µg mL-1. The antifungal action was determined by means of the Minimum Inhibitory Concentration (MIC), using the microdilution technique. Nystatin and miconazole (50 µg mL-1) were used as positive controls. The tests were performed in triplicate and the MIC was the lowest concentration capable of inhibiting the growth of yeasts, which was observed by the visual method, according to the turbidity of the culture medium. For C. albicans (ATCC 76845), the MIC of C. cassia essential oil was 64 µg mL-1, while the MIC for C. martini was 1024 µg mL-1. Considering the clinical strains, the MIC of C. cassia was 64 µg mL-1 for 80% of the strains, and the variation in MIC values was between 128 µg mL-1 and 64 µg mL-1. For 66.6% of the clinical samples, the MIC of C. matinii was 612 µg mL-1. Nystatin did not present activity against the clinical strains (C1-C15), while the antifungal activity of miconazole was noticed for 100% of the samples. The antimicobrial activity of essential oils from O. basilicum and T. vulgaris was not identified at the evaluated concentrations. It was concluded that the essential oils from C. cassia and C. martinii, at different concentrations, presented antifungal activity against C. albicans strains isolated from HIV-positive patients and the standard strain (ATCC 76845). However, antifungal activity was not observed for the essential oils from O. basilicum and T. vulgaris.Universidade Estadual Paulista Faculdade de Odontologia de Araraquara Departamento de Odontologia RestauradoraUniversidade de Campinas Faculdade de Odontologia de Piracicaba Departamento de Prótese e PeriodontiaUniversidade Federal da Paraíba Departamento de Clínica e Odontologia SocialUniversidade Federal da Paraíba Departamento de Ciências FarmacêuticasUniversidade Estadual Paulista Faculdade de Odontologia de Araraquara Departamento de Odontologia Restaurador

Expressão e atividade enzimática de glutationa s-transferase em tecidos de fêmeas de Boophilus microplus

Enzimas de detoxificação e excreção celular são importantes para a manutenção da homeostase celular. Neste trabalho foi caracterizada a transcrição de mRNA, a expressão da proteína e a atividade enzimática de glutationa S-transfersases (GSTs), enzimas que atuam em rotas de excreção de substâncias endo e xenobióticas, protegendo as células contra toxicidade química e estresse, em diferentes tecidos (glândula salivar, ovário e singânglio) de fêmeas adultas semi-ingurgitadas e ingurgitadas do carrapato do bovino Boophilus microplus. Os resultados mostraram que a atividade de GST é mais alta em fêmeas semi-ingurgitadas e diminui em fêmeas ingurgitadas de acordo com o final do período de pré-postura. A expressão de mRNA de GST foi detectada em glândulas salivares e singânglios de fêmeas adultas semi-ingurgitadas e ingurgitadas, mas não em ovários. Estes dados podem ajudar a compreender melhor o papel de enzimas antioxidantes durante a preparação das fêmeas do carrapato para a postura.Cellular detoxification and excretion enzymes are important to the maintenance of cellular homeostasis. In this work mRNA transcription, protein expression and enzymatic activity of Glutathione S-transferases (GSTs), enzymes involved in the excretion of endo and xenobiotic compounds were analyzed. These parameters are elements believed to protect cells against chemical toxicity and oxidative stress in different tissues (salivary gland, ovary and synganglion) from partially engorged females and engorged females of Boophilus microplus. The results presented showed elevated GST activity in partially engorged females. The enzymatic activity decreased during the preoviposition period in engorged females. GST mRNA transcription was detected in salivary glands and synganglion from partially engorged and engorged females, but not in ovary. The results of this work help to elucidate the role of GST in tick development and assist in the understanding of the importance of GST in tick females during the preparation for oviposition