The crude skin secretion of the pepper frog Leptodactylus labyrinthicus is rich in metallo and serine peptidases

Peptidases are ubiquitous enzymes involved in diverse biological processes. Fragments from bioactive peptides have been found in skin secretions from frogs, and their presence suggests processing by peptidases. Thus, the aim of this work was to characterize the peptidase activity present in the skin secretion of Leptodactylus labyrinthicus. Zymography revealed the presence of three bands of gelatinase activity of approximately 60 kDa, 66 kDa, and 80 kDa, which the first two were calcium-dependent. These three bands were inhibited either by ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) and phenathroline; thus, they were characterized as metallopeptidases. Furthermore, the proteolytic enzymes identified were active only at pH 6.0–10.0, and their activity increased in the presence of CHAPS or NaCl. Experiments with fluorogenic substrates incubated with skin secretions identified aminopeptidase activity, with cleavage after leucine, proline, and alanine residues. This activity was directly proportional to the protein concentration, and it was inhibited in the presence of metallo and serine peptidase inhibitors. Besides, the optimal pH for substrate cleavage was determined to be 7.0–8.0. The results of the in gel activity assay showed that all substrates were hydrolyzed by a 45 kDa peptidase. Gly-Pro-AMC was also cleaved by a peptidase greater than 97 kDa. The data suggest the presence of dipeptidyl peptidases (DPPs) and metallopeptidases; however, further research is necessary. In conclusion, our work will help to elucidate the implication of these enzymatic activities in the processing of the bioactive peptides present in frog venom, expanding the knowledge of amphibian biology

Reposicionamento para rede Paradoja

O Paradoja Bar foi escolhido como cliente para este projeto de campanha de comunicação integrada por conta do crescimento exponencial que a marca teve em quatro anos e meio dentro do mercado gastronômico de Curitiba. A rede tem seus diferenciais dentro do mercado. A produção dos alimentos é estrategicamente pensada para assim se destacar dos demais concorrentes. O tempero dos alimentos é único, seus hambúrgueres são feitos inteiramente pela cozinha da rede, sendo entregues por centros de distribuição. A rede conta com seis lojas na capital paranaense e estão em processo de abertura da sua primeira loja em shopping.  Almejando atingir um novo público com um reposicionamento da marca, este trabalho traz uma uma padronização na comunicação da rede Paradoja, realizando um rebranding da marca, pois foi detectado pela equipe que cada estabelecimento tem uma logomarca diferente da outra e suas redes sociais usam cada um estilo diferente. A marca é reconhecida nas suas localizações, principalmente na sua sede principal na Rua Trajano Reis e já é bem conhecida na região. A rede não possui um posicionamento padrão, pois não apresenta um planejamento de comunicação para assim divulgar o nome do Paradoja. A empresa acaba não focando em apenas uma maneira de divulgação fazendo com que o cliente acabe ficando perdido em meio a forma em que a empresa se comporta nas redes sociais, principalmente no Instagram, e isso acaba influenciando no contato com seus clientes. O foco passa a ser explorar a grande variedade de produtos que a rede tem a proporcionar para os clientes sem perder o público atual, além de reforçar a marca Paradoja - não como Paradoja Bar ou Paradoja Burguer. Além disso, a campanha terá como foco desenvolver a ideia de um ambiente que pode proporcionar comida de qualidade e não ficar resumida somente a um prato específico. A campanha também terá como foco a padronização da comunicação da empresa, explorando valorizar os produtos que a rede já oferece, mostrando o novo posicionamento da marca e fazendo com que a empresa ganhe mais nome e crescimento

“O direito de estudar”: capacitação de professores para o combate a evasão escolar

Trabalho apresentado no II Congresso Nacional do PROJETO RONDON, realizado em Florianópolis, SC, no período de 23 a 25 de setembro de 2015 - Universidade Federal de Santa Catarina.A Constituição Federal determina que “a educação é direito de todos e dever do Estado e da família”. O problema da evasão escolar é um grande desafio enfrentado pela educação na atualidade, mas já estão presentes na história da educação escolar brasileira há décadas, tornando-se fenômenos crônicos e ainda demandando respostas e ações capazes de combatê-los. As maiores causas da evasão escolar são: desemprego dos pais e baixos salários, falta de motivação dos pais para enviar os filhos a escola, a baixa autoestima das crianças e adolescentes que não consideram a escola capaz de prepará-los para o mercado de trabalho, além de casos de gravidez afastando jovens da escola precocemente. O objetivo desta ação foi discutir entre os professores a problemática e as causas da evasão escolar, analisar qual o papel do professor nesse contexto e apresentar estratégias para reduzir o índice de evasão escolar e aumentar a assiduidade dos alunos as aulas e demais eventos escolares. A ação, que teve como público os professores da rede municipal da cidade de Itupiranga-PA, foi realizada em dois momentos. No primeiro momento, foi apresentada uma palestra expositiva sobre o tema da evasão escolar suas causas e consequências. No segundo momento os professores foram divididos em grupos e cada grupo descreveu as causas e os enfrentamentos relacionados à evasão escolar no seu local de trabalho. Com estas informações relatadas foi criado um quadro apontando os principais problemas e o seu grau de governabilidade. A partir destes apontamentos foi produzido um documento direcionando os principais pontos discutidos, com objetivo de ser encaminhados aos órgãos competentes do município para multiplicação da discussão de forma intersetorial. Concluiu-se que combate à evasão escolar deve ser um compromisso não só dos educadores, mas de toda a sociedade, criando oportunidades capazes de minimizar as dificuldades enfrentadas pelo alunado e suas famílias quanto ao acesso, permanência e seguimento nos estudos nos anos seguintes. Assim, esta oficina mostrou a necessidade da reflexão sobre as causas e consequências da evasão escolar, relacionando-as as respectivas ações capazes de combatê-las

Caracterização química e biológica da secreção cutânea do anuro Leptodactylus labyrinthicus: peptídeos antimicrobianos e anticarcinogênicos, fosfolipases e peptidases

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2008.Atualmente, o surgimento de resistência às drogas disponíveis no mercado pelos microorganismos e pelas células de câncer tornou o desenvolvimento de novas formas terapêuticas imprescindível. A secreção cutânea dos anfíbios é uma rica fonte natural de peptídeos com atividades anticarcinogênica (PAC) e antimicrobiana (PAM). Entretanto, o veneno desses animais também é constituído de outras macromoléculas, por exemplo, enzimas, as quais têm sido pouco investigadas. O presente estudo teve como objetivo caracterizar, de forma geral, a secreção glandular da rã-pimenta Leptodactylus labyrinthicus. Especificamente, buscou-se identificar e caracterizar química e biologicamente alguns dos peptídeos presentes, além de investigar a presença de atividades enzimáticas. O estudo revelou a ocorrência de inúmeros peptídeos e proteínas, demonstrando a riqueza e o potencial biológico desse veneno. Os dois peptídeos antimicrobianos purificados foram fallaxin e pentadactylin, os quais já haviam sido isolados de outras espécies do gênero Leptodactylus. Ambos apresentaram atividade contra bactérias Gram-positivas e Gram-negativas; e fallaxin foi identificado como fracamente hemolítico. Como vários PAMs de amplo espectro de ação também são citotóxicos para células de câncer, os dois peptídeos isolados foram testados contra as linhagens celulares de câncer HeLa, MCF-7 e B16F10, demonstrando-se efetivos contra todas as linhagens. Observou-se também que os dois PACs são pouco seletivos, pois foram mais tóxicos para células normais de fibroblasto (FHN) do que para as células tumorais. Portanto, o uso terapêutico desses PACs deverá ser via estratégias que aumentem a especificidade dos mesmos. Os estudos de mecanismo de ação com pentadactylin não foram conclusivos, sugerindo a morte de células de MCF-7 via apoptose, podendo ser seguida pelo processo necrótico. Além desses, o fragmento Flx-16 de fallaxin e o peptídeo PGL-Ll, rico em glicina e leucina, foram testados, contudo nenhuma atividade biológica foi detectada. A investigação da atividade enzimática da secreção revelou a presença de enzimas proteolíticas pertencentes aos clãs das metalo- e serino-peptidases e que atuam de maneira ótima em pH neutro a ligeiramente básico; e de fosfolipases do tipo A2. O estudo e caracterização da composição da secreção cutânea de anfíbios são de extrema relevância, podendo ajudar a esclarecer questões taxonômicas, identificar drogas terapêuticas em potencial, além de auxiliar no entendimento da biologia dos anfíbios. _________________________________________________________________________________ ABSTRACTNowadays, the emergence of resistance to the current available chemotherapeutic drugs by microorganisms and cancer cells make the development of new agents imperative. The skin secretion of amphibians is a natural rich source of antimicrobial (PAM) and anticancer peptides (PAC). Nevertheless, the venom of these animals is also composed by other macromolecules, such as enzymes, which have not been studied extensively yet. The aim of this study was to characterize the glandular secretion of the pepper-frog Leptodactylus labyrinthicus, targeting to identify and characterize chemically and biologically some of the peptides present, besides detecting enzymatic activities. The research has found a variety of peptides and proteins, showing the richness and the biological potential of this venom. Two PAMs were purified, fallaxin and pentadactylin, which have already been isolated from other species of the genus Leptodactylus. Both peptides were active against Gram-positive and Gram-negative bacterias; moreover, fallaxin showed a weak hemolytic activity. As some PAMs of broad spectrum of action are also toxic to cancer cells, the two peptides isolated were tested against the cancer cell lines HeLa, MCF-7 and B16F10, being effective against all of them. We noticed that both PACs aren’t specific, since they have been more toxic to normal fibroblast cells (FHN) than to tumor cells. Therefore, it is mandatory that the therapeutic use of these PACs be accompanied by strategies that enhance their selectiveness. The studies of action mechanism with pentadactylin were not conclusive, suggesting that MCF-7 cells die by apoptosis; however it may be followed by necrosis. The peptide PGL-Ll, rich in glycine and leucine, and the fragment Flx-16 from fallaxin were tested, though no biological activity was found. The research of enzyme activity of the secretion revealed the presence of proteolytic enzymes of the clans metallo- and serine-peptidases, and that they act optimally at neutral to slightly basic pH, and of phospholipases A2. The study and characterization of the skin secretion of amphibians is of extreme relevance, helping to elucidate taxonomic issues, identifying putative therapeutic drugs, besides helping to understand the biology of amphibians

POPULISMO JUDICIAL: PERSPECTIVA CRÍTICA A PARTIR DA ATUAÇÃO DO SUPREMO TRIBUNAL FEDERAL

Este trabalho apresenta uma análise crítica do populismo judicial a partir de algumas decisões do Supremo Tribunal Federal. O objetivo da pesquisa é apresentar uma crítica à decisões judiciais, particularmente do Supremo Tribunal Federal, cujas fundamentações apresentem um caráter marcadamente populista e equidistante das normas jurídicas vigentes. Portanto, a questão que se levanta é se decisões judiciais pautadas em motivações de apelo popular são legítimas e democráticas. Este trabalho assume uma abordagem indutiva para enfrentar algumas decisões do STF, e a partir de uma leitura documental avaliar criticamente se são casos de populismo judicial. Dessa forma, pretendeuse por meio de um procedimento bibliográfico tão somente de alguns contextos políticosociais, textos específicos sobre ativismo judicial, como também do populismo, sistematizar na jurisdição constitucional as decisões que assumem um caráter populista. A abordagem também aponta para as repercussões do discurso judicial populista na democracia brasileira. E, portanto, tem-se como principais resultados o reconhecimento do populismo judicial no STF e a crise democrática a ele associad

Modelação Numérica

O conhecimento do comportamento do escoamento é fundamental no estudo de soluções para proteção de margens, controlo de escoamentos e inundações. A implementação de campos de esporões tem-se verificado como uma medida adequada de prevenção de erosão, sendo essencial o estudo da interação destas estruturas com o escoamento. Nesta dissertação pretende-se estudar com recurso a simulação numérica, a influência do campo de esporões no comportamento do escoamento no canal meandriforme existente no Laboratório de Hidráulica do Departamento de Engenharia Civil e Arquitetura da Universidade da Beira Interior. Definiu-se como objetivo avaliar as alterações impostas no escoamento quando adotado um campo de esporões na proteção da margem exterior de uma curva. Inicialmente, procedeu-se à construção e validação de um modelo numérico, tendo-se testado os modelos de turbulência ??-?? padrão, ??-?? RNG, ??-?? padrão e ??-?? SST, de entre os quais, o modelo ??-?? padrão mostrou uma adequada aproximação ao escoamento real. A validação do modelo teve por base os resultados experimentais obtidos por Vicario (2016) nesse canal. Após a validação do modelo, estudou-se a influência do número de esporões no comportamento do escoamento, tendo em consideração a sua orientação, espaçamento e ângulo de mergulho. Das simulações realizadas no presente estudo, concluiu-se que os esporões mergulhantes orientados a montante sofrem menor efeito erosivo na sua extremidade e provocam menor desvio do escoamento para o intradorso da curva. Desta forma, os esporões mergulhantes e orientados para montante mostraram-se viáveis para o caso de estudo uma vez que dois esporões permitiram a proteção integral da margem exterior sem um agravamento das condições de escoamento para as curvas de jusante.The knowledge of the flow field behaviour is fundamental for the study for riverbanks protection solutions, as well as flow field and flood controls. The implementation of spur dikes fields has proven to be a good erosion preventive measure, being essential the study of the interaction between these structures and the flow field itself. In this dissertation is intended to study, the influence of the spur dikes fields on the flow field channel with a meandering form, which is available at the Hydraulic Laboratory of the Architecture and Civil Engineering Department of the University of Beira Interior. For this study, a numerical simulation has been used. The objective of this study is to analyse the flow field behaviour understanding when a spur dikes field is applied to protect the external margin of the curve. The development and validation of a model took place by testing turbulence models k-e standard, k-e RNG, k-? standard and k-? SST, among which, k-? standard has shown the best proximity to the real flow field results. The model validations had, as base reference, the experimental results obtained by Vicario (2016) on the above cited channel. Afterwards model validation, the influence of the number of spur dikes on the drainage behaviour has been studied considering their orientation, space and the plunge angle. From all performed simulations in this study, it can be concluded that, the spur dikes plunging towards the centre the channel presenting an upstream orientation suffer lower erosion effect on their extremity and cause lower flow field deviation for inner curve. Therefore, these same spur dikes revealed to be the most suitable ones once, two were enough to protect all external riverbank without compromising the flow for the downstream curves

Diversidade cultural nas artes visuais e artes indígenas no Brasil e na educação básica indígena

This article encompasses visual arts, history, culture, and society in Brazil. It focuses on indigenous cultural expressions in Brazil, particularly visual productions. Given this reality, the school is considered a place where knowledge can converge to facilitate a harmonious relationship among different interethnic groups. The overall objective was to analyze the importance and appreciation of indigenous arts in indigenous schools, such as body painting, mask making, and ceramic painting activities. For this study, qualitative data was collected through a literature review, where a meticulous and comprehensive analysis of publications relevant to this research was conducted. The findings highlight the importance of promoting a school environment where integrating participants in the teaching-learning process is crucial in valuing human beings.Este artículo trata de las artes visuales, la historia, la cultura y la sociedad en Brasil. Su eje temático son las manifestaciones culturales indígenas en Brasil, y sus objetos, las producciones visuales. Frente a esta realidad, la escuela es considerada un lugar donde el conocimiento puede converger para que haya una relación armoniosa entre los diferentes grupos interétnicos. El objetivo general fue analizar la importancia y la valorización de las artes indígenas en las escuelas indígenas, como las actividades de pintura corporal, confección de máscaras y pintura cerámica. Para este estudio cualitativo, se utilizó una revisión bibliográfica o de literatura para la recolección de datos, en la que se realizó un análisis minucioso y amplio de las publicaciones acordes con esta investigación. Los resultados presentados apuntan a la importancia de promover un ambiente escolar en el que la integración de los involucrados en el proceso de enseñanza-aprendizaje sea fundamental para la valoración del ser humano.Este artigo compreendeu as artes visuais, história, cultura e sociedade no Brasil. Tendo como eixo temático as manifestações culturais indígenas no Brasil, e por objetos as produções visuais. Frente a essa realidade, a escola é considerada um local onde os saberes podem convergir para que haja uma relação harmoniosa entre os diferentes grupos interétnicos. O objetivo geral foi analisar a importância e a valorização das artes indígenas nas escolas indígenas, como a pintura corporal, a confecção de máscaras e as atividades de pintura em cerâmica. Para este estudo, de forma qualitativa, utilizou-se para coleta de dados a revisão bibliográfica ou da literatura, onde foi feito uma análise meticulosa e ampla das publicações coerente para esta pesquisa. Os resultados apresentados apontam a importância de promover um ambiente escolar onde a integração dos envolvidos no processo ensino-aprendizagem é fundamental na valorização do ser humano