A Novel Peptide Derived from Human Pancreatitis-Associated Protein Inhibits Inflammation In Vivo and In Vitro and Blocks NF-Kappa B Signaling Pathway

BACKGROUND: Pancreatitis-associated protein (PAP) is a pancreatic secretory protein belongs to the group VII of C-type lectin family. Emerging evidence suggests that PAP plays a protective effect in inflammatory diseases. In the present study, we newly identified a 16-amino-acid peptide (named PAPep) derived from C-type lectin-like domain (CTLD) of human PAP with potent anti-inflammatory activity using both in vivo and in vitro assays. METHODOLOGY/PRINCIPAL FINDINGS: We assessed the anti-inflammatory effect of PAPep on endotoxin-induced uveitis (EIU) in rats and demonstrated that intravitreal pretreatment of PAPep concentration-dependently attenuated clinical manifestation of EIU rats, reduced protein leakage and cell infiltration into the aqueous humor (AqH), suppressed tumor necrosis factor (TNF)-α, interleukin (IL)-6, intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and monocyte chemoattractant protein (MCP)-1 production in ocular tissues, and improved histopathologic manifestation of EIU. Furthermore, PAPep suppressed the LPS-induced mRNA expression of TNF-α and IL-6 in RAW 264.7 cells, inhibited protein expression of ICAM-1 in TNF-α-stimulated human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) as well as U937 cells adhesion to HUVECs. Western blot analysis in ocular tissues and different cell lines revealed that the possible mechanism for this anti-inflammatory effect of PAPep may depend on its ability to inhibit the activation of NF-kB signaling pathway. CONCLUSIONS/SIGNIFICANCE: Our studies provide the first evidence that the sequence of PAPep is within the critically active region for the anti-inflammatory function of PAP and the peptide may be a promising candidate for the management of ocular inflammatory diseases

Critical Involvement of the ATM-Dependent DNA Damage Response in the Apoptotic Demise of HIV-1-Elicited Syncytia

DNA damage can activate the oncosuppressor protein ataxia telangiectasia mutated (ATM), which phosphorylates the histone H2AX within characteristic DNA damage foci. Here, we show that ATM undergoes an activating phosphorylation in syncytia elicited by the envelope glycoprotein complex (Env) of human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) in vitro. This was accompanied by aggregation of ATM in discrete nuclear foci that also contained phospho-histone H2AX. DNA damage foci containing phosphorylated ATM and H2AX were detectable in syncytia present in the brain or lymph nodes from patients with HIV-1 infection, as well as in a fraction of blood leukocytes, correlating with viral status. Knockdown of ATM or of its obligate activating factor NBS1 (Nijmegen breakage syndrome 1 protein), as well as pharmacological inhibition of ATM with KU-55933, inhibited H2AX phosphorylation and prevented Env-elicited syncytia from undergoing apoptosis. ATM was found indispensable for the activation of MAP kinase p38, which catalyzes the activating phosphorylation of p53 on serine 46, thereby causing p53 dependent apoptosis. Both wild type HIV-1 and an HIV-1 mutant lacking integrase activity induced syncytial apoptosis, which could be suppressed by inhibiting ATM. HIV-1-infected T lymphoblasts from patients with inactivating ATM or NBS1 mutations also exhibited reduced syncytial apoptosis. Altogether these results indicate that apoptosis induced by a fusogenic HIV-1 Env follows a pro-apoptotic pathway involving the sequential activation of ATM, p38MAPK and p53

Eficiência da estimação da área foliar de couve por meio de redes neurais artificiais

A estimativa da área foliar na couve é importante, pois medidas diretas são difíceis e imprecisas, devido ao tamanho da folha, a irregularidade da superfície foliar de alguns genótipos, a necessidade de equipamentos caros e de muita mão-de-obra. Objetivou-se verificar a eficiência da estimação da área foliar de couve por meio de RNAs e constatar a eficiência desta estratégia em comparação com o uso da área foliar observada. O experimento foi conduzido em delineamento de blocos casualizados com três repetições, 22 acessos e quatro plantas por parcela. Desenvolveram-se perceptrons de multicamadas utilizando 50 folhas por acesso, destinando-se 70% para treinamento, 15% para a validação cruzada (early-stop) e 15% para teste. Foram testadas 39 configurações de rede perceptron de multicamadas. As RNAs foram eficientes para estimar a área foliar da couve a partir do comprimento e largura do limbo foliar. A área foliar estimada pela RNA é indicada para a seleção de plantas por ser de fácil obtenção, ser um método não destrutivo, apresentar alta correlação fenotípica e genética com a área foliar observada e maior herdabilidade.A estimativa da área foliar na couve é importante, pois medidas diretas são difíceis e imprecisas, devido ao tamanho da folha, a irregularidade da superfície foliar de alguns genótipos, a necessidade de equipamentos caros e de muita mão-de-obra. Objetivou-se verificar a eficiência da estimação da área foliar de couve por meio de RNAs e constatar a eficiência desta estratégia em comparação com o uso da área foliar observada. O experimento foi conduzido em delineamento de blocos casualizados com três repetições, 22 acessos e quatro plantas por parcela. Desenvolveram-se perceptrons de multicamadas utilizando 50 folhas por acesso, destinando-se 70% para treinamento, 15% para a validação cruzada (early-stop) e 15% para teste. Foram testadas 39 configurações de rede perceptron de multicamadas. As RNAs foram eficientes para estimar a área foliar da couve a partir do comprimento e largura do limbo foliar. A área foliar estimada pela RNA é indicada para a seleção de plantas por ser de fácil obtenção, ser um método não destrutivo, apresentar alta correlação fenotípica e genética com a área foliar observada e maior herdabilidade.CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoFAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas GeraisCAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superio